1.一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)称取100g茯苓粉,分3次溶于总共为10倍体积的0.5mol/LNaoH中,每次4℃浸提多糖8h,合并3次浸提上清液,10%醋酸中和至pH6~7,4℃冰箱中沉淀过夜,在4℃环境中、5000g离心20min,收集沉淀,去离子水洗涤沉淀3次,用无水乙醇、丙酮和乙醚依次洗涤3次,于70℃干燥得白色茯苓多糖,研成粉末待用;
(2)将附有冷凝管和搅拌装置的容量瓶置冰浴中,加入吡啶100mL,磁力搅拌器搅拌,使之充分冷却,用分液漏斗按10:1体积比慢慢加入氯磺酸10mL;
(3)加人6g待硫酸化干燥的多糖样品,迅速将容量瓶移入沸水浴中,电动搅拌器100℃恒温搅拌反应1h;
(4)反应结束后,将反应液倒入圆底烧瓶中,旋转蒸发仪上减压蒸馏回收吡啶50mL;
(5)然后加人100mL水,用2.5mol/LNaoH中和至pH7~8,再加入3倍体积无水乙醇沉淀;
(6)沉淀重新溶于100mL水中;
(7)于透析袋中对自来水透析,再对蒸馏水透析;
(8)用0.5mol/LNaoH中和稍微变酸的透析液,保证最终硫酸化产物为钠盐;在45℃减压浓缩后冷冻干燥后即得。
2.如权利要求1所述一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法,其特征在于所述步骤(2)氯磺酸的加入速度<0.3mL/min。
3.如权利要求1所述一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法,其特征在于所述多糖样品中,氯磺酸/单糖残基的摩尔比为4:1。
4.如权利要求1所述一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法,其特征在于所述步骤(7)的自来水透析的温度为20℃,时间为2d。
5.如权利要求1所述一种茯苓多糖硫酸酯的制备方法,其特征在于所述步骤(7)的蒸馏水透析的温度为20℃,时间为1d。