本发明属于医药技术领域，具体涉及一种达沙替尼的制备方法。
背景技术：
达沙替尼(dasatinib)，别名sprycel，是一种灰白至黄色固体的化学品。化学名称n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺，分子式为c22h26cln7o2s，分子量为488.01，结构式为：
达沙替尼为抗肿瘤药，临床上主要治疗对甲磺酸伊马替尼耐药，或不耐受的费城染色体阳性(ph+)慢性髓细胞白血病(cml)慢性期、加速期和急变期(急粒变和急淋变)成年患者。
百时美施贵宝公司研究及公开的专利cn1980909，以2-氨基-3-氯-甲苯和2-甲基-3-氯-5-氨基嘧啶为原料合成中间体1和2，然后这两个中间体在nbs存在下环合生成n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺，再反应合成达沙替尼。该方法的产品收率较低，原料成本过高，同时部分原料没有工业化产品，所以大规模工业生产受到的限制很大；同样由百时美施贵宝公司研究及公开的专利cn1980909，4,6-二氯-2-甲基嘧啶先与n-羟乙基哌嗪反应，再与2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺反应合成达沙替尼，该方法最后一步是以醋酸钯为催化剂，binap为螯合剂，采用柱层析分离，生产成本高，工业化生产受限。目前，达沙替尼的制备方法仍存着部分不足，仍需研究改进，且百时美施贵宝公司所研发的产品为一水合物t1h1-7，对其他晶型的达沙替尼产品的制备研发和应用现有技术鲜有公开。
技术实现要素：
本发明的目的在于对现有材料进行改进，提供一种达沙替尼的制备方法，该制备方法制备工艺简单，产品产率高、纯度高，且所得的formi晶型的达沙替尼稳定性好，且生物利用度与现有的t1h1-7晶型产品等效。
为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：
一种达沙替尼的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺：通过2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺(scr-2114)与4,6-二氯-2-甲基嘧啶(scr-2115)反应得到n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺(scr-2116)；
(2)制备达沙替尼粗品：连接步骤(1)所得的n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺(scr-2116)和n-羟乙基哌嗪(scr-2117)合成达沙替尼粗品；
(3)精制达沙替尼：将步骤(2)所得的达沙替尼粗品和无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下将物料搅拌均匀，然后采取匀速降温的方式降温，将温度降至5～10℃后，恒温搅拌，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采用梯度升温的方式进行干燥至恒重，即得到达沙替尼终产品。
发明人研究发现，达沙替尼的formi晶型在影响因素试验60℃高温、rh75％高湿、4500lux光照等条件下稳定，且在原料到片剂过程中也保持稳定；通过犬的相对生物利用度比较试验证明formi晶型和已公开应用的t1h1-7晶型生物利用度等效，利用配对t检验计算，formi晶型和t1h1-7晶型原料药的auc和cmax之间的差异均无显著性意义(p>0.05)，且formi晶型在甲醇溶剂中稳定，且在甲醇溶剂中反应得到产品各项质量检测结果都符合国家及企业自定质量标准，因此选择formi晶型进行开发。
本发明的方法在重结晶精制达沙替尼的过程中，控制了加入晶种的温度在56～63℃，且采用匀速降温、梯度升温烘干的方式精制所得的终产品为formi晶型的达沙替尼，且产品纯度高、产率高，所得产品经hplc检测计算(hplc峰面积归一化法)杂质量小于等于0.1％(即在hplc检测中达沙替尼与杂志的峰面积比值≤0.1％)，产品收率大于等于65.9％。
在步骤(1)和步骤(2)过程相同的情况下，发明人对比两种精制过程中匀速降温和梯度升温烘干对终产物的影响，具体试验如下：
实验组：步骤(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后采取匀速降温的方式降温，每10min降温2-5℃，将温度降至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采用梯度升温的方式进行干燥，先在38～42℃下干燥4～6h至滤饼恒重，再升温至48～52℃真空干燥4～6h至滤饼恒重，最后升温至76～80℃真空干燥4～6h至滤饼恒重，得到达沙替尼终产品。
对比组1：步骤(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后自然冷却降温至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采用梯度升温的方式进行干燥，先在38～42℃下干燥4～6h至滤饼恒重，再升温至48～52℃真空干燥4～6h至滤饼恒重，最后升温至76～80℃真空干燥4～6h至滤饼恒重，得到达沙替尼终产品。
比较实验组和对比组1所得实验结果如下表：
由上述实验结果可以分析出，在精制步骤中，控制降温过程，采用每10min降温2-5℃匀速降温的方法进行冷却，可以得到晶型均一的formi晶型的达沙替尼，且产品结晶形态好，匀速降温的过程还能够有效提高产品的产率和纯度。
对比组2：步骤(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后自然冷却降温至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采在40℃下恒温干燥18h，得到达沙替尼终产品。
对比组3：步骤(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后自然冷却降温至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采在80℃下恒温干燥18h，得到达沙替尼终产品。
比较实验组、对比组2、对比组3的干燥程度和结晶情况，结果如下表：
由上述实验结果可以分析出，在精制步骤中，采用本发明所述的梯度升温干燥的方式，可以较快速的得到完全干燥的、晶型均一的formi晶型的达沙替尼，且产品结晶形态好，而恒温干燥时，如果采取低温干燥虽然对晶型没有影响，但是不易完全干燥产品，如果直接高温干燥对晶型会有影响，会使晶型发生转换成其他晶型，而得不到纯的formi晶型的达沙替尼。
优选的，所述的步骤(1)中所用的溶剂为四氢呋喃，碱剂为叔丁醇钠，2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺与4,6-二氯-2-甲基嘧啶的摩尔比为1.00:1.10～1.30，2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺与叔丁醇钠的摩尔比为1.00:3.90～5.60，2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺与四氢呋喃的质量体积比为1.00:8.0～10.0，叔丁醇钠的加入时反应液的温度为-10～10℃，反应如下：
发明人对步骤(1)所用的碱剂和溶剂进行优化选择，通过对比2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺，4,6-二氯-2-甲基嘧啶，n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺的溶解度性质选择了thf，乙二醇二甲醚(dme)等作反应溶剂，同时比较了叔丁醇钠，氢氧化钠，碳酸钾，n，n-二异丙基乙胺(dipea)，三乙胺等碱对反应的影响，所得实验结果如下表所示(hplc峰面积归一化法)：
实验结果显示：选择叔丁醇钠为反应用碱，thf为溶剂的效果最好，生成scr-2116纯度最高，scr-2114剩余最少。
为了进一步提高产品纯度，发明人对步骤(1)所用的碱剂叔丁醇钠的加料方式进行了优化探索，比较了分次加入叔丁醇钠和常规的一次性加入叔丁醇钠的效果，所得实验结果如下表所示(hplc峰面积归一化法)：
实验结果显示：叔丁醇钠分次加入反应，scr-2114反应更彻底，可以提高scr-2116的纯度和产率。
发明人还对叔丁醇钠的加入温度进行了优化，以进一步提高scr-2116的纯度，所得实验结果如下表所示(hplc峰面积归一化法)：
实验结果显示：在-10～10℃下，反应较好，生成产品纯度最高，scr-2114剩余较少，再降低温度对设备要求较高，因此选择在此温度下加入叔丁醇钠。
由此，优选的，步骤(1)为：室温下，将1.50kg2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺、1.11kg4,6-二氯-2-甲基嘧啶加入到50l反应釜中，加入13.35kg四氢呋喃，氮气保护,搅拌降温至-5℃～10℃，反应液温度保持在-5℃～10℃，分次向反应液中加入叔丁醇钠固体，叔丁醇钠固体的总量为2.13kg，加入方式为每20-30min加料一次，每次不多于总量的10％且最多不多于200g，加完后使反应液在-5℃～10℃下反应1～2h，将反应液后升温至10℃～30℃，搅拌反应液，至hplc检测2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺/n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺的量低于1.5％，将反应液降温至-10℃～10℃，滴加浓度为4mol/l的盐酸，调节体系ph至6～7，滴加完毕后在-10℃～10℃继续搅拌1～2h，过滤，滤饼用适量水、甲醇洗涤，滤饼在50～60℃真空干燥，得到n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺。
优选的，所述的步骤(2)中所用的碱剂为三乙胺，n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺和n-羟乙基哌嗪的摩尔比为1.00:1.50～3.00，n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺和三乙胺的摩尔比为1.00:1.00～2.00。
优选的，所述的步骤(2)为：将1.60kg步骤(1)所得的n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺和1.056kgn-羟乙基哌嗪、0.432kg三乙胺加入50l反应釜中，加入5.60kgn-甲基吡咯烷酮，氮气保护，将反应液搅拌升温至70～75℃，继续搅拌，待hplc检测n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺/达沙替尼的量低于0.5％时，开始降温，降温至15～30℃，加入22.4kg二氯甲烷，搅拌0.5～1.0h，过滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷洗涤，50～60℃真空干燥4～6h，干燥后的滤饼加入反应釜，加入5.60kgn-甲基吡咯烷酮，升温至35～45℃搅拌溶清，过滤物料，所得滤液加入反应釜，搅拌下加入19.2kg二氯甲烷后，降温至15～30℃搅拌0.5～1.0h，过滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷淋洗后，50～60℃真空干燥得到达沙替尼粗品，反应如下：
发明人对步骤(2)所用的溶剂进行优化选择，由于scr-2116溶解性较差，我们选择以下两种溶剂进行反应，所得结果如下表所示：
实验结果显示：n-甲基吡咯烷酮(nmp)反应产品纯度虽然略低，但剩余原料较少，且收率较高，因此选用nmp作为反应溶剂。
发明人对步骤(2)所用的scr-2116:scr-2117投料比例进行了研究，所得结果统计如下表：
实验结果显示：scr-2116:scr-2117比例在1.0:(1.5～3.0)时反应较好，原料剩余较少，因此选择此比例作为反应投料比。
发明人对步骤(2)所用的scr-2116:三乙胺投料比例进行了研究，所得结果统计如下表：
实验结果显示：scr-2116:三乙胺比例在1.0:(1.0～2.0)时反应最好，考虑到成本问题以及后处理时多余碱的去除问题，我们选择scr-2116:三乙胺为1.0:(1.0～1.2)左右作为反应投料比。
本发明的有益效果为：本发明公开了一种达沙替尼的制备方法，该制备方法制备工艺简单，产品产率高、纯度高，且所得的formi晶型的达沙替尼稳定性好，且生物利用度与现有的t1h1-7晶型产品等效。具体而言：
(1)本发明的方法在重结晶精制达沙替尼的过程中，控制了加入晶种的温度在56～63℃，且采用匀速降温、梯度升温烘干的方式精制所得的终产品为formi晶型的达沙替尼，且产品纯度高、产率高，所得产品经hplc检测计算(hplc峰面积归一化法)杂质量小于等于0.1％(即在hplc检测中达沙替尼与杂志的峰面积比值≤0.1％)，产品收率大于等于65.9％。经测试，本发明的方法制备的formi晶型的达沙替尼，在影响因素试验60℃高温、rh75％高湿、4500lux光照等条件下稳定，且在原料到片剂过程中也保持稳定；通过犬的相对生物利用度比较试验证明formi晶型和已公开应用的t1h1-7晶型生物利用度等效，利用配对t检验计算，formi晶型和t1h1-7晶型原料药的auc和cmax之间的差异均无显著性意义(p>0.05)，且formi晶型在甲醇溶剂中稳定，且在甲醇溶剂中反应得到产品各项质量检测结果都符合国家及企业自定质量标准，能够很好的适应满足达沙替尼的药用需求。
(2)本发明的制备方法所用的原料市场成熟、质量较好且稳定、价格便宜。合成步骤较为简单，适合工业化生产。且发明人对生产条件进行的探索研究，步骤(1)是噻唑环上胺基取代嘧啶环上氯的反应中，考察了各种碱和溶剂，发现四氢呋喃和叔丁醇钠反应最好、工艺简单、产品纯度高，并研究了碱剂的加入方式和加入温度对产品纯度的影响，进一步提高了中间产物的纯度；步骤(2)是羟乙基哌嗪取代嘧啶环上另一个氯的反应，比较反应效果和成本因素，最终选择三乙胺作为碱剂，nmp作为反应溶剂进行反应，并进一步优化了各反应原料的用量，以得到高纯度、高产率的达沙替尼。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
一种达沙替尼的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺：室温下，将1.50kg2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺、1.11kg4,6-二氯-2-甲基嘧啶加入到50l反应釜中，加入13.35kg四氢呋喃，氮气保护,搅拌降温至-5℃～10℃，反应液温度保持在-5℃～10℃，分次向反应液中加入叔丁醇钠固体，叔丁醇钠固体的总量为2.13kg，加入方式为每20-30min加料一次，每次不多于总量的10％且最多不多于200g，加完后使反应液在-5℃～10℃下反应1～2h，将反应液后升温至10℃～30℃，搅拌反应液，至hplc检测2-氨基-n-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺/n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺的量低于1.5％，将反应液降温至-10℃～10℃，滴加浓度为4mol/l的盐酸，调节体系ph至6～7，滴加完毕后在-10℃～10℃继续搅拌1～2h，过滤，滤饼用适量水、甲醇洗涤，滤饼在50～60℃真空干燥，得到n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺1.636kg，收率74.06％；
(2)制备达沙替尼粗品：常温下，将1.60kg步骤(1)所得的n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺和1.056kgn-羟乙基哌嗪、0.432kg三乙胺加入50l反应釜中，加入5.60kgn-甲基吡咯烷酮，氮气保护，将反应液搅拌升温至70～75℃，继续搅拌，待hplc检测n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺/达沙替尼的量低于0.5％时，开始降温，降温至15～30℃，加入22.4kg二氯甲烷，搅拌0.5～1.0h，过滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷洗涤，50～60℃真空干燥4～6h，干燥后的滤饼加入反应釜，加入5.60kgn-甲基吡咯烷酮，升温至35～45℃搅拌溶清，过滤物料，所得滤液加入反应釜，搅拌下加入19.2kg二氯甲烷后，降温至15～30℃搅拌0.5～1.0h，过滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷淋洗后，50～60℃真空干燥得到达沙替尼粗品1.9kg，收率96％；
(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，再搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后采取匀速降温的方式降温，每10min降温2-5℃，将温度降至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采用梯度升温的方式进行干燥，先在38～42℃下干燥至滤饼恒重，再升温至48～52℃真空干燥至滤饼恒重，最后升温至76～80℃真空干燥至滤饼恒重，即得到达沙替尼终产品1.252kg，收率65.9％，hplc检测杂质含量小于0.1％。
以上所列举的实施方式仅供理解本发明之用，并非是对本发明所描述的技术方案的限定，有关领域的普通技术人员，在权利要求所述技术方案的基础上，还可以作出多种变化或变形，所有等同的变化或变形都应涵盖在本发明的权利要求保护范围之内。本发明未详述之处，均为本技术领域技术人员的公知技术。