一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法与流程

技术特征：

1.一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于：方法如下：

1)提取水产养殖动物组织或水产食品组织的总DNA；

2)以所提取的DNA为模板，采用创伤弧菌特异性引物，进行PCR扩增；所述的创伤弧菌特异性引物是针对创伤弧菌的recA基因的特异性引物P1、toxR基因的特异性引物P2、rpoD基因的特异性引物P3或topA基因的特异性引物P4；

3)根据PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果判断水产养殖动物或水产食品是否被创伤弧菌感染。

2.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于：所述的创伤弧菌是Vibrio vulnificus。

3.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于，

所述的特异性引物P1的上下游引物的序列是：

P1-F：TGGGCCGTATCGTTGAAATTTT；

P1-R：GAGTCGCCCATCTCACCTTC；

所述的特异性引物P2的上下游引物的序列是：

P2-F：CCCGCTCCTGTCAGATTCAA；

P2-R：GCAGTGCGGCTAACAAGAAT；

所述的特异性引物P3的上下游引物的序列是：

P3-F：CACTCAGCTTCGTAACAGCT；

P3-R：CCATTCTTCGCTTGACTCGTTG；

所述的特异性引物P4的上下游引物的序列是：

P4-F：CGCTGTGAAGCTTTTGGTGG；

P4-R：GATGTACCCACGAACCGCTT。

4.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于，PCR扩增的反应体系和反应条件如下：

PCR反应条件：第一阶段：94℃5min；

第二阶段：94℃30s，60℃或64℃或66℃30s，72℃30s；30循环；

第三阶段：72℃5min；

第四阶段：4℃保存。

5.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于，步骤3)中，判断标准为，

针对特异性引物P1，如果PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果有313bp条带产生，则水产养殖动物或水产食品被创伤弧菌感染，否则没有被感染；

针对特异性引物P2，如果PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果有215bp条带产生，则水产养殖动物或水产食品被创伤弧菌感染，否则没有被感染；

针对特异性引物P3，如果PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果有283bp条带产生，则水产养殖动物或水产食品被创伤弧菌感染，否则没有被感染；

针对特异性引物P4，如果PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果有421bp条带产生，则水产养殖动物或水产食品被创伤弧菌感染，否则没有被感染。

6.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于，所述的水产养殖动物为大菱鲆、海参、泥鳅鱼、螃蟹、爬虾、青虾或三文鱼。

7.根据权利要求1所述的一种水产养殖动物或水产食品中创伤弧菌的PCR检测方法，其特征在于，所述的水产食品为动物性水产品干制品、腌醉制生食动物性水产品、鱼糜制品。