本发明属于菌类共生培养领域，具体来说是一种菌类共生菌丝粉的培养及制备方法。
背景技术
众多菌类植物中，有很多都存在极高的药用价值，而其余的多数品种都可作为食材进行使用，具有药用价值的菌类不仅具有益气、强身、祛病、通经、益寿等功能，同时还具增强人体免疫力、抗肿瘤抗癌等功效，作为食材的菌类营养价值也非常高，含有较多的蛋白质，碳水化合物，维生素和微量元素，多吃可以增强人体免疫力，因此，一些菌类常作为保健品来使用。
传统的菌类多为在野外生长，人工寻找并摘取，野生的菌类虽然营养成分和药用价值都很高，但由于其数量少、生长缓慢的原因导致价位也偏高，为了满足市场需求，现已有人工培养冬虫夏草、松茸等菌类产品的培养方法研制成功，但均无法实现规模化生产，仍无法满足市场的需求。
现在市场上所售的菌丝粉大多数是单一的一种菌类，或者是与中草药配合使用，菌种单一的原因必然会导致效果不佳的问题，而与中药配伍的话就要对症服用，不能作用普通的保健品来使用。
技术实现要素：
本发明提供了一种菌类共生菌丝粉的培养及制备方法，它可以使多种菌类在相同的培养条件下共同培养生成菌丝，并制成相应的菌丝粉，满足市场对菌类产品的需求。
本发明实现上述目的采用以下技术方案：
一种菌类共生菌丝粉的培养及制备方法，它包括以下步骤：母种分离、菌丝活化培养、菌丝初级培养、菌丝纯化培养、菌丝液体共生培养、菌丝共生扩大培养、烘干、粉碎。
所述的菌丝初级培养和纯化培养所用的琼脂培养基为在每升水中加入以下质量的原料：小麦100g、马铃薯100g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁005g、蛋白胨2g、牛肉膏0.5g、维生素b110mg。
所述的菌丝初级培养、菌丝纯化培养时间分别为6-10天，培养温度为18-25℃，培养湿度为60-70％rh。
所述的菌丝共生液体培养基的原料和制取方法为：取松针、马铃薯、红薯、豆芽、麦麸、无花果各100-200g，然后加入2000ml水煮取汁液，然后在每2000ml上述汁液中加入葡萄糖20g、维生素b120mg、维生素b1220mg、磷酸二氢钾2g、硫酸镁2g、蛋白胨2g、牛肉膏1g、酵母膏1g。
所述的菌丝液体共生培养的时间为4-7天，培养温度为22-25℃。
所述的菌丝共生扩大培养的培养基质所需原料的质量份配比如下：粮食85份、枸杞12份、食用石膏1份、石灰2份、水98份。
所述的粮食所含的原料的质量份配比如下：小麦55份、黑豆10份、黄豆10份、红豆10份。
所述的菌丝共生扩大培养的培养基质的制备方法为：
1)称取相应的水并加入石灰，搅拌均匀后备用；
2)称取相应量的粮食加入上述的石灰水中浸泡8小时后捞出，并用清水将其冲洗干净；
3)将步骤2)中洗干净的粮食加1.5倍重量的水煮15-25分钟后捞出晒干备用；
4)称取相应的枸杞并用清水冲洗干净备用；
5)称取相应量的石膏与步骤3)中的粮食和步骤4)中的枸杞共同混合，水分45％-60％，分装850ml培养瓶中高压、121度下灭菌1.5-3小时即可。
本发明采用上述技术方案具有以下有益效果：
制作工艺简单，容易操作，可以将野生的冬虫夏草、松茸等菌丝工厂化生产，制成速溶即食的菌丝粉，提高各种稀有菌类菌丝粉的质量和产量。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，本实施例以冬虫夏草、松茸、绣球菌、羊肚菌四种菌类为培养对象，在本发明所述的培养基和培养条件下进行培养并制得菌丝粉。
具体操作步骤如下：
1、母种分离
首先先将各工具在无菌接种室中用紫外线灯灭菌30分钟。
然后取冬虫夏草、松茸、绣球菌、羊肚菌标准野生种菇于无菌接种室内，用75％的酒精擦拭各种菇的表面对其进行消毒，并用无菌纱布吸干，置于平面培养器内备用。
用灭过菌的接种刀将冬虫夏草、松茸、绣球菌和羊肚菌种菇切开，在各种菇的中央部位切取一薄片作为接种块。
用接种针挑取接种块放入装有琼脂培养基的试管内，写好标签，置于22-28℃的培养室内培养7-10天，菌丝开始蔓延生长，取出备用。
2、菌丝活化培养将步骤1中所得的菌丝于无菌接种室内挑取健壮的菌丝体，大小为0.1×0.1cm，分别置于新的琼脂培养基质试管中，贴上标签在22-28℃下培养10-15天，育成较大的菌丝后取出备用。
3、菌丝初级培养首先，按照以下比例制取初级培养和纯化培养的培养基。
每1000ml水中加入以下质量的原料：小麦100g、马铃薯100g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁005g、蛋白胨2g、牛肉膏0.5g、维生素b110mg。
将装有琼脂培养基的试管及接种工具在无菌接种室内经紫外线杀菌30分钟，然后将步骤2中的菌丝取0.2×0.2cm大小菌丝分别置于装有琼脂培养基的试管内，培养7-10天，获得一级菌丝备用。
4、菌丝纯化培养在无菌接种室内将步骤3中所得的一级菌丝取0.2×0.2cm大小菌丝，分别置于新的装有琼脂培养基的试管中进行纯化培养，培养时间为7天，得到纯化的菌丝。
5、菌丝液体共生培养按照下列配比制取培养液：松针、马铃薯、红薯、豆芽、麦麸、无花果枝干所煮取的汁液，葡萄糖2g、维生素b110mg、维生素b1210mg、磷酸二氢钾0.2g、硫酸镁0.2g、蛋白胨0.2g、牛肉膏0.1g、酵母膏0.1g。
将液体培养液分装到500ml三角瓶中，每只三角瓶内装取150ml液体培养液，并在每只三角瓶内放置3-5粒直径为1cm的玻璃珠，然后在121℃下灭菌45分钟后取出备用。
将装有液体培养液的三角瓶及接种工具在无菌接种室内经紫外线灭菌，取步骤4中的纯化菌丝置入三角瓶内，纯化菌丝的大小为1×1cm，在18-22℃下静置培养24小时，然后上摇床在22-26℃下培养3-6天，得到初级共生菌丝液。
按照质量份3-5％的比例将初级共生菌丝液装入盛有新的液体培养液的发酵罐内培养，培养时间为4-7天，培养温度为22-28度，获得终极共生菌丝液。
6、菌丝共生扩大培养
菌丝共生扩大培养的培养基质所需原料的质量份配比如下：粮食85份、枸杞12份、食用石膏1份、石灰2份、水98份。
粮食所含的原料的质量份配比如下：小麦55份、黑豆10份、黄豆10份、红豆10份。
菌丝共生扩大培养的培养基质的制备方法为：
1)称取相应的水并加入石灰，搅拌均匀后备用；
2)称取相应量的粮食加入上述的石灰水中浸泡8小时后捞出，并用清水将其冲洗干净；
3)将步骤2)中洗干净的粮食加1.5倍重量的水煮20分钟后捞出晒干备用；
4)称取相应的枸杞并用清水冲洗干净备用；
5)称取相应量的石膏与步骤3)中的粮食和步骤4)中的枸杞共同混合，控制水分含量在45％-60％，分装850ml培养瓶中高压、121度下灭菌2小时，取出等温度降至30℃左右即可置入无菌接种室等待接种。
取步骤5中所得的终极共生菌丝液40ml注入培养瓶中，在26℃下培养20-25天，菌丝长满瓶后取出即可。
7、烘干
将步骤6所得的颗粒菌丝置于65-75度烘干机中，烘干20小时。
8、粉碎
将步骤7中烘干的颗粒菌丝粉碎即得所述的共生菌丝粉。
本实施例仅对本发明所述的技术方案进行辅助说明，不对具体具体内容做限定。