本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种促进微生物生长的营养物质的制备方法。
背景技术：
微生物是一种肉眼不能观测到的微小生物，包括：细菌、真菌、原生生物、显微藻类和病毒。微生物个体微小、种类繁多、与人类关系密切。微生物包括有害微生物和有益微生物，广泛涉及食品、医药、工农业、环保等诸多领域。
微生物培养过程中，为了提供给微生物足够的营养，促进微生物生长，经常使用动物血液或血清，如哥伦比亚血平板、巧克力平板等。但是，存在的问题为：添加血液或血清时，为了防止血液或血清中的活性物质丧失活性，添加血液或血清时的基础培养基温度不宜过高，也无法进行高温高压灭菌，同时，又因为添加了血液或血清的培养基有效时间短，因此，现有添加血液或血清的培养基在使用过程中会影响被培养微生物的利用和病源微生物的诊断。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种促进微生物生长的营养物质的制备方法，从而解决现有技术中存在的前述问题。
为了实现上述目的，本发明所述促进微生物生长的营养物质的制备方法，所述方法包括：
s1，将恒温动物血液与蒸馏水按照1：(10～20)的体积比例混合，得到混合液；
s2，使用搅拌机充分搅拌所述混合液，得到原料液；
s3，将所述原料液置于反应釜中，在190℃～200℃、大于等于2个大气压强的条件下，对所述反应釜中的所述原料液进行水解，将水解液过滤后，得到滤液，所述滤液即为促进微生物生长的营养物质，完成促进微生物生长的营养物质的制备。
优选地，所述恒温动物血液为恒温哺乳动物血液或恒温鸟类血液。
优选地，所述滤液添加到固体培养基或液体培养基中。
优选地，所述滤液与所述固体培养基或与所述液体培养基的体积比例关系为(1～10)：100。
优选地，步骤s3中，对反应釜中的所述原料液进行水解的水解时间为1h～2h。
本发明的有益效果是：
(1)本发明得到的营养物质促进工业用微生物的生长，提高生产效率，降低成本。
(2)本发明得到的营养物质促进致病性微生物生长，提高临床检测速度的效率。
(3)本发明得到的营养物质替代血清和血液添加到培养基中，同时可以进行高温高压灭菌，减少了培养基污染，延长培养基保存时间。
附图说明
图1是促进微生物生长的营养物质的制备方法的流程示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例
本实施例所述促进微生物生长的营养物质的制备方法，所述方法包括：
s1，将恒温动物血液与蒸馏水按照1：(10～20)的体积比例混合，得到混合液；
s2，使用搅拌机充分搅拌所述混合液，得到原料液；
s3，将所述原料液置于反应釜中，将反应釜置于190℃～200℃、大于等于2个大气压强的条件下，对反应釜中的所述原料液进行水解，将水解液过滤后，得到滤液，所述滤液即为促进微生物生长的营养物质，完成促进微生物生长的营养物质的制备。
更详细的解释说明为：所述恒温动物血液为恒温哺乳动物血液或恒温鸟类血液，恒温动物血液成分相近，经过处理后的产物相似。所述滤液添加到固体培养基或液体培养基中。所述滤液与所述固体培养基或与所述液体培养基的体积比例关系为(1～10)：100。步骤s3中，对反应釜中的所述原料液进行水解的水解时间为1h～2h。所述促进微生物生长的营养物质可促进细菌、真菌生长；还可促进各种苛养菌生长，提高临床分离培养能力。在微生物培养基中添加所述促进微生物生长的营养物质后，微生物培养基具有缩短微生物培养时间、提高微生物培养效率、容易获得原料、制造工艺简便等特点。
实施例1促进微生物生长的营养物质的制备
a1、动物血液前处理：在农贸市场采购猪血1000ml，取100ml加入9000ml蒸馏水，得到猪血混合液，使用skg1246破壁料理机对猪血混合液进行搅拌打碎凝血块，得到猪血原料液，转速为1200转/min，时间为3分钟；
a2、高温高压水解：取经过搅拌处理后的猪血原料液1000ml，放入高温高压反映釜，在温度195℃、大气压2.1个大气压、搅拌转速为100转/分钟的条件下，边搅拌边进行高温高压水解反应，反应时间为1h，得到水解液；所述反应釜为威海化工机械有限公司gsh高温高压反映釜；
a3、使用10层无菌纱布对水解液进行过滤，获得过滤液即为促进微生物生长的营养物质，一个大气压、20度下进行动力粘度和运动粘度测试，得到为：行动力粘度μ＝1.19×10-3pa·s，运动粘度v＝1.20×10-6㎡/s；采用杭州卓祥科技有限公司vsm自动粘度计进行动力粘度和运动粘度测试；
a4、将过滤液高温高压灭菌后室温保存备用；高温高压灭菌的条件为121℃、大气压1.2个大气压、灭菌时间15min。
实施例2：添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂培养基和未添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂培养基对比测试
1、配制未添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂平板
秤取蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、琼脂15.0g，溶于蒸馏水1l，调整ph值7.3(25℃)，121度1.2个大气压下灭菌15分钟，浇注制备营养琼脂，作为对照组。
2、配制添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂平板
秤取蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、琼脂15.0g，添加实施例1制备的促进微生物生长的营养物质100ml，溶于蒸馏水900ml，高压灭菌后，浇注制备平板培养基作为试验组。
3、在两种平板平行接种以下细菌，金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、克雷博菌，每种细菌接种三个平板，经过培养观察，发现试验组形成菌落时间均比对照组快，培养24小时后的菌落均比对照组大，详见表1。
表1添加和未添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂平板的微生物培养测试结果
由表1得到，促进微生物生长的营养物质能促进细菌的生长。
实施例3：添加促进微生物生长的营养物质的高盐察氏琼脂培养基和未添加促进微生物生长的营养物质的高盐察氏琼脂培养基对比测试
1、配制未添加促进微生物生长的营养物质的高盐察氏琼脂平板
称量购自青岛海博生物科技有限公司的高盐察氏琼脂109g，溶于1l蒸馏水，高压灭菌后倒入平板冷却，作为对照组。
2、配制添加促进微生物生长的营养物质的高盐察氏琼脂平板
称量购自青岛海博生物科技有限公司的高盐察氏琼脂109g，加入100ml促进微生物生长的营养物质和900ml蒸馏水，混匀，高压灭菌后分注，作试验组。
3、在两种平板平行接种以下真菌，黑曲霉、烟曲霉、白色念珠菌、热带念珠菌，每种真菌接种三个平板，经过培养观察，发现试验组形成菌落时间均比对照组快，培养24小时后的菌落均比对照组大，详见表2。
表2添加和未添加促进微生物生长的营养物质的高盐察氏琼脂平板的微生物培养测试结果
由表2得到，促进微生物生长的营养物质能促进真菌的生长。
实施例4：添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂培养基和哥伦比亚血平板培养基培养苛养菌效果对比测试
1、购买青岛海博生物科技有限公司的哥伦比亚血平板，作为对照组1。
2、使用实施例1中的添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂平板作对照组2。
3、使用实施例1中的添加促进微生物生长的营养物质的营养琼脂平板作试验组。
4、在三种平板平行接种肺炎链球菌、流感嗜血杆菌，每种接种三个平板，在co2培养箱进行培养，发现试验组和对照组1均能培养苛养菌，对照组2未见细菌生长，详见表3。
表3实施例3的微生物测试结果
实施例5：保质期测试
1、将实施例1和2中所制备的未经测试的添加促进微生物生长的营养物质的空白平板于4℃冰箱中储存一周、1个月和3个月后取出培养基平板，作为试验组。
2、使用存储一周、1个月和3个月后的依次重复实施例1和2、3的试验。
3、测试结果显示，出现菌落时间和菌落大小与刚配制时无差异，说明本发明培养基耐储存，保存性能良好。
由于猪血容易入手，本次实施例1-5中使用了猪血，但是考虑到恒温动物血液成分相近，成分差异不大，同时考虑恒温动物血液成分经过高温高压水解之后大分子水解为小片段后的成分更加相近，经过水解后含有更多氨基酸、单糖以及低级脂肪酸，可推知各种动物血液经过处理后的成分相差不大，而氨基酸和单糖以及低级脂肪酸更容易被细菌摄取和利用，细菌代谢机构可以省却蛋白和多糖代谢所需的能量，集中到生长分裂，促进细菌生长。
通过采用本发明公开的上述技术方案，得到了如下有益的效果：
(1)本发明得到的营养物质促进工业用微生物的生长，提高生产效率，降低成本。
(2)本发明得到的营养物质促进致病性微生物生长，提高临床检测速度的效率。
(3)本发明得到的营养物质替代血清和血液添加到培养基中，同时可以进行高温高压灭菌，减少了培养基污染，延长培养基保存时间。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视本发明的保护范围。