1.一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)：样品预处理
将采集到的药用石斛材料用70％-75％的乙醇水溶液擦拭表面后，按同种类混合在一起，取8-12g，加入10-12mL DNA提取缓冲液，放在提前预冷至(-25)-(-20)℃的研钵中，用研棒将其研磨成糊状，再用移液枪吸180-200uL至离心管中；
(2)：DNA初步提取
①快速向上述离心管中加入400-500uL提前预热至60-65℃的DNA提取缓冲液，上下摇动混匀，60-65℃水浴1-1.5h后取出离心管，10000-12000r/min离心10-15min；
②取上清液，加入等体积的氯仿与异戊醇混合液，上下颠倒离心管25-35次，10000-12000r/min离心10-15min，取上清液，再用氯仿与异戊醇混合液处理1-2次，10000-12000r/min离心；
③取上清液0.8-1mL到离心管中，加入0.4-0.6mL提前预冷至(-25)-(-20)℃的异丙醇并混匀，静置10-15min，10000-12000r/min离心10-15min，弃上清，沉淀分别用70％-75％乙醇、无水乙醇各洗2-3次，60℃-65℃挥干乙醇5-6min，此沉淀即为基因组DNA初提物，最后，加100-150ul灭菌蒸馏水溶解DNA，即获得DNA提取液；
(3)：DNA的检测及保存
在得到DNA提取液后，对其纯度、浓度、完整性分别进行相应的检测及记录，再将检测完成的对应DNA提取液进行分管低温保存待用；
(4)：ISSR-PCR反应
①ISSR-PCR反应体系：
模板10ng/L，引物0.3μM，Mg2+2.0mM，dNTP 200μM，Taq聚合酶1U/20μl；
②ISSR-PCR反应：
以获取的DNA作为ISSR-PCR反应的模板，在PCR仪上进行ISSR-PCR扩增反应；
第一阶段：反应体系中加入第一组引物，94℃预变性8min，94℃变性45s，58℃退火45s，72℃延伸2min，扩增10个循环；
第二阶段：在上述反应体系中加入第二组引物，94℃变性45s，58-50℃退火45s，72℃延伸2min，扩增25个循环，梯度退火，最后于72℃终延伸8min；
(5)：电泳检测及基因分型能力评估
取3-5μl扩增产物用1.0％-1.5％琼脂糖凝胶，5-10V/cm恒压电泳检测，溴化乙锭染色后用凝胶成像系统对电泳检测结果进行拍照，获取相应电泳检测结果图，并对引物的基因分型能力进行评估分析，根据基因分型能力评估分析结果，确定该电泳检测结果是否可有效区分全部样品；
(6)：ISSR-PCR指纹图谱的建立
当基因分型能力评估结果显示电泳检测结果可有效区分全部样品后，该电泳检测结果图即为所选择鉴别的不同种药用石斛的ISSR-PCR指纹图谱；
(7)：未知种属的石斛样品种类的鉴定
把未知种属的石斛样品按照上述步骤(1)-(6)建立其相应的ISSR-PCR指纹图谱，再将其与已建立的已知种属的药用石斛的ISSR-PCR指纹图谱的信息相比较，当其与某一泳道的条带信息的吻合度达98％以上，即可判定为同一种；当其与某一泳道的条带信息的吻合度介于95％-98％之间，则可确定为近似种；当其与所有条带的吻合度都低于95％，即可判定不属于已知的任何一种药用石斛种类。
2.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(1)中药用石斛的种类分别为霍山石斛、霍山铁皮石斛、霍山细茎石斛及其相似种；所述相似种又进一步包括云南铁皮石斛、浙江铁皮石斛、河南石斛、安徽曲茎石斛、霍山细茎石斛♂×霍山铁皮石斛♀杂交种、霍山石斛♂×霍山细茎石斛杂交种。
3.根据权利要求2所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(2)中氯仿与异戊醇混合液为体积比分别为24:1的氯仿与异戊醇混合液。
4.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(1)和步骤(2)中DNA提取缓冲液的配方为：0.1mol·L-1Tris-HCl(pH 8.0)，0.02mol·L-1EDTA(pH 8.0)，1.5mol·L-1NaCl，2％PVP40(W/V)，2％CTAB(W/V)，临用前加3％的β-巯基乙醇。
5.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(2)中水浴过程要同时对离心管中的混合液进行不间断的混匀，所述不间断的混匀方式为：水浴的前10min，每隔3min摇动离心管；剩余时间内，每隔10min上下颠倒离心管2-4次。
6.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(3)中利用紫外分光光度法进行DNA提取液的纯度和浓度检测，利用0.5％琼脂糖凝胶电泳进行DNA提取液的完整性检测。
7.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(3)中分管低温保存方法为：先将检测完成的DNA提取液进行分管，即用移液枪吸取100uL检测完成的DNA提取液至1.5mL离心管中，再重复操作至无剩余DNA提取液，再将分装完成的各离心管置于-20℃冰箱中保存。
8.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(4)中第一组引物为不含锚定碱基的两个引物序列：(AT)8，(CT)8；第二组引物为含两个锚定碱基的两个引物序列：(AT)8CG,(CT)8GA。
9.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(5)中各引物的基因分型能力的评估分析方法为：先根据电泳检测结果图上相同条带的有或无，统计得到所有位点的二元数据，再根据该位点具有条带的样本占总样本的比率P值和公式Ib＝1－2|0.5－P|来计算条带信息量Ib值，而一条引物的基因分型能力则可以用该引物扩增的所有位点的Ib值之和来评价，即Rp＝ΣIb，当0.5≤Rp/选择的位点数≤1时，该引物具备可区分所有样品的基因分型能力，其中，Rp/选择的位点数的比值越大，其区分能力越强；所述二元数据的统计方法为：有条带的记录为1，无条带记录为0，而“有”带或“无”带则采用Bandscan 5.0软件以总亮度值作为选择依据，其中，选取的亮度值大于或等于0.2时判断为有扩增带，小于0.2时判断为没有扩增带。
10.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛及其相似种的ISSR指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(7)中采用Bandscan 5.0软件对未知种属的石斛样品与已知种属药用石斛的ISSR-PCR指纹图谱进行检测，确定各条带的“亮度”与“位置”信息，再将二者比较。