一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于水产用中医药技术领域，具体设及一种防治淡水鱼真菌病的中草药发 酵提取液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 鱼类由于真菌感染而患的病，叫鱼类真菌病。真菌是具有细胞壁、真核的单细胞或 多细胞体。真菌性病原大都可腐生或寄生于各种鱼类的鱼卵、体表、罐部、觸部、肌肉，危害 鱼类的主要是藻菌纲的一些种类，如水霉、绵霉、觸霉、鱼醉菌、链壶菌、离壶菌、海壶菌等， 同时还有半知菌类的镶刀菌，W及丝囊霉菌等。相对于细菌和病毒病害而言，真菌病害一 直没有引起足够的重视。近年来，随着水产养殖业的发展、生态环境的改变和一些抗真菌 性药物的禁用，使得鱼类真菌性病害日益猎獄，形势严峻。所W，由于对真菌病尚无更理 想的治疗方法，严重阻碍了水产养殖业的可持续发展。
[0003] 在我国，中草药用于鱼病防治有着悠久的历史。中药具有抗菌、抗病毒及促进免疫 功能，提高机体抗病能力等作用，中药副作用少，毒性低，不产生抗药性，所W无残留、无污 染的中草药越来越受到重视，应用也日益广泛。各地养殖单位在实际应用中草药后，已表 现出对水产动物的安神、镇静、健胃促消化、理气、活血、养精补益、驱虫、杀虫、保健、解毒排 毒、抗肿瘤、治肝炎、收敛、抗创伤、抗菌、抑菌、杀灭病毒等多种药理作用。由此可见应用中 草药防治鱼病的有效性已在生产实践所证实，应用中草药防治鱼病也是我们发展绿色水产 业的需要，是人类自身健康的需要，因而有看美好的应用前景。益生菌可改善水产动物机体 内外的微生态平衡，提高其饲料转化量，抑制病原菌的种类和数量，控制水产养殖动物疾病 的发生。随着水产养殖业的不断发展W及人们对环境保护意识的日渐提高，有益菌开始被 引入水产养殖之中。发酵过的中草药一方面可W提高中草药药效，另一方面微生物也可W 起到促生长、促消化的作用，提高养殖效益。从而发展无公害水产饲料添加剂，生产绿色水 产品，增强我国水产品的国际市场竞争力。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，该中草药发 酵提取液属于天然药物，无毒副作用，主要用于治疗淡水鱼主要细菌性传染病，治疗成本 低、治愈率高、安全、无毒副作用、使用方便。
[0005] 为了达到上述目的，本发明采用W下技术方案： 本发明提供了一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽 抱杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2~4、±荆 芥2~3、苦穫皮5~8、苦参1~2、石恼皮1~2和大黄2~5。
[0006] 根据上述的防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱 杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2~3. 2、±荆 芥2. 8~3、苦穫皮5~7. 2、苦参1~1. 6、石恼皮1. 3~2和大黄2~4。
[0007] 根据上述的防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱 杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子3. 2~4、±荆 芥2~2. 8、苦穫皮7. 2~8、苦参1. 6~2、石恼皮1~1. 3和大黄4~5。
[0008] 根据上述的防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱 杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子3、±荆芥2、 苦穫皮5、苦参2、石恼皮1和大黄3。
[0009] 所述的防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下： (1) 将中药五倍子、±荆芥、苦穫皮、苦参、石恼皮和大黄烘干、粉碎为40~80目粉末备 用； (2) 按照上述配方取步骤（1)中药粉末加入8~10倍量中药粉末量的水煎煮提取，煎 煮1~2小时过滤得滤液；药渣加入8~10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1~2小时过滤 得滤液，合并滤液备用； (3) 按重量比取芽抱杆菌菌液加入步骤（2)所得滤液中，芽抱杆菌菌液与中药液的重量 比1: (40~60)，密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
[0010] 所述芽抱杆菌菌液的制备方法如下：取芽抱杆菌菌种进行斜面菌种培养，将 斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于 1. 0XlOlOCFU/mL时止，得对应的菌液。
[0011] 步骤（1)烘干溫度为60~80°C。
[0012] 步骤（3)中发酵溫度为30°C~37°C，发酵时间为24~48h。
[0013] 芽抱杆菌的培养基为营养琼脂培养基。
[0014] 本发明中各原料功效简述如下： 五倍子：又名倍子、百药煎、百虫仓等。为漆科植物盐肤本的叶上的干燥虫瘦，由五倍子 的晒虫寄生而成。杀菌能力强，用于防治白头白嘴病、白皮病、赤皮病、巧疮病等。
[0015] ±荆芥：为获科植物±荆芥的带有果穗的全草，俗称臭草，一年生草本，全草入药， 有桂风杀虫、燥湿解毒之功。对霉菌、致病性皮肤真菌、巧蛾、風圣、钩虫、线虫有抑制和杀灭 作用。
[0016] 苦穫皮：苦，寒；有毒。归肝、脾、胃经。具驱肠虫作用；用水或酒精浸泡本品后的 浸泡液对常见致病性皮肤真菌有较明显的抑制作用。
[0017] 苦参：为豆科落叶小灌木，广布房前屋后山坡湿地。根、叶入药，有燥湿、止痒、杀虫 之功，能抗原虫，对致病性皮肤真菌有抑制作用。主治巧癖、皮肤病和体内外寄生虫病。临 床上治黄錯皮肤打印病（红斑病）和經鱼竖鱗病，可用苦参煎水泼洒，也可和上荆芥等同用； 治疗甲鱼巧癖、毛霉病等可与百部煎汁共用。石恼皮：为石恼的干燥果皮，主要含较质、生物 碱等，具有收敛止泻、杀虫和抑菌作用。对水产动物的原生虫、蠕虫病及水霉病有较好效果。 可有效防治波豆虫病、车轮虫病、=代虫病、线虫病、缘虫病等。
[0018] 大黄：又名锦纹、黄良，别名将军、生军、马蹄黄等，多年生草本植物。W根、根茎入 药，抗菌作用强，抗菌谱广，可防治肠炎病、烂觸病、白头白嘴病等。
[0019] 芽抱杆菌：芽抱杆菌是一种好氧的革兰氏阳性菌，是对人畜无毒害的细菌，在自然 界分布广泛，国内均允许将其用于饲料添加剂。其具有减少病害发生、促进养殖动物生长、 改善养殖环境等特点。
[0020] 与现有技术相比，本发明取得的有益效果： 1.本发明中草药发酵提取液属于天然药物，无毒副作用，药物中各个营养成分相互协 同、互为补充，具有抗微生物、抗病毒、抗寄生虫、抗真菌和提高免疫力的作用，能有效促进 鱼类的生长发育。
[0021] 2.本发明通过芽抱杆菌的加入可W与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌竞 争，形成优势种群，抑制有害藻类及水产致病菌，有利于水产养殖，改善养殖环境，同时对水 溶性有机物分解也有重要的作用。
[0022] 3.本发明采用中药与益生菌的结合有显著的经济效益和社会效益。
[002引用法用量:泼洒法，预防用药，本品每瓶1000ml泼洒范围为lOOOml/lOm2,连用2~3 天。治疗量加倍，连用5~8天。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合实施例对本发明进一步的描述，但并不限制本发明的内容。
[0025] 实施例1 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2~4、±荆芥2~3、苦穫皮 5~8、苦参1~2、石恼皮1~2和大黄2~5。
[0026] 所述的防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液的制备方法，具体步骤如下： (1) 将中药五倍子、±荆芥、苦穫皮、苦参、石恼皮和大黄烘干、粉碎为40~80目粉末备 用； (2) 按照上述配方取步骤（1)中药粉末加入8~10倍量中药粉末量的水煎煮提取，煎 煮1~2小时过滤得滤液；药渣加入8~10倍药渣量的水煎煮提取，煎煮1~2小时过滤 得滤液，合并滤液备用； (3) 按重量比取芽抱杆菌菌液加入步骤（2)所得滤液中，芽抱杆菌菌液与中药液的重量 比1: (40~60)，密闭厌氧发酵，分装，即得防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液。
[0027] 所述芽抱杆菌菌液的制备方法如下：取芽抱杆菌菌种进行斜面菌种培养，将 斜面培养产生的悬浮液在对应的培养基内厌氧扩大培养，至对数生长期菌落数高于 1. 0Xl〇i°CFU/mL时止，得对应的菌液。
[002引实施例2 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子3、±荆芥2、苦穫皮5、苦 参2、石恼皮1和大黄3。
[0029] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[0030] 实施例3 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2、±荆芥3、苦穫皮7、苦 参2、石恼皮2和大黄5。
[0031] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[00础实施例4 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子4、±荆芥3、苦穫皮6、苦 参2、石恼皮1和大黄4。
[0033] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[0034] 实施例5 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子4、±荆芥3、苦穫皮8、苦 参2、石恼皮1和大黄2。
[0035] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[003引 实施例6 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2、±荆芥2. 5、苦穫皮 6. 5、苦参1. 6、石恼皮1. 8和大黄3. 2。
[0037] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[00測实施例7 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子3. 2、±荆芥2. 8、苦穫皮 7. 2、苦参1. 1、石恼皮1. 8和大黄2. 2。
[0039] 本实施例的制备方法与实施例1相同。
[0040] 实施例8 一种防治淡水鱼真菌病的中草药发酵提取液，是由中药的提取液加入芽抱杆菌菌液密 闭厌氧发酵而成，其中所述中药由W下重量份的组分组成：五倍子2. 4、±荆芥2. 4、