一种具有抑菌性的铁苋多糖的提取方法与流程

本发明涉及一种具有抑菌作用的生物多糖的制备方法，主要应用在生物提取的技术领域。

背景技术：

铁苋菜为一年生草本，卵状菱形至椭圆形，先端渐尖，基部楔形，边缘有钝齿，两面有毛或近于无毛。铁苋菜为常食用的野菜，生于旷野、路边较湿润的地方。分布黄河流域中下游及长江以南各地。铁苋多糖提取方法简单，易于操作，纯度较高。经抑菌性实验证明，铁苋多糖有很强的抑菌性，作为生物性抑菌药物十分值得开发。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是提供一种具有抑菌作用的生物多糖的制备方法。

本发明是通过以下技术方案来实现的。

一种具有抑菌性的铁苋多糖的提取方法，步骤包括：

(1)取新鲜的铁苋菜叶子，洗净晾干，将干叶粉碎；

(2)按1∶15(干叶重g：提取液ml)加提取液，回流提取3次，合并提取液；

(3)加4倍体积预冷至4℃的丙酮，离心，沉淀用预冷至4℃的丙酮洗涤2次，冻干，得多糖白色粉末。

进一步地，(1)将干叶粉碎至80目。

进一步地，(2)提取液为含5％nacl的20％乙醇溶液。

进一步地，(2)回流温度为85℃。

进一步地，(3)离心转速为5000rpm。

计算得率(多糖g/原料量g)＝2.6％，纯度为88％

本发明的有益效果：

提取方法简单，易于操作，纯度较高。经抑菌性实验证明，铁苋多糖有很强的抑菌性，作为生物性抑菌药物十分值得开发。

附图说明

图1提取液量对铁苋多糖得率的影响示意图

图2nacl含量对铁苋多糖得率的影响示意图

具体实施方式

下面根据附图和实施例对本发明作进一步详细说明。

本发明，一种具有抑菌作用的生物多糖的制备方法，步骤包括：

(1)取新鲜的铁苋菜叶子，洗净晾干，将干叶粉碎至70-90目；

(2)按1∶10-20(干叶重g：提取液ml)加提取液(含4-6％nacl的20％乙醇溶液)，85℃回流提取3次，合并提取液；

(3)加4倍体积预冷至4℃的丙酮，4500-5500rpm离心，沉淀用预冷至4℃的丙酮洗涤2次，冻干，得多糖白色粉末。

作为本发明较佳的实施例：

取新鲜的铁苋菜叶子，洗净晾干，将干叶粉碎至70-90目，按1∶10-20(干叶重g：提取液ml)加提取液(含4-6％nacl的20％乙醇溶液)(参照图1因此，干叶重g：提取液ml在1∶15时得率最佳；参照图2因此，5％nacl的20％乙醇溶液时得率最佳)，85℃回流提取3次，合并提取液，加4倍体积预冷至4℃的丙酮，4500-5500rpm离心，沉淀用预冷至4℃的丙酮洗涤2次，冻干，得多糖白色粉末。经检测多糖纯度为88％。得率(多糖g/原料量g)＝2.6％。经组成分析，证明该多糖由甘露糖、半乳糖、木糖、葡萄糖组成。

多糖含量检测用硫酸-蒽酮试剂盒。

组成分析采用水解法：

样品用0.05m三氟乙酸80℃水解2h，上清液用蒸馏水透析，透析袋内外溶液浓缩，真空干燥。

hplc色谱柱为shodexsugar，柱温40度，流动相为水流速0.8ml/min，检测用410r示差检测器。

抑菌实验：

采用滤纸片药液浸泡法，记录抑菌圈直径。菌落液含大肠杆菌，化脓链球菌，金黄色葡萄球菌，霉菌等。各抗生素按照说明书稀释，铁苋多糖为1mg/ml。

不同抗生素与铁苋多糖抑菌效果比较

本发明提取方法简单，易于操作，纯度较高。经抑菌性实验证明，铁苋多糖有很强的抑菌性，作为生物性抑菌药物十分值得开发。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种具有抑菌性的铁苋多糖的提取方法，步骤包括：取新鲜的铁苋菜叶子，洗净晾干，将干叶粉碎至80目，按1∶15(干叶重g：提取液ml)加提取液(含5％NaCl的20％乙醇溶液)，85℃回流提取3次，合并提取液，加4倍体积预冷至4℃的丙酮，5000rpm离心，沉淀用预冷至4℃的丙酮洗涤2次，冻干，得多糖白色粉末。本发明的有益效果在于，提取方法简单，易于操作，纯度较高。经抑菌性实验证明，铁苋多糖有很强的抑菌性，作为生物性抑菌药物十分值得开发。

技术研发人员：孙锋
受保护的技术使用者：安徽农业大学
技术研发日：2016.11.12
技术公布日：2018.05.25