一种制备心脏祖细胞的方法与流程

文档序号:11899074阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种制备心脏祖细胞的方法,包括步骤:将重编程因子转导至起始重编程对象细胞内,所述重编程因子选自心脏转录因子、表观遗传调控因子,优选地,选自Gata4、Tbx5、Nkx2.5、AF9、Hand2、Mef2C、Mesp1、Baf60c、UTX中任一种或多种的组合。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将重编程因子转导至起始重编程对象细胞核内。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述起始重编程对象为成体干细胞。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述起始重编程对象为骨髓间充质干细胞或脐带间充质干细胞。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重编程因子为下之任一:(1)重编程因子GMT由Gata4、Mef2C、Tbx5组成;(2)重编程因子GMTB由Gata4、Mef2C、Tbx5、Baf60c组成;(3)重编程因子GHMT由Gata4、Hand2、Mef2C、Tbx5组成;(4)重编程因子GNT由Gata4、Nkx2.5、Tbx5组成;(5)重编程因子GNTB由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、Baf60c组成;(6)重编程因子GNMT由Gata4、Nkx2.5、Mef2C、Tbx5组成;(7)重编程因子GM1T由Gata4、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(8)重编程因子GNM1T由Gata4、Baf60c、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(9)重编程因子GMM1T由Gata4、Mef2C、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(10)重编程因子GTB由Gata4、Tbx5、Baf60c组成;(11)重编程因子GM1TB由Gata4、Mef2C、Mesp1、Tbx5、Baf60c组成;(12)重编程因子GNTA由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、AF9组成;(13)重编程因子GNTU由Gata4、Tbx5、Nkx2.5、UTX组成;(14)重编程因子GNTAU由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、AF9、UTX组成。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:将重编程因子与起始重编程对象细胞混合,进而将重编程因子转导至起始重编程对象细胞内。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将重编程因子与起始重编程对象细胞混合后,Gata4的终浓度是0.2~0.4μg/ml,Tbx5的终浓度是0.2~0.4μg/ml,Nkx2.5的终浓度是0.1~0.2μg/ml,Hand2的终浓度是0.1~0.2μg/ml,Mef2C的终浓度是0.2~0.4μg/ml,Mesp1的终浓度是0.3~0.6μg/m,Baf60c的终浓度是0.4~0.8μg/ml,UTX的终浓度是0.5~1.0μg/ml,AF9的终浓度是0.5~1.0μg/ml。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括步骤:将重编程因子先与转导载体复合后形成重编程因子-转导载体复合物,然后将所述重编程因子-转导载体复合物与起始重编程对象细胞混合,进而通过转导载体将重编程因子转导至起始重编程对象细胞内。

9.一种用于制备心脏祖细胞的重编程因子,所述重编程因子选自Gata4、Tbx5、Nkx2.5、AF9、Hand2、Mef2C、Mesp1、Baf60c、UTX中任一种或多种的组合。

10.根据权利要求9所述的重编程因子,其特征在于,所述重编程因子为下之任一:(1)重编程因子GMT由Gata4、Mef2C、Tbx5组成;(2)重编程因子GMTB由Gata4、Mef2C、Tbx5、Baf60c组成;(3)重编程因子GHMT由Gata4、Hand2、Mef2C、Tbx5组成;(4)重编程因子GNT由Gata4、Nkx2.5、Tbx5组成;(5)重编程因子GNTB由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、Baf60c组成;(6)重编程因子GNMT由Gata4、Nkx2.5、Mef2C、Tbx5组成;(7)重编程因子GM1T由Gata4、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(8)重编程因子GNM1T由Gata4、Baf60c、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(9)重编程因子GMM1T由Gata4、Mef2C、Mef2C、Mesp1、Tbx5组成;(10)重编程因子GTB由Gata4、Tbx5、Baf60c组成;(11)重编程因子GM1TB由Gata4、Mef2C、Mesp1、Tbx5、Baf60c组成;(12)重编程因子GNTA由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、AF9组成;(13)重编程因子GNTU由Gata4、Tbx5、Nkx2.5、UTX组成;(14)重编程因子GNTAU由Gata4、Nkx2.5、Tbx5、AF9、UTX组成。

11.一种用于制备心脏祖细胞的药物组合物,包括如权利要求9或10所述的重编程因子以及转导载体,所述转导载体将重编程因子转导至起始重编程对象细胞内。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1