一种用于降解有机磷农药的微生物制剂及其制备方法与流程

文档序号:17695693发布日期:2019-05-17 21:29阅读:393来源:国知局

本发明涉及生物技术领域,尤其是一种用于降解有机磷农药的微生物制剂及其制备方法。



背景技术:

有机磷农药是一种在环境中广泛使用的杀虫剂,具有高效、广谱等优点,子20世纪60年代以来,逐渐取代了有机氯农药。随着有机磷农药的大量使用,其负面影响日益突出。有机磷农药的生产、运输和大量使用对生态环境中其他非靶标生物乃至土壤、水、大气整个生态系统产生的负面影响尤为突出,残存于作物、土壤或水体中的有机磷农药,经物理迁移或化学转化,最终头盖骨食物链的传递和富集作用影响人类及其他有益生物体。

有机磷农药的降解技术可分为热降解、光降解、化学降解和生物降解。生物降解是通过生物的作用将农药分解为无毒或低毒小分子化合物,并最终降解为水、二氧化碳和矿物质的过程。相对于物理、化学降解技术,生物降解具有高效、彻底、无二次污染的优势,作物本身、微生物都能够降解有机磷农药残留,但植物降解很缓慢,周期很长,微生物由于其强大的代谢多样性,在有机磷农药降解中具有更大的优势。有机磷农药降解微生物的培养方法多数以葡萄糖提供碳源,酵母膏、蛋白胨或铵盐提供氮源,还需要补充磷酸盐和微量元素。这种培养基的成本较高,培养微生物菌体的成本也相应较高。



技术实现要素:

本发明的目的是:克服现有技术中微生物培养成本高,导致生产微生物制剂的成本也高的技术不足,提供一种操作简单、生产成本低的用于降解有机磷农药的微生物制剂及其制备方法。

为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂,所述微生物制剂由降解菌和表面活性剂按1:2~3:1的体积比配制而成,所述降解菌选自:蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、曲霉菌、头状葡萄球菌中的至少一种。

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂的方法,包括以下步骤:

(1)培养基配置:硫酸铵1~3份、磷酸氢二钾1~3份、硫酸镁0.08~0.12份、琼脂20份、甘薯淀粉30份,调节培养基的ph值为7.0~7.5,将培养基在121℃下灭菌20~30min;

(2)液体种子制备:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照10~15%的接种量接种降解菌,控制温度为25~37℃,通空气培养24~60h,得到活菌体培养物;

(3)液态发酵:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照10~15%的接种量接种步骤(2)中的液体种子,控制温度为25~37℃,通气培养24~60h,得到活菌体培养物;

(4)微生物制剂的制备:培养好的发酵液和表面活性剂按体积比1:2~3:1混合。

进一步的,所述步骤(1)中培养基配置为:硫酸铵3份、磷酸氢二钾3份、硫酸镁0.1份、琼脂20份、甘薯淀粉30份,调节培养基的ph值为7.0~7.5,将培养基在121℃下灭菌25min。

进一步的,所述表面活性剂为天然表面活性物质,选自:糖脂、脂肽、中性类脂衍生物中的至少一种。

采用本发明的技术方案的有益效果是:本发明的微生物制剂能够有效地降解作物表面和土壤中残留的有机磷农药,高效、彻底、无二次污染,促进农产品质量的提高,改善农田环境质量,而且生产成本低。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂,所述微生物制剂由降解菌和表面活性剂按1:2的体积比配制而成,所述降解菌为蜡样芽孢杆菌,所述表面活性剂为天然表面活性物质糖脂。

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂的方法,包括以下步骤:

(1)培养基配置:硫酸铵1份、磷酸氢二钾1份、硫酸镁0.08份、琼脂20份、甘薯淀粉30份,调节培养基的ph值为7.0,将培养基在121℃下灭菌20min;

(2)液体种子制备:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照10%的接种量接种降解菌,控制温度为25℃,通空气培养24h,得到活菌体培养物;

(3)液态发酵:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照10%的接种量接种步骤(2)中的液体种子,控制温度为25℃,通气培养24h,得到活菌体培养物;

(4)微生物制剂的制备:培养好的发酵液和表面活性剂按体积比1:2混合。

选取两个完全相同的油菜地块,各30m2,均匀喷洒1000倍稀释的80%敌敌畏乳油农药。6h后,均匀喷施用清水稀释600倍的有机磷农药降解微生物制剂,以喷施清水作对照。24h后,五点取样法检测油菜叶面敌敌畏残留,发现处理组较对照组敌敌畏残留量减少60%左右。

实施例2

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂,所述微生物制剂由降解菌和表面活性剂按1:1的体积比配制而成,所述降解菌为:蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌,所述表面活性剂为天然表面活性物质为:糖脂和脂肽。

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂的方法,包括以下步骤:

(1)培养基配置:硫酸铵3份、磷酸氢二钾3份、硫酸镁0.1份、琼脂20份、甘薯淀粉30份,调节培养基的ph值为7.5,将培养基在121℃下灭菌25min;

(2)液体种子制备:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照12%的接种量接种降解菌,控制温度为30℃,通空气培养40h,得到活菌体培养物;

(3)液态发酵:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照12%的接种量接种步骤(2)中的液体种子,控制温度为30℃,通气培养40h,得到活菌体培养物;

(4)微生物制剂的制备:培养好的发酵液和表面活性剂按体积比1:1混合。

选取两个完全相同的油菜地块,各30m2,均匀喷洒1000倍稀释的80%敌敌畏乳油农药。6h后,均匀喷施用清水稀释600倍的有机磷农药降解微生物制剂,以喷施清水作对照。24h后,五点取样法检测油菜叶面敌敌畏残留,发现处理组较对照组敌敌畏残留量减少80%左右。

本实施例为最佳实施方式。

实施例3

一种用于降解有机磷农药的微生物制剂,所述微生物制剂由降解菌和表面活性剂按3:1的体积比配制而成,所述降解菌为:蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、曲霉菌、头状葡萄球菌,所述表面活性剂为天然表面活性物质,包括:糖脂、脂肽和中性类脂衍生物。

(1)培养基配置:硫酸铵2份、磷酸氢二钾2份、硫酸镁0.12份、琼脂20份、甘薯淀粉30份,调节培养基的ph值为7.2,将培养基在121℃下灭菌30min;

(2)液体种子制备:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照15%的接种量接种降解菌,控制温度为37℃,通空气培养60h,得到活菌体培养物;

(3)液态发酵:向装有高温灭菌的液体培养基的发酵罐中,按照15%的接种量接种步骤(2)中的液体种子,控制温度为37℃,通气培养60h,得到活菌体培养物;

(4)微生物制剂的制备:培养好的发酵液和表面活性剂按体积比3:1混合。

选取两个完全相同的油菜地块,各30m2,均匀喷洒1000倍稀释的80%敌敌畏乳油农药。6h后,均匀喷施用清水稀释600倍的有机磷农药降解微生物制剂,以喷施清水作对照。24h后,五点取样法检测油菜叶面敌敌畏残留,发现处理组较对照组敌敌畏残留量减少70%左右。

尽管上述实施例已对本发明的技术方案进行了详细地描述,但是本发明的技术方案并不限于以上实施例,在不脱离本发明的思想和宗旨的情况下,对本发明的技术方案所做的任何改动都将落入本发明的权利要求书所限定的范围。

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