一种三维四角藻培养基的制作方法

本发明涉及一种藻类培养基，尤其涉及一种三维四角藻培养基。

背景技术：

三维四角藻Tetraedron triangulare隶属于绿藻门、绿球藻目、绿球藻科、四角藻属。植物体为单细胞，浮游；细胞扁平或角锥形，具3个、4个或5个角，角分叉或不分叉，角延长成突起或无，角或突起顶端的细胞壁常突出为刺；色素体周生，盘状或多角片状，1个到多个，各具1个蛋白核或无。常见于各种静水水体中，以水坑、池塘、沼泽及湖泊的浅水港湾中较多。四角藻中含有不可水解、不可溶高度脂肪性的生物大分子—藻质素。藻质素热解可以产生丰富的高碳数正构烷烃，是高蜡油的主要母质。以藻质素作为生物质能源原料，具有可再生性及对环境污染低的优点。

用传统的蓝绿藻培养基—BG11培养基培养该藻存在生长速率慢、藻细胞密度低，培养时间短的问题，不利于工业化扩大培养。

技术实现要素：

本发明目的在于提供一种生长速率快、藻细胞密度高，且可持续生长时间长的三维四角藻培养基。

为了实现上述目的，本发明提供的一种三维四角藻培养基，其组分及其浓度为：NaNO₃ 80～90g/L，CaCl₂·2H₂O 30～40g/L，MgSO₄ 15～20g/L，NaHCO₃ 10～15g/L，K₂HPO₄ 5～10g/L，NaNO₃ 80～90g/L，CaCl₂·2H₂O 30～40g/L，MgSO₄·7H₂O 35～40g/L，NaHCO₃ 10～15g/L，K₂HPO₄ 5～10g/L，H₃BO₃ 22～28g/L，Na₂EDTA·2H₂O 3～5g/L，FeCl₃·6H₂O 3～5g/L，CuSO₄·5H₂O 2～4g/L，ZnSO₄·7H₂O 20～25g/L，CoCl₂·6H₂O 8～10g/L，MnCl₂·4H₂O 175～185g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 5～7g/L，Na₃VO₄ 15～18g/L，Vitamin B₁₂ 0.1～0.15g/L，Biotin 0.02～0.03g/L。

作为优选的技术方案，所述三维四角藻培养基的组分及其浓度为：NaNO₃ 85g/L，CaCl₂·2H₂O 36.5g/L，MgSO₄ 18g/L，NaHCO₃ 12.5g/L，K₂HPO₄ 8.5g/L，NaNO₃ 85g/L，CaCl₂·2H₂O 36.5g/L，MgSO₄·7H₂O 37g/L，NaHCO₃ 12.5g/L，K₂HPO₄ 8.5g/L，H₃BO₃ 24g/L，Na₂EDTA·2H₂O 4.5g/L，FeCl₃·6H₂O 3.5g/L，CuSO₄·5H₂O 2.5g/L，ZnSO₄·7H₂O 22g/L，CoCl₂·6H₂O 10g/L，MnCl₂·4H₂O 180g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 6.5g/L，Na₃VO₄ 16g/L，Vitamin B₁₂ 0.135g/L，Biotin 0.025g/L。

与现有技术相比本发明的有益效果：本发明三维四角藻培养基是在藻类培养基中添加了细胞分裂素Na₃VO₄及生物素Vitamin B₁₂和Biotin，使得配方配比更为合理，有利于细胞的快速增殖。实验结果证明该培养基培养出的藻细胞生长速率快，藻细胞密度大，适用于大规模产业化培养。

具体实施方式：

下面结合具体实施例和对比例对本发明提供的三维四角藻培养基进行详细的说明。

实施例1：

(1)用去离子水配置如下配方的三维四角藻培养基：NaNO₃ 85g/L，CaCl₂·2H₂O 36.5g/L，MgSO₄18g/L，NaHCO₃12.5g/L，K₂HPO₄ 8.5g/L，NaNO₃85g/L，CaCl₂·2H₂O36.5g/L，MgSO₄·7H₂O37g/L，NaHCO₃12.5g/L，K₂HPO₄8.5g/L，H₃BO₃ 24g/L，Na₂EDTA·2H₂O 4.5g/L，FeCl₃·6H₂O3.5g/L，CuSO₄·5H₂O 2.5g/L，ZnSO₄·7H₂O 22g/L，CoCl₂·6H₂O 10g/L，MnCl₂·4H₂O 180g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 6.5g/L，Na₃VO₄ 16g/L，Vitamin B₁₂0.135g/L，Biotin0.025g/L。

(2)将生长于对数期的三维四角藻接种到该培养基中进行培养，光照培养箱温度为20℃，光照12小时/天，光照强度为70μmol/m²·s，每隔一天记录培养基中三维四角藻的细胞浓度，详见表1。

对比例1：

(1)用去离子水配置如下配方的培养基：NaNO₃85g/L,CaCl₂·2H₂O36.5g/L，MgSO₄18g/L，NaHCO₃ 12.5g/L，K₂HPO₄ 8.5g/L，NaNO₃ 85g/L，CaCl₂·2H₂O 36.5g/L，MgSO₄·7H₂O 37g/L，NaHCO₃ 12.5g/L，K₂HPO₄ 8.5g/L，H₃BO₃ 24g/L，Na₂EDTA·2H₂O 4.5g/L，FeCl₃·6H₂O 3.5g/L，CuSO₄·5H₂O 2.5g/L，ZnSO₄·7H₂O 22g/L，CoCl₂·6H₂O 10g/L，MnCl₂·4H₂O 180g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 6.5g/L。

(2)将生长于对数期的三维四角藻接种到该培养基中进行培养，光照培养箱温度为20℃，光照12小时/天，光照强度为70μmol/m²·s，每隔一天记录培养基中三维四角藻的细胞浓度，详见表1。

对比例2：

(1)使用绿藻常用的BG11培养基作为实施例3培养基。

(2)将生长于对数期的三维四角藻接种到该培养基中进行培养，光照培养箱温度为20℃，光照12小时/天，光照强度为70μmol/m²·s，每隔一天记录培养基中三维四角藻的细胞浓度，详见表1。

将实施例1与对比例1、对比例2的三维四角藻细胞浓度进行对比，结果如表1所示：

表1：不同培养基培养的三维四角藻的细胞浓度对比表

从表1可以看出，生长于本发明所提供的培养基中的三维四角细胞生长速率快，藻细胞可持续生长时间长，藻细胞的密度明显高于对比例1和对比例2的培养基。由此说明本发明提供的三维四角藻培养基优势明显，适于可持续的工业化扩大培养。