用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒的制作方法

技术特征：

1.一种用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒，包括针对病毒性脑炎的特异性引物对； 所述针对病毒性脑炎的特异性引物对包括如下引物对中的一种或几种：

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2.根据权利要求1所述用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒，其特征在于：所述检测病毒性脑炎的多重PCR试剂盒还包括Taq 聚合酶、dNTP、MgCl₂、PCR缓冲液、去离子水。

3.根据权利要求1所述用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒，其特征在于：进行PCR反应的条件是，95℃预加热4min，95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，共进行35个循环，最后72℃延伸7min。

4.根据权利要求1所述用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒，其特征在于：进行PCR反应时，针对病毒性脑炎的每条特异性引物的终浓度为0.5μM/μl ～0.8μM/μl。

5.根据权利要求4所述用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒，其特征在于：进行多重PCR反应时，针对HSVⅠ、CMV、EV71、VZV和EBV病毒的每条特异性引物的终浓度均为0.5μM/μl；针对HSVⅡ病毒的每条特异性引物的终浓度为0.8μM/μl。

6.一种病毒性脑炎多重PCR扩增的方法，包括以下步骤，以导致病毒性脑炎的病毒基因为靶标序列，在针对病毒的特异性引物对存在下，进行一次多重PCR扩增；即完成病毒性脑炎的多重PCR检测；所述针对病毒特异性引物对包括如下引物对中的一种或几种：

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7.根据权利要求6所述病毒性脑炎的多重PCR扩增的方法，其特征在于：多重PCR扩增采用25μL反应体系；多重PCR扩增的条件是，95℃预加热4min，95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，共进行35个循环，最后72℃延伸7min。

8.根据权利要求6所述病毒性脑炎的多重PCR扩增的方法，其特征在于：针对病毒性脑炎的每条特异性引物的终浓度为0.5μM/μl ～0.8μM/μl。

9.针对病毒性脑炎检测的引物，如下列核苷酸序列所示：

编号引物序列（5’-3’）SEQ ID NO.1ACCCTCAAGTTCTTCCTCACSEQ ID NO.2CCAGTCCAGGCAAATCTTCTSEQ ID NO.3ATGGCACGACCCACGGAAGASEQ ID NO.4CGGAGCGGACGTAGGCGAATSEQ ID NO.5TGAGCGTTGGACACGTGATASEQ ID NO.6CGGAGCGGACGTAGGCGAATSEQ ID NO.7CCTGAATGATGCTCGGGTAGSEQ ID NO.8GACCTCAGCGTGGAGATTGTSEQ ID NO.9GCGCAAATGCGTAGAAAGGTSEQ ID NO.10GAGGTATCCATGCCCTGACGSEQ ID NO.11CCTTCCCTAAGACCACCAATSEQ ID NO.12TAAGACATAGCAGCACAGCA

10.权利要求9所述针对病毒性脑炎检测的引物在制备检测病毒性脑炎的多重PCR试剂盒中的应用。