一种基于两端锁定DNA酶的分子信标识别miRNA新方法与流程

技术特征：

1.一种基于两端锁定DNA酶的分子信标识别miRNA新方法，其特征在于包括以下四个步骤：

(1)将500pM探针DNA与1000pM阻断DNA在HEPES缓冲中孵育一个小时。

(2)在(1)所述的混合溶液中加入目标miRNA-21继续孵育3个小时；

(3)在(2)所述的混合溶液中加入2.5nM氯化血红素继续孵育半个小时；

(4)取(3)所述的溶液100uL，加入50uL 2μM的鲁米诺溶液和50uL20mM H₂O₂溶液，用化学发光仪检测化学发光信号，分析其测定结果。

2.按权利要求1所述的方法，其特征在于所选探针DNA序列为5’-TCA ACA TCA GTC TGA TAA GCT AAG GGT AGG GCG GGT TGG G-3’；阻断DNA序列为5’-CCC AAC CCT AGC TTA TCA GAC T-3’；miRNA-21序列为5’-UAG CUU AUC AGA CUG AUG UUG A-3’。

3.按权利要求1所述的方法，其特征在于HEPES(羟乙基哌嗪乙硫磺酸)缓冲包含25mM N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)钠盐，200mM NaCl，25mM KCl，150mM NH₄Cl，1％二甲亚砜(V/V₀)，0.05％Triton X-100(V/V₀)，pH 7.4。

4.按权利要求1所述的方法，其特征在于化学发光溶液的pH为7.4。