本发明属于医药技术领域,具体涉及一种多糖的制备方法。
背景技术:
马齿苋,一年生草本,全株无毛。茎平卧或斜倚,伏地铺散,多分枝,圆柱形,长10-15厘米淡绿色或带暗红色。叶互生,有时近对生,叶片扁平,肥厚,倒卵形,似马齿状,上面暗绿色,下面淡绿色或带暗红色;叶柄粗短。花无梗,午时盛开;苞片叶状,近轮生;萼片对生,绿色,盔形,背部具龙骨状凸起,基部合生;花瓣黄色,倒卵形;雄蕊通常8,或更多,花药黄色;子房无毛,花柱比雄蕊稍长,柱头线形。蒴果卵球形;种子细小,多数,偏斜球形,黑褐色,有光泽,具小疣状凸起。花期5-8月,果期6-9月。入药具有解毒、抑菌消炎、利尿止痢、润肠消滞、去虫、明目和抑制子宫出血等药效;外用可以治丹毒、毒蛇咬伤等症状。
多糖类化合物的初级结构的分子量在3×10^5以上,多聚物的连接方式均有β-1-3-d-残基的主链和β-1-6-d-葡萄糖侧链残基。但从不同真菌提取的多糖的β-1-6-d-葡萄糖的分支程度不等,灵芝多糖的主链残基与侧链残基的比例为5∶2,即每个主链残基环绕2个β-1-6-d-葡萄糖残基。无1-6β侧链的1-3-β葡聚糖未见抗肿瘤活性。多糖的三维螺旋结构参与其抗肿瘤活性,此结构遭破坏则影响其活性。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种多糖的提取方法,该多糖具有广泛的药用价值。
本发明是通过如下技术方案完成的,具体内容包括:
a.取干燥的马齿苋原料粉碎,过20~60目筛,收集粗粉备用;
b.酶解:称取一定量的粗粉,加入料液比为1:3~5、50~70%的乙醇浸泡,并加入粗粉重量0.1%~0.3%的纤维素酶在适当的ph值,温度为40~50℃的条件下浸泡酶解120min,去杂质;
c.将上述酶解液放入温度为15倍重量的蒸馏水,100℃水浴浸1h进行浓缩;
d.将所得浓缩液在200w下超声提取20min,再用60~80%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;
e.回收试剂,真空干燥即得多糖。
步骤b中所述的所述的纤维素酶为c1酶、cx酶和β葡糖苷酶中的一种或两种以上的混合物。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式:
实施例1:
取干燥的马齿苋原料粉碎,过20目筛,收集粗粉备用;称取一定量的粗粉,加入料液比为1:3~5、50~70%的乙醇浸泡,并加入粗粉重量0.1%~0.3%的纤维素酶在ph值为4,温度为40℃的条件下浸泡酶解120min,去杂质;将上述酶解液放入温度为15倍重量的蒸馏水,100℃水浴浸1h进行浓缩;将所得浓缩液在200w下超声提取20min,再用60%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;回收试剂,真空干燥,经uv检测,马齿苋多糖的含量为95.78%。
实施例2:
取干燥的马齿苋原料粉碎,过40目筛,收集粗粉备用;称取一定量的粗粉,加入料液比为1:3~5、50~70%的乙醇浸泡,并加入粗粉重量0.1%~0.3%的纤维素酶在ph值为5,温度为45℃的条件下浸泡酶解120min,去杂质;将上述酶解液放入温度为15倍重量的蒸馏水,100℃水浴浸1h进行浓缩;将所得浓缩液在200w下超声提取20min,再用70%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;回收试剂,真空干燥,经uv检测,马齿苋多糖的含量为94.86%。
实施例3:
取干燥的马齿苋原料粉碎,过60目筛,收集粗粉备用;称取一定量的粗粉,加入料液比为1:3~5、50~70%的乙醇浸泡,并加入粗粉重量0.1%~0.3%的纤维素酶在ph值为6,温度为45℃的条件下浸泡酶解120min,去杂质;将上述酶解液放入温度为15倍重量的蒸馏水,100℃水浴浸1h进行浓缩;将所得浓缩液在200w下超声提取20min,再用80%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;回收试剂,真空干燥,经uv检测,马齿苋多糖的含量为97.56%。