本发明涉及药物合成
技术领域：
，尤其涉及一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物及其制备方法和应用。
背景技术：
：combretastatina-4(ca-4)是由pettit等从南非灌木柳树皮combretumcaffrum中分离得到的一种二苯乙烯类化合物，它能够特异性地识别和破坏肿瘤血管，以致肿瘤细胞得不到足够的养分而“饿死”。通过作用于秋水仙碱结合位点，ca-4能够抑制微管蛋白的聚合从而阻止肿瘤血液流动。然而由于ca-4及其衍生物目前还存在许多缺陷，比如水溶性差、顺式结构不稳定、反式结构没有活性等，使其在临床试验中受到很大阻碍。所以，长久以来围绕ca-4类似物的结构改造做了大量的研究工作。多数情况下，在对ca-4结构改造中，往往只保留a环部分，对连接桥和b环进行改造。毛兰素，化学名为3,4,5-三甲氧基-3’-羟基-4’-甲氧基二苯乙烷(代号：mls)，是一种从名贵中药材石斛中提取出来的天然二苯乙烷类活性成分，在结构上与二苯乙烯类天然产物combretastatina-4(代号ca4，又称风车子素)具有共同的结构特征，具有共同的ab环结构，毛兰素相当于是乙烯基桥被氢化了的ca4。与ca4一样，毛兰素也是一种微管蛋白抑制剂且具有较强的肿瘤血管靶向破化作用，作用于秋水仙碱结合位点。此外有文献报道毛兰素的抗肿瘤作用还可能通过作用于端粒酶而诱导肿瘤细胞凋亡有关。此前我们发现将毛兰素b环4-位的甲氧基替换为乙氧基后得到一种4-乙氧基毛兰素(ebt)，其抗肿瘤活性与毛兰素和ca4相比有显著提高(吴范宏等，一种乙氧基二苯乙烷衍生物及其制备方法和用途，国际公布号us2012/0046492a1)，通过分子对接技术模拟确定其与微观蛋白秋水碱结合位点作用更好。由于不存在顺反式异构体的变化，相关理化性质比ca4更稳定，化合物的制备工艺更加简便，合成收率显著提高，而原料损耗和单位合成成本大大降低(一种3,4,5-三甲氧基-3’-羟基-4’-烷氧基二苯乙烷的制备方法，中国专利cn103539642a)。近年来，含氟药物在临床治疗药物中占有很大的比重，在小分子药物中引入氟原子或含氟基团，是改善药物活性的重要策略之一。氟原子具有最大的元素电负性和与氢原子相近的原子半径，在小分子药物中引入氟原子或含氟基团后，对其分子体积几乎没有影响，但是对其理化性质包括电子效应和立体效应、生物活性、药代动力学性质、代谢稳定性和配体与靶标蛋白的相互作用力以及选择性等可能产生显著影响，而且还可以增强小分子的亲脂性，使其更容易透过细胞膜，进而提高生物活性。之前研究的ca-4含氟化合物多为单氟取代和三氟甲基取代，对于偕二氟乙基取代的二苯乙烯及二苯乙烷衍生物未见报道。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物及其制备方法和应用。本发明的衍生物抗肿瘤活性高，对肿瘤具有血管靶向作用。本发明的技术方案具体介绍如下。本发明提供一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物，其具有通式(i)所示结构：其中：虚线---表示化学键或不存在；r为氢、羟基、硝基、氨基、磷酸盐、硫酸盐、磷酸胆碱、或氨基酸侧链及其水溶性铵盐；优选的，r为氢、羟基、硝基、氨基、-opo3na2、-nhcochch2nh2、或是-nhcochnh2ch2oh；进一步优选的，r为氢、羟基、硝基或氨基。本发明还提供一种上述的偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物的制备方法，其包括3,4,5-三甲氧基苄溴三苯基溴化磷和4-(1,1-二氟乙基)苯甲醛在碱作用下发生wittig反应生成烯烃化合物，或者3,4,5-三甲氧基苄溴三苯基溴化磷和4-(1,1-二氟乙基)-2或3-位r取代苯甲醛在碱作用下进行wittig反应生成烯烃化合物的步骤。其合成路线如式(ii)所示：当通式(i)中r官能团为氨基酸侧链时，由相应的氨基物与氨基酸缩合得到，其合成方程式如式(iii)所示：本发明进一步提供一种上述的偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物在制备治疗非正常新生血管引起的疾病的药物中的应用；所述疾病主要包括有：风湿性关节炎、糖尿病视网膜病、早熟视网膜病、视网膜静脉闭塞、牛皮癣、红斑痤疮、卡波济肉瘤、特异性反应性角膜炎、流行性角膜结膜炎、新生血管性青光眼、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯性疤疹感染、带状疤疹感染、原生动物感染、分支杆菌感染、多动脉炎、肉样瘤、巩膜炎、潮红、口干眼燥关节炎综合症、全身性红斑狼疮、艾滋病综合症、梅毒。本发明进一步提供一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物在制备微管蛋白聚集抑制剂中的应用。本发明进一步提供一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物在制备作为抗肿瘤血管破坏剂，对各种肿瘤具有血管靶向作用的药物中的应用。所述各种肿瘤主要包括有：肺癌、非小细胞肺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、骨癌、食道癌、乳房癌、前列腺癌、睾丸癌、结肠癌、卵巢癌、膀胧癌、子宫颈癌、黑色素瘤、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊性腺癌、囊性癌、髓状癌、支气管癌、骨细胞癌、上皮癌、胆管癌、绒毛膜癌、胚癌、精原细胞癌、维尔姆斯癌、胶质细胞癌、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血细胞瘤、声带神经瘤、脑膜瘤、成神经细胞瘤、成视神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经纤维瘤、纤维肉瘤、成纤维细胞瘤、纤维瘤、纤维腺瘤、纤维软骨瘤、纤维囊瘤、纤维粘液瘤、纤维骨瘤、纤维粘液肉瘤、纤维乳头状瘤、粘液肉瘤、粘液囊瘤、粘液软骨瘤、粘液软骨肉瘤、粘液软骨纤维肉瘤、粘液腺瘤、成粘液细胞瘤、脂肉瘤、脂肪瘤、脂肪腺瘤、成脂细胞瘤、脂肪软骨瘤、脂肪纤维瘤、脂肪血管瘤、粘液脂瘤、软骨肉瘤、软骨瘤、软骨肌瘤、脊索瘤、绒毛膜腺瘤、绒毛上皮瘤、成绒毛膜细胞瘤、骨肉瘤、成骨细胞瘤、骨软骨纤维瘤、骨软骨肉瘤、骨软骨瘤、骨囊瘤、骨牙质瘤、骨纤维瘤、骨纤维肉瘤、血管肉瘤、血管瘤、血管脂肪瘤、血管软骨瘤、成血管细胞瘤、血管角质瘤、血管神经胶质瘤、血管内皮瘤、血管纤维瘤、血管肌瘤、血管脂肪瘤、血管淋巴管瘤、血管脂肪平滑肌瘤、血管肌脂瘤、血管肌神经瘤、血管粘液瘤、血管网状内皮瘤、淋巴管肉瘤、淋巴肉芽瘤、淋巴管瘤、淋巴瘤、淋巴粘液瘤、淋巴肉瘤、淋巴管纤维瘤、淋巴细胞瘤、淋巴上皮瘤、成淋巴细胞瘤、内皮瘤、成内皮细胞瘤、滑膜瘤、滑膜肉瘤、间皮瘤、结缔组织瘤、尤因瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、成平滑肌瘤、平滑肌纤维瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、横纹肌粘液瘤、急性淋巴白血病、急性骨髓性白血病、慢性病细胞、红细胞增多症、淋巴瘤、多发性骨髓瘤；优选的，所述肿瘤为宫颈癌、结肠癌、非小细胞肺癌、乳腺癌或胃癌。本发明的一种偕二氟乙基取代的二苯乙烯和二苯乙烷类衍生物的药物制剂，选自包括以下剂型：静脉注射形式给药的冻干粉剂、粉剂、注射剂、脂质体、乳剂、微囊、悬浮液或溶液；口服形式给药的颗粒剂、片剂、胶囊或糖浆；或是栓剂。和现有技术相比，本发明的有益效果在于：在二苯乙烷/烯的b芳环的4'位用偕二氟乙基进行化学结构修饰，同时将其2'位改造成硝基或氨基等取代基；该类偕二氟乙基取代的二苯乙烯及二苯乙烷类衍生物具有较强的体外抗肿瘤活性，氟原子的引入不仅改变了化合物本身的物理性质，同时增强了体外抗肿瘤活性，并对多种肿瘤细胞均有较好的抑制作用。具体实施方式下列实例仅仅为了说明方案的实施过程，包括但不限于其中的条件。本发明的化合物能根据以下所述的一般方案使用适当的物质作为原料来制备，并且通过后面的实施例来具体举例说明。当然，实施例中的举例化合物制备步骤的条件和方法的各种已知合理的变化也能用于制备这些化合物。所述的分析测试仪器和条件除非另有说明，否则：hrms高分辨质谱为瑞士布鲁克公司的solanx-70ft-ms，h-nmr核磁氢谱volanceⅲ500m或agilent400nmr或brukeramx-400型核磁共振仪测定，测试溶剂为cdcl3。实施例14-(1,1-二氟)乙基苯甲醛的合成步骤一：4-(1,1-二氟乙基)苯甲酸甲酯的制备将4-乙酰基苯甲酸甲酯(5.00g,28.06mmol)溶于40ml无水ch2cl2加入密封管中，n2保护，-40℃下缓慢滴加dast(二乙胺基三氟化硫)(12ml,3.4eq)，然后油浴加热60℃反应24h，反应结束后降至0℃以下，用饱和nahco3水溶液淬灭反应，ch2cl2萃取，合并有机相，浓缩，柱层析分离ea:pe＝1:150，得到3.30g白色固体，产率59％。mp:35.2-35.7℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.92(t,3h,j＝18.0hz),3.93(s,3h),7.57(d,2h,j＝8.0hz),8.09(d,2h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ166.3,142.6142.4,142.2,131.4,129.8,124.7,123.8,121.4,119.5,52.27,26.1,25.9,25.6.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-88.70.ms(m/z):200(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc10h10f2o2(m+h)+:201.0727,found:201.6502.步骤二：4-(1,1-二氟乙基)苄醇的制备将lah(氢化铝锂)(1.00g，26.4mmol，3eq)溶于50mlthf中，60℃油浴搅拌3h，然后将反应体系冷却至0℃以下，缓慢滴加4-(1,1-二氟乙基)苯甲酸甲酯(1.76g，8.8mmol)的8mlthf溶液至反应瓶中，滴加完毕后升至100℃回流反应2h。停止加热，将反应体系冷却至0℃以下，加入饱和nah2po4溶液淬灭反应，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩旋干得到1.50g4-(1,1-二氟乙基)苄醇黄色液体，产率99％。1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.90(t,3h,j＝18.0hz),2.40(s,1h),4.67(s,2h),7.37(d,2h,j＝8.0hz),7.48(d,2h,j＝8.5hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ142.5,137.7,137.4,137.2,126.9,124.9,123.7,121.8,119.9,64.6,26.1,25.9,25.7.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.22.ms(m/z):172(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h10f2o(m+h)+:173.0788,found:173.3046.步骤三：4-(1,1-二氟乙基)苯甲醛的制备将4-(1,1-二氟乙基)苄醇(1.93g,11.21mmol)溶于50ml无水ch2cl2中，加入pcc(氯铬酸吡啶酯)(3.63g,16.82mmol,1.5eq)，n2保护，室温搅拌1h，tlc跟踪检测至反应完全，加入饱和nacl水溶液，用饱和nahco3水溶液洗涤至无色，再用乙酸乙酯萃取，无水na2so4干燥，过滤，浓缩旋干得到白色固体1.55g，产率81％。mp:165.8-166.3℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.95(t,3h,j＝18.0hz),7.63(d,2h,j＝8.0hz),8.18(d,2h,j＝8.0hz),10.07(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ191.6,171.1,143.4,130.5,124.9,123.2,121.3,119.4,26.2,25.9,25.7.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-88.92.ms(m/z):170(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h8f2o(m+h)+:171.0621,found:171.2190.实施例2(z/e)-3,4,5-三甲氧基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯的制备n2保护下，将3,4,5-三甲氧基苄溴三苯基溴化磷(3.08g，5.88mmol)悬浮于50ml无水thf溶液中，-30℃下缓慢滴加正丁基锂(4.5ml，7.06mmol，1.2eq)，然后反应1h，接着缓慢滴加4-(1,1-二氟乙基)苯甲醛(1.00g，5.88mmol)的thf溶液(5ml)至反应体系中，升至室温过夜反应12h。反应结束后将体系冷却至-5℃以下，加入饱和nacl水溶液，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后柱层析分离ea:pe＝1:25，得到1.20g油状物为顺反混合物，产率64％(z:e＝4:1)。进一步柱层析分离得到纯的顺反异构体。(z)-3,4,5-三甲氧基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯白色油状物z-isomer:1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.89(t,3h,j＝18.0hz),3.64(s,6h),3.83(s,3h),6.42(s,2h),6.56(d,1h,j＝12.0hz),6.59(d,1h,j＝12.0hz),7.33(d,2h,j＝8.0hz),7.40(d,2h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.0,139.1,137.5,137.0,136.9,136.6,132.1,131.3,129.0,124.6,123.6,121.7,119.8,106.2,60.9,55.8,26.0,25.8,25.5.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.37.ms(m/z):334(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h20f2o3(m+h)+:335.1459,found:335.1453.(e)-3,4,5-三甲氧基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯白色固体e-isomer:mp:142.4-143.1℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.94(t,3h,j＝18.0hz),3.88(s,3h),3.92(s,6h),6.75(s,2h),7.01(d,1h,j＝16.0hz),7.08(d,1h,j＝16.0hz),7.49(d,2h,j＝8.0hz),7.54(d,2h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.5,138.7,138.4,137.1,132.7,130.0,127.1,126.4,125.1,123.7,121.8,119.9,103.9,61.0,56.2,26.1,25.9,25.6.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.22.ms(m/z):334(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h20f2o3(m+h)+:335.1459,found:335.1453.实施例33,4,5-三甲氧基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烷的制备将(z/e)-3,4,5-三甲氧基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯(1.20g，3.6mmol)溶于30ml乙醇中，加入pd/c(0.10g,0.9mmol)，h2过量室温搅拌过夜，反应结束后将pd/c过滤除去，将溶剂旋干得到白色固体1.10g，产率90％。mp:60.1-60.7℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.91(t,3h,j＝18.0hz),2.86(m,2h),2.94(m,2h),3.82(d,9h,j＝10.0hz),6.34(s,2h),7.22(d,2h,j＝7.5hz),7.42(d,2h,j＝7.5hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.1,143.3,137.1,136.3,136.2,135.9,135.7,128.6,124.7,124.6,124.6,123.8,121.9,120.0,105.5,60.9,56.1,38.1,37.7,26.1,25.9,25.6.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-86.84.ms(m/z):336(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h22f2o3(m+h)+:337.1615,found:337.1610.实施例44-(1,1-二氟)乙基-2-硝基苯甲醛的合成步骤一：4-(1,1-二氟)乙基-2-硝基甲苯的制备将4-甲基-3-硝基苯乙酮(5.00g,27.91mmol)溶于40ml无水ch2cl2加入密封管中，n2保护，-40℃下缓慢滴加dast(二乙胺基三氟化硫)(12ml,3.4eq)，然后油浴加热60℃反应24h，反应结束后降至0℃以下，用饱和nahco3水溶液淬灭反应，ch2cl2萃取，合并有机相，浓缩，柱层析分离ea:pe＝1:150，得到5.20g淡黄色液体，产率93％。1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.95(t,3h,j＝18.0hz),2.63(s,3h),7.43(d,1h,j＝8.0hz),7.64(d,1h,j＝7.5hz),8.11(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ149.1,137.7,137.5,137.3,135.2,133.3,129.0,122.6,121.2,120.7,118.8,25.9,25.6,25.4,20.2.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.80.ms(m/z):201(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h9f2no2(m+k)+:240.0238,found:240.1427.步骤二：4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基溴甲苯的制备将4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基甲苯(5.20g，25.85mmol)，nbs(n-溴代丁二酰亚胺)(5.52g，31.02mmol，1.2eq)，bpo(过氧化苯甲酰)(1.00g)和100mlccl4混合至烧瓶中，搅拌回流反应12h。反应液冷却至室温后加入饱和nacl水溶液洗涤，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后加入四倍于剩余液体的石油醚，放置冰箱内重结晶，过滤得到4.45g白色固体，产率61％。mp:81.0-81.7℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.97(t,3h,j＝18.0hz),4.84(s,2h),7.67(d,1h,j＝8.0hz),7.75(d,1h,j＝8.0hz),8.18(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ147.9,140.3,140.0,139.8,134.3,138.1,129.8,122.3,122.1,120.4,118.5,29.6,28.0,25.9,25.7,25.4.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-88.38.ms(m/z):280(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h8brf2no2(m+h)+:281.9764,found:281.0254.步骤三：4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基苄醇的制备将4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基溴甲苯(3.11g，11.11mmol)和caco3(5.56g，55.55mmol，5eq)悬浮于80ml混合溶剂1,4-二氧六环-h2o(1:1)中，加热至90℃，反应12h。反应液冷却至室温后加入饱和nacl水溶液洗涤，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后柱层析分离ea:pe＝1:10，得到1.30g红色固体，产率54％。mp:51.8-52.4℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.99(t,3h,j＝18.0hz),5.07(s,2h),7.84(d,1h,j＝8.0hz),7.90(d,1h,j＝8.0hz),8.27(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ147.3,139.1,138.9,138.6,138.5,130.0,122.5,121.5,120.6,118.7,61.9,25.9,25.7,25.4.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-88.10.ms(m/z):217(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h9f2no3(m+k)+:256.0188,found:256.9813.步骤四：4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基苯甲醛的制备将4-(1,1-二氟乙基)-2-硝基苄醇(1.00g,4.6mmol)溶于30ml无水ch2cl2中，加入pcc(氯铬酸吡啶酯)(1.50g,6.9mmol,1.5eq)，n2保护，室温搅拌12h，tlc跟踪检测至反应完全，加入饱和nacl水溶液，用饱和nahco3水溶液洗涤至无色，再用乙酸乙酯萃取，无水na2so4干燥，过滤，浓缩柱层析分离ea:pe＝1:70得到淡黄色固体0.78g，产率79％。1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.99(t,3h,j＝18.0hz),7.92(d,1h,j＝8.0hz),8.00(d,1h,j＝7.5hz),8.23(s,1h),10.40(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ187.5,149.4,143.9,143.6,143.4,132.2,130.3,122.3,121.1,120.3,118.4,25.5,25.3,25.1.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-88.93.ms(m/z):215(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc9h7f2no3(m+na)+:238.0292,found:238.0296.实施例5(z/e)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯的制备n2保护下，将3,4,5-三甲氧基苄溴三苯基溴化磷(1.90g，3.6mmol)悬浮于20ml无水thf溶液中，-30℃下缓慢滴加正丁基锂(2.7ml，4.3mmol，1.2eq)，然后反应1h，接着缓慢滴加2-硝基-4-偕二氟苯甲醛(0.78g，3.6mmol)的thf溶液(10ml)至反应体系中，升至室温过夜反应12h。反应结束后将体系冷却至-5℃以下，加入饱和nacl水溶液，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后柱层析分离ea:pe＝1:25，得到0.98g黄色油状物为顺反混合物，产率72％(z:e＝3:1)。进一步柱层析分离得到纯的顺反异构体。(z)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯黄色油状物z-isomer:1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.96(t,3h,j＝18.0hz),3.61(s,6h),3.83(s,3h),6.24(s,2h),6.75(d,1h,j＝12.0hz),6.88(d,1h,j＝12.0hz),7.44(d,1h,j＝8.0hz),7.60(d,1h,j＝8.0hz),8.24(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.0,148.3,138.8,138.6,138.3,138.0,135.3,133.1,132.8,130.8,129.0,124.9,122.4,121.1,120.5,118.5,106.5,60.9,55.8,29.7,25.8,25.5,25.3.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.98.ms(m/z):379(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h19f2no5(m+h)+:380.1310,found:380.1309.(e)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯黄色固体e-isomer:mp:93.2-93.8℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.99(t,3h,j＝18.0hz),3.92(d,9h,j＝17.0hz),6.78(s,2h),7.08(d,1h,j＝16.0hz),7.50(d,1h,j＝16.0hz),7.74(d,1h,j＝8.0hz),7.84(d,1h,j＝8.0hz),8.11(s,1h).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.5,147.7,139.2,138.1,135.1,134.3,131.8,129.1,128.5,122.5,121.9,121.5,120.6,104.4,61.0,56.2,29.7,25.9,25.7,25.4.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.94.ms(m/z):379(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h19f2no5(m+h)+:380.1310,found:380.1309.实施例6(z)-3,4,5-三甲氧基-2'-氨基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯的制备将(z)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯(0.50g，1.32mmol)，锌粉(0.95g，14.52mmol，11eq)，冰醋酸(20ml)混合至单口烧瓶中，室温搅拌，反应2h后，tlc检测反应完全，加入饱和nahco3水溶液，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后柱层析分离ea:pe＝1:15，得到红色油状物0.20g，产率43％。1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.87(t,3h,j＝18.0hz),3.60(s,6h),3.81(s,3h),6.43(s,2h),6.47(d,1h,j＝12.0hz),6.60(d,1h,j＝12.0hz),6.85(d,2h,j＝7.5hz),7.15(d,1h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ152.8,143.9,138.6,138.4,138.2,137.7,132.5,131.7,129.8,125.1,124.6,123.6,121.7,119.8,114.4,111.3,106.0,60.8,55.7,26.0,25.8,25.5.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.63.ms(m/z):349(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h21f2no3(m+h)+:350.1568,found:350.1564.实施例7(e)-3,4,5-三甲氧基-2'-氨基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯的制备将(e)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯(0.50g，1.32mmol)，锌粉(0.95g，14.52mmol，11eq)，冰醋酸(20ml)混合至单口烧瓶中，室温搅拌，反应2h后，tlc检测反应完全，加入饱和nahco3水溶液，ea萃取，合并有机相，无水na2so4干燥，过滤，浓缩后柱层析分离ea:pe＝1:10，得到红色固体0.38g，产率82％。mp:96.3-96.9℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.90(t,3h,j＝18.0hz),3.87(s,3h),3.91(s,6h),6.73(s,2h),6.87(s,1h),6.92(d,1h,j＝7.0hz),6.94(d,1h,j＝16.0hz),7.03(d,1h,j＝16.0hz),7.41(d,1h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.5,143.8,138.4,133.0,131.5,127.4,125.1,123.6,122.9,121.7,119.8,115.4,112.4,103.8,61.0,56.2,26.1,25.9,25.6.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.65.ms(m/z):349(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h21f2no3(m+h)+:350.1568,found:350.1567.实施例83,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烷的制备将(z/e)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯(1.00g，2.64mmol)溶于30ml乙醇中，加入pd/c(0.10g，0.9mmol)，h2过量室温搅拌过夜，反应结束后将pd/c过滤除去，将溶剂旋干得到红色固体0.46g，产率46％。mp:87.9-88.5℃.1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.88(t,3h,j＝18.0hz),2.79(m,2h),2.87(m,2h),3.80(s,6h),3.83(s,3h),6.34(s,2h),6.81(s,1h),6.85(d,1h,j＝8.0hz),7.05(d,1h,j＝8.0hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.2,143.9,137.3,137.1,136.4,129.8,127.6,123.7,121.8,120.0115.3,112.0,105.4,60.9,56.1,35.6,33.1,26.1,25.9,25.6.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.21.ms(m/z):381(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h21f2no5(m+h)+:382.1466,found:382.1831.实施例93,4,5-三甲氧基-2'-氨基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烷的制备将(z/e)-3,4,5-三甲氧基-2'-硝基-4'-(1,1-二氟乙基)二苯乙烯(1.00g，2.64mmol)溶于30ml乙醇中，加入pd/c(0.10g，0.9mmol)，h2过量室温搅拌过夜，反应结束后将pd/c过滤除去，将溶剂旋干得到红色液体0.37g，产率40％。1hnmr(cdcl3,500mhz):δ1.90(t,3h,j＝18.0hz),2.76(t,2h,j＝6.5hz),2.87(t,2h,j＝6.5hz),3.08(dd,2h,j＝6.5hz,j＝7.0hz),3.81(d,9h,j＝19.0hz),6.31(s,2h),6.71(s,2h),6.81(d,1h,j＝7.5hz),7.06(d,1h,j＝6.5hz).13cnmr(cdcl3,125mhz):δ153.2,146.2,137.6,137.3,137.2,136.5,129.0,126.9,124.1,122.2,120.3,113.1,106.3,105.5,60.8,56.1,38.5,35.7,32.9,26.2,25.9,25.7.19fnmr(cdcl3,470mhz):δ-87.05.ms(m/z):351(m+).esi-hrms(m/z):calculatedforc19h23f2no3(m+na)+:374.1544,found:374.1960.实施例103,4,5-三甲氧基--2'-(盐酸氨基乙酰基)氨基4'-(1,1-二氟)乙基-二苯乙烷的制备将(z,e)-3,4,5-三甲氧基-2'-氨基-4'-(1,1-二氟)乙基-二苯乙烯(0.50g,1.42mmol)和boc-甘氨酸(1.5mmol)溶于10ml无水二氯甲烷中，加入dcc(2.0mmol)，过量室温搅拌过夜，加水淬灭，用硅藻土过滤除去不溶物，滤液旋干，重新溶解于乙醚中，再加入2n氯化氢乙醚溶液脱保护，有固体析出，室温搅拌1h，tlc检测反应完毕，过滤得白色固体0.57g，产率90％。实施例15mtt法测试化合物对多种肿瘤细胞的抗肿瘤活性1、试验方法细胞以含200ml/l胎牛血清的rpmi1640培养液培养，使细胞一直处于对数生长期，接种至96孔板，密度4～8×104/ml，37℃，预培养24小时加药，药物设6个浓度，每种药物设3个复孔，连续作用48小时，甩去培养液风干，每孔加冰冷500g/l三氯醋酸50μl(终浓度为100g/l)固定60min后去离子水洗4～5次，干燥，每孔加4g/lsrb100μl作用30min,10ml/l醋酸轻洗4次,甩干，每孔加10mmoltrisbase200μl摇动混匀，在平板振荡器上振荡5min,在酶联免疫检测仪测定a值，用空白对照调零，所用波长为490nm，抑瘤率(％)＝(无药细胞对照孔a值平均值-用药孔a值平均值)/无药细胞对照孔a值平均值×100％，阳性对照为(z)-3,4,5-三甲氧基-3'-羟基-4'-甲氧基二苯乙烯(ca-4)，根据不同浓度下药物对细胞生长的抑制率，以logit方法计算ic50值。细胞株：hela细胞株、hct-116细胞株、a549细胞株、mcf-7细胞株、mkn45细胞株。2、试验结果表1实施例化合物对多种肿瘤细胞株的体外抗肿瘤活性评价(mtt法)编号hela(μml)ca-40.27i-10.37i-20.24i-30.11i-4/i-50.34i-60.19i-70.0067i-80.13i-190.46i-100.05表2实施例化合物对多种肿瘤细胞株的体外抗肿瘤活性评价(mtt法)上述所述通式(i)上化合物抗肿瘤活性测试的阳性对照物为(z)-3,4,5-三甲氧基-3'-羟基-4'-甲氧基二苯乙烯(ca-4)，药效评价结果综述如下：：体外培养肿瘤细胞的抗肿瘤活性评价，结果表明ca-4含氟类似物对hela细胞具有广泛的抑制活性，并且这些化合物的活性数值与对照药ca-4的活性数值相差不大，尤其化合物7的ic50值分别为0.0067μm小于ca-4的ic50值(0.27μm)，说明在ca-4结构b环中引入两个氟原子有效地改善了化合物的抗肿瘤活性。分析4-偕二氟取代的ca-4类似物活性可以发现，反式化合物也有较好活性，并且与顺式结构的活性相差不大，如化合物1和2的ic50值分别为0.37和0.24μm，化合物6和7的ic50值分别为0.19和0.0067μm，甚至顺式结构没有检测到ic50值，如化合物4。我们进一步评价了对hela细胞抑制活性最佳化合物7，实验结果表明化合物7对人胃癌细胞mkn45、人肺癌细胞a549、人乳腺癌细胞mcf-7和人结肠癌细胞hct-116也具有较强的抑制活性，同等条件下比较对各肿瘤细胞株的抑制活性要显著优于ca4，显示出广谱的抗肿瘤活性，并对hela细胞和hct-116细胞具有一定的选择性，其ic50值分别为0.0067μm和0.063μm。上述活性数据表明，偕二氟乙基取代的二苯乙烷及二苯乙烯类衍生物的体外抗肿瘤活性显著优于已知的阳性对照化合物ca4，具有良好的应用开发前景。需要说明的是，以上实施例已对本发明创造的部分化合物进行了说明，但并不局限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背发明创造精神的前提下，还可做出多种等同的改变和替换，这些等同的改变和替换应包括在本申请权利要求所限定的范围内。当前第1页12