冬虫夏草提取液及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种冬虫夏草提取液及其制备方法和应用。更具体而言，本发明涉及 一种具有美白效果的冬虫夏草提取液及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 冬虫夏草（Cordyceps)是麦角菌科真菌冬虫夏草菌（Cordyceps sinensis (Berk) Sacc.)寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。冬虫夏草的生长环境 独特，分布区域有限，仅产于我国西藏、青海、四川西部及甘肃南部地区海拔3000米以上的 高原地带，生长周期2至3年，目前尚没有实现人工栽培。由于有限的野生资源与巨大的市 场需求，冬虫夏草成为我国目前价格最为昂贵的名贵滋补中药。
[0003] 冬虫夏草的药用功效始载于《本草从新》，其具有补肺益肾、止血化痰的功效，用于 治疗肺虚咳嗽、咯血盗汗等症，是我国防病治病的名贵中药之一。由于在《黄帝内经》内有 记载"肺主皮毛、司呼吸"，冬虫夏草或可通过改善肺的功能从而改善皮肤质素。然而从现代 科学的角度来看，我们并未找到任何能证明冬虫夏草有美白功效的证据。根据《中国药典》， 核苷中的腺苷是一个用来鉴定冬虫夏草质量的指标。但天然冬虫夏草的腺苷及其衍生物虫 草素的含量极低，反之北虫草（Cordyceps militaris(L.)Link.)则含有较多的腺苷及大量 的虫草素。虽然虫草素已被证实有美白作用，但是冬虫夏草的虫草素含量极微。
[0004] 酪氨酸酶活性抑制作用的测试是用来筛选美白药品的传统测试方法，其中 酪氨酸会因为酪氨酸酶的作用而转化成左旋多巴（L-DOPA)，进而转化成为多巴色素 (Dopachrome)。多巴色素在492nm波长下有吸光度，故可以量化及计算酪氨酸酶的活性。 多巴色素只是暂存物，它会转化成黑色素（Melanin)。人类皮肤上的黑色素是由黑色素细 胞（Melanocyte)所产生的多巴色素转化而成的。黑色素会渐渐地在黑色素细胞内的黑色 素体（Melanosome)内成熟，成熟后黑色素体便会沿着黑色素细胞的树突（Dentrite)转移 到角质细胞（Keratinocyte)，使肤色变深。抑制酪氨酸酶活性能有效减少多巴色素及黑色 素的产生，从而使肤色变得更淡更白。
[0005] 目前，大部分的美白产品如对苯二酸（Hydroquinone)及熊果苷（Arbutin)等均为 针对酪氨酸酶活性而达到美白功效。虽然对苯二酚的美白功效明显，却于2006年因为致癌 的风险而被禁用。随后，熊果苷亦因为化学结构与对苯二酚相似而被禁用。科学界正找寻 安全性较高的美白用品来替换对苯二酚等药品。
[0006] 目前，市场上还没有冬虫夏草或冬虫夏草提取物所制成的美容产品。其次，冬虫夏 草具有特殊的香菇味。因此，若以其提取液作为美白产品原料，则需要考虑从中去除这股特 殊的香菇味，否则会引起部分美白产品使用者的反感。但是，一般的冬虫夏草提取方法均未 能除掉这股特殊的香菇味。简而言之，冬虫夏草具有特殊香菇味是制备冬虫夏草提取液以 用作美白产品原材料的一个局限性。
[0007] 此外，由于冬虫夏草提取液含有大量多糖和核苷、营养丰富，被微生物污染的风险 较高，因此，为了长期储存，冬虫夏草提取液在被提取出来后进行消毒是期望的。但是，尚不 清楚在消毒的过程中是否会破坏冬虫夏草中的活性成分例如美白活性成分。
【发明内容】
[0008] 本发明旨在解决上述问题中的一个或多个。
[0009] 在第一方面中，本发明提供了一种制备包含肌苷的冬虫夏草提取液的方法，包括 以下步骤：
[0010] 1)提供冬虫夏草原料；
[0011] 2)以所述冬虫夏草原料的重量16-24倍的水浸泡所述冬虫夏草原料，在38-42°C 温浸8 - 12小时,得到浸泡液；和
[0012] 3)过滤所述浸泡液，得到冬虫夏草提取液。
[0013] 在一个实施方案中，本发明的方法还可包括步骤4):对所述冬虫夏草提取液进行 消毒。例如，所述消毒可以是于118-122°C的温度进行10 - 20分钟的高温消毒。
[0014] 在一个实施方案中，在本发明的方法步骤2)中，可以以冬虫夏草原料的重量20倍 的水浸泡所述冬虫夏草原料。
[0015] 在一个实施方案中，在本发明的方法步骤2)中，可以在40°C浸泡所述冬虫夏草原 料。
[0016] 在一个实施方案中，在本发明的方法步骤2)中，可以浸泡所述冬虫夏草原料10小 时。
[0017] 在一个实施方案中，在本发明的方法步骤3)中，可以以滤膜过滤所述浸泡液，以 除去残渣。
[0018] 在一个实施方案中，在本发明的方法步骤4)中，可以将所述冬虫夏草提取液于 120°C高温消毒15分钟。
[0019] 在一个实施方案中，可用于本发明的方法中的冬虫夏草原料是天然的冬虫夏草。
[0020] 在一个实施方案中，可用于本发明的方法中的冬虫夏草原料是完整的冬虫夏草、 断裂的或只有子实体或虫体部分的冬虫夏草、或者呈粉末状的冬虫夏草。
[0021] 在第二方面，本发明提供了一种根据本发明的第一方面获得的包含肌苷的冬虫夏 草提取液。
[0022] 在第三方面，本发明提供了一种美白产品，其包含美白有效量的本发明的包含肌 苷的冬虫夏草提取液或包含美白有效量的肌苷。在一个实施方案中，本发明的美白产品是 药品、保健品、食品、饮料、食品添加剂、营养强化剂或美容用品的形式。
[0023] 在第四方面，本发明提供了本发明的包含肌苷的冬虫夏草提取液或肌苷在制备美 白产品中的用途。在一个实施方案中，本发明的美白产品是药品、保健品、食品、饮料、食品 添加剂、营养强化剂或美容用品的形式。
[0024] 在第五方面，本发明提供了一种鉴定冬虫夏草质量的方法，包括以下步骤：
[0025] 1)提供冬虫夏草原料；
[0026] 2)以所述冬虫夏草原料的重量16-24倍的水浸泡所述冬虫夏草原料，在38_42°C 温浸8-12小时，得到浸泡液；
[0027] 3)任选地，过滤所述浸泡液，得到冬虫夏草提取液；和
[0028] 4)测定所述浸泡液或所述提取液中肌苷的含量。
[0029] 在一个实施方案中，冬虫夏草质量包括冬虫夏草的美白功效。
【附图说明】
[0030] 以下将结合附图，对本发明进行进一步的详细说明。本领域技术人员将理解，附图 以及下文详细描述旨在仅为示例性的，不应以任何方式解释为对本发明范围的限制。
[0031] 图1为实施例1中五种核酸（尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、虫草素）对照的液相指纹图 谱。
[0032] 图2为实施例1中提取自完整的冬虫夏草的液相指纹图谱。
[0033] 图3为实施例1中提取自冬虫夏草子实体的液相指纹图谱。
[0034] 图4为实施例1中提取自冬虫夏草虫体部分的液相指纹图谱。
[0035] 图5为实施例1中提取自冬虫夏草粉未的液相指纹图谱。
[0036] 图6为实施例2中多巴色素在492nm下的吸光度的标准曲线。
[0037] 图7为实施例2中提取自不同种类冬虫夏草的提取液对酪氨酸酶活性的抑制作用 的结果。
[0038] 图8为实施例2中不同种类核苷对酪氨酸酶活性的抑制作用的结果。
[0039] 图9为实施例2中不同肌苷浓度对酪氨酸酶活性的抑制作用的结果。
[0040] 图10为实施例3中高温消毒前后的冬虫夏草提取液对酪氨酸酶活性的抑制作用 的影响。
【具体实施方式】
[0041] 除非本文中另外定义，本文所使用的所有技术和科学术语具有本领域普通技术人 员通常所理解的含义。尽管与本文所描述的方法和材料相似或等价的那些方法和材料也可 用于本发明的实践中，但是优选的方法和材料还是在本文中加以描述。此外，如本文所使 用，数值范围包括定义该范围的数字。本发明的小标题仅仅为了阐述的目的，而不旨在限制 本发明的范围。
[0042] 如本文所使用，除非上下文明确指出，所有百分比都按重量计算。
[0043] 本申请的发明人首次发现，通过在一定条件下提取冬虫夏草，所得的冬虫夏草提 取液含有美白活性成分肌苷，从而可用于美白用途。另外，通过本发明方法提取冬虫夏草， 可以去除冬虫夏草的特殊香菇味。此外，可以对通过本发明的方法得到的冬虫夏草提取液 进行消毒，例如高温消毒，从而可长期储存。
[0044] 因此，本发明的第一方