一种人神经生长因子类似物及其制备方法与流程

文档序号:12399346阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人神经生长因子类似物,其特征在于,所述的人神经生长因子类似物含人神经生长因子正常氨基酸序列及其N末端增加一个甘氨酸残基。

2.如权利要求1所述的人神经生长因子类似物,其特征在于,所述人神经生长因子正常氨基酸序列为天然人神经生长因子氨基酸序列,或者具有与天然人神经生长因子氨基酸序列95%以上同源性且具有神经生长因子生物学活性的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的人神经生长因子类似物,其特征在于,所述人神经生长因子类似物含如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。

4.如权利要求3所述的人神经生长因子类似物,其特征在于,用于编码所述SEQ ID NO.1的氨基酸序列对应的核苷酸序列如SEQ ID NO.2中第331~693位所示或其互补序列。

5.一种人神经生长因子类似物的制备方法,其特征在于,将改造的人神经生长因子原体cDNA插入原核表达载体,构建成重组表达载体,采用大肠杆菌表达系统表达制备;其中,所述改造的人神经生长因子原体cDNA编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.3中第8~231位所示序列,或者与其氨基酸序列同源性大于90%的序列。

6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述原核表达载体为融合蛋白表达载体,为pMAL载体、pGEX载体或pET载体。

7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述pMAL载体为pMAL-p5x、pMAL-p5E、pMAL-p5G,所述pET载体为pET39b或pET32a。

8.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述的融合蛋白表达载体经过了改造,其消除了载体自身的凝血酶酶切识别位点。

9.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述改造的人神经生长因子原体cDNA含如SEQ ID NO.2中第22~693位所示序列或其互补序列。

10.如权利要求5-9任一所述的制备方法,其特征在于,所述大肠杆菌表达系统表达制备的表达产物经纯化后,采用凝血酶酶切,再次纯化获得人神经生长因子类似物纯品。

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