本发明涉及药物领域，涉及三肽大环衍生物及其制备方法和应用，涉及作为蛋白酶体抑制剂的三肽大环衍生物、含其的盐类和以该化合物或其盐类为活性成分制备的药物在抗肿瘤中的应用。
背景技术：
随着人口数量的不断增加和人口的老龄化趋势，加之包括吸烟在内的各种不健康生活方式的广泛存在及环境的污染，恶性肿瘤正严重威胁着人类的生命，在我国恶性肿瘤已成为第一大致死疾病，其防治已成为我国乃至世界各国医药界的重要研究课题。传统的癌症治疗方法主要有手术治疗、放射治疗和药物化疗等，其中以药物化疗最为重要。近年来，随着肿瘤分子靶标被逐渐阐释，不少靶向抗肿瘤药物己进入临床应用。虽然这些靶向药物在临床上已经取得了不错的进展，但病人在用药时仍然存在一定程度的毒副作用，易产生耐药等问题，使其临床治疗受到较大的限制。
蛋白酶体作为泛素‐蛋白酶体蛋白质降解通路的重要组成部分，广泛分布于真核细胞中的多亚基巨型蛋白质复合物，具有多种催化功能，控制着细胞内80％-90％蛋白质的降解，通过降解细胞内错误折叠或者受到损伤的蛋白质来维持细胞稳态，进而调控细胞周期、细胞凋亡、细胞信号转导、DNA修复、细胞生长、发育等多种生理功能。因而，蛋白酶体功能的抑制可导致与多条信号通路相关蛋白水平的失调，从而引起细胞周期阻滞和细胞凋亡。这些关键的调节蛋白包括核因子NF-κB、抑癌蛋白P53及细胞周期相关蛋白cyclin和CDK等。因此，蛋白酶体与肿瘤的发生发展密切相关，蛋白酶体抑制剂可以通过抑制蛋白酶体活性引起细胞凋亡而达到治疗肿瘤的目的。
自蛋白酶体发现至今，多种结构类型的小分子化合物被发现具有抑制蛋白酶体活性，尤其在血液瘤中显示出了良好的抗肿瘤效果。目前，临床上应用的小分子蛋白酶体抑制剂为硼酸肽类化合物Bortezomib，Ixazomib和环氧酮肽类化合物Carfilzomib。
技术实现要素：
本发明的目的是提供了一种三肽大环衍生物，其具有式(I)结构：
及其光学异构体或其药学上可接受的盐或溶剂合物；
其中：
R1、R2各自独立选自H、-C1-10烷基-D、C1-10羟基烷基、-C2-10不饱和烷基-D、-卤代的C1-10烷基-D、-C1-3烷基-S-C1-5烷基、C1-10烷氧基烷基、卤代的C1-10烷氧基烷基、C3-10不饱和烷氧基、C3-10环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基。其中，D为N(Ra)Rb或缺失；Ra选自H、OH、C1-6烷基、卤代的C1-6烷基；Rb选自N末端保护基；
R3、R4各自独立选自H、C1-10烷基、卤代的C1-10烷基、芳基、芳烷基；
R5选自H、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、卤代的C1-6烷基、C1-6烷氧基烷基、卤代的C1-6烷氧基烷基；
R6选自H、C1-10烷基、C1-10烷氧基烷基、C2-10不饱和烷基、环烷基；
X为O、S、NH、N-C1-6烷基；
Y为或者缺失，其中R选自H、C1-10烷基、卤代的C1-10烷基；
Ar选自无取代或取代的环烷基、无取代或取代的杂环烷基、无取代或取代的环烯基、无取代或取代的杂环烯基、无取代或取代的芳基、无取代或取代的芳烷基、无取代或取代的杂芳基、无取代或取代的杂芳烷基、任意稠合的芳基；
L为
其中B1选自
D1、D2相同或不同，分别独立选自为-C1-8烷基-、-OC1-8烷基-、-C1-8烷基O-、-C1-8烷基OC1-8烷基-、-SC1-8烷基-、-C1-8烷基S-、-C1-8烷基SC1-8烷基-、-N(Rd)-、-N(Rd)C1-8烷基-、-C1-8烷基N(Rd)-、-C1-8烷基N(Rd)C1-8烷基-、-N(Rd)C(O)-、-N(Rd)C(O)C1-8烷基-、-C1-8烷基N(Rd)C(O)-、-C1-8烷基N(Rd)C(O)C1-8烷基-、-C(O)N(Rd)-、-C(O)N(Rd)C1-8烷基-、-C1-8烷基C(O)N(Rd)-、-C1-8烷基C(O)N(Rd)C1-8烷基-、-C(O)C1-8烷基-、-C(O)C1-8不饱和烷基-、-N(Rd)SO2-、-N(Rd)SO2C1-8烷基-、-C1-8烷基N(Rd)SO2-、-C1-8烷基N(Rd)SO2C1-8烷基-、-OC(O)C1-8烷基-、-C1-8烷基OC(O)-、-C1-8烷基OC(O)C1-8烷基-、-C(O)OC1-8烷基-、-C1-8烷基C(O)O-、-C1-8烷基C(O)OC1-8烷基-；Rd选自H、C1-4烷基、卤代的C1-4烷基、环烷基、杂环烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基。
所述取代的取代基任选自卤素、硝基、氨基、氰基、羟基、C1-6烷基、卤代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基烷基、C1-6烷胺基、卤代的C1-6烷氧基、卤代的C1-6烷氧基烷基、卤代的C1-6烷胺基、C3-8环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基。
优选地，本发明提供了具有式(Ⅱ)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂化合物，其中：
Y优选
环A优选为以下结构：
其中，V1、V2、V3、V4、W1、W2和W3各自独立选自N、C；
Re选自H、卤素、硝基、氨基、氰基、羟基、C1-6烷基、卤代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷胺基、卤代的C1-6烷氧基、卤代的C1-6烷胺基、C3-8环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基；
Z选自O、S、-N(Rf)-；其中，Rf存在或缺失，选自H、C1-6烷基、卤代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基烷基、卤代的C1-6烷氧基、C3-8环烷基、杂环烷基、C3-8环烯基、杂环烯基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基；
L、R1、R2、R3、R4和R5如通式(Ⅰ)结构所定义。
更具体地，本发明提供了下列具有式(Ⅲ)结构的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化合物：
其中：
V1、V2、V3、V4和Rg如通式(Ⅱ)结构所定义；
B1、D1、D2、R1和R2如通式(Ⅰ)结构所定义。
更进一步地，本发明优选的化合物具有通式(Ⅳ)结构：
及其光学异构体或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中：
V1和V4各自独立优选为C、N；
B1优选为
D1和D2相同或不同，分别独立优选为-C1-8烷基-、-OC1-8烷基-、-C1-8烷基O-、-C1-8烷基OC1-8烷基；
R1优选为甲氧基-甲基；
R2优选为苄基、异丁基；
Rg优选自H、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基。
其中，若不作特别说明，所涉及氨基酸均为L-型氨基酸。
更具体地，本发明通式(IⅤ)结构的优选化合物为：
N-[(S)-11-氧代-2,7-二氧杂-10-氮杂双环[10,4,0]十六碳-1(16),12,14-三烯-9-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮
N-[(S)-12-氧代-2,8-二氧杂-11-氮杂双环[11,4,0]十七碳-1(17),13,15-三烯-10-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮
N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮
N-[(S)-14-氧代-2,10-二氧杂-13-氮杂二环[13,4,0]十九碳-1(19),15,17-三烯-12-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Leu-环氧酮
N-[(S)-15-氧代-2,11-二氧杂-14-氮杂双环[14,4,0]二十烷-1(20),16,18-三烯-13-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮
N-[(S)-16-氧代-2,12-二氧杂-15-氮杂二环[15,4,0]二十一烷-1(21),17,19-三烯-14-甲酰
基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮
N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Leu-环氧酮
及其上述化合物的光学异构体或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本发明的第二个目的是提供上述大环肽类衍生物的制备方法，通过以下步骤实现：
(1)化合物2与羧基保护的氨基酸在缩合试剂作用下反应得化合物6，选用的缩合试剂有二环己基碳二亚胺/4-二甲氨基吡啶、二环己基碳二亚胺/1-羟基苯并三氮唑、N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐/1-羟基苯并三氮唑。反应温度0-30℃，反应时间2-5小时，粗产品可直接用于下步反应；
(2)化合物6在金属催化剂或者缩合剂的作用下环合并脱除羧基保护基得到化合物7，选用的金属催化剂为Grubbs第二代催化剂，缩合剂与(1)中相同，金属催化反应温度30-100℃，反应时间0.5-3小时，缩合反应温度0-30℃，反应时间2-8小时，所得产品用于下步；
(3)氨基保护的氨基酸与化合物11在缩合试剂作用下反应得化合物8，选用的缩合试剂有二环己基碳二亚胺/4-二甲氨基吡啶、二环己基碳二亚胺/1-羟基苯并三氮唑、N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐/1-羟基苯并三氮唑,苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/1-羟基苯并三氮唑。反应温度0-30℃，反应时间2-8小时，粗产品可直接用于下步反应；
(4)化合物8在三氟乙酸的作用下脱除Boc保护基，粗产品直接用于下步反应；
(5)化合物7与化合物9在缩合试剂作用下反应得产物10，选用缩合试剂同步骤(1)，所得粗产品经柱层析分离得纯品。
反应式：
其中：
R1-R4、B1、D1、D2取代基的定义与通式(I)相同；
环A取代基的定义与通式(Ⅱ)相同。
其中所用原料化合物11的合成参见文献J.Med.Chem.2009,52,3028。
本发明的第三个目的是提供所述大环肽类衍生物在制备治疗恶性肿瘤的药物中的应用。所述的肿瘤选自骨髓瘤、淋巴瘤、白血病等血液肿瘤，以及乳腺癌、肉瘤、肺癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、胰腺癌、成神经细胞瘤、神经胶质瘤、头癌、颈癌、甲状腺癌、肝癌、卵巢癌、外阴癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、膀胱癌、食管癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、胃肠道间质瘤、皮肤癌。
所述药物由大环肽类衍生物与药物载体制成。
本发明的药物剂型包括注射剂、冻干粉针剂、片剂、胶囊和颗粒剂等。给药途径选为注射给药、口服给药、吸入或植入给药等。
实验证明，本发明的具有全新骨架的具有较好的蛋白酶体抑制活性，对RPMI 8226、MM.1S等多发性骨髓瘤有很好的增值抑制作用。本发明化合物的合成所需原料易得，路线设计合理，反应条件温和，操作简便，适合工业化生产。
具体实施方式
本发明结合实施例作进一步的说明，以下实施例仅是说明本发明，而不是以任何方式限制本发明。
制备实施例1、2-(烯丙氧基)苯甲酸甲酯(1a)
将水杨酸甲酯(4.2ml,33mmol)，碳酸钾(13.8g,99mmol)和3-溴丙烯(4.0ml,46mmol)置于100mL三颈瓶中，加入50mL丙酮，该反应液在回流条件下反应18小时。TLC监测反应结束后，将反应液冷却至室温，减压除去溶剂，加入100ml乙酸乙酯，依次用水(2×100ml)，饱和食盐水(2×100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后减压除去溶剂，柱层析分离得无色油状液体5.9g，收率93％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.80(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.0,7.5,2.0Hz,1H),7.01–6.94(m,2H),6.11–6.02(m,1H),5.54–5.48(m,1H),5.32–5.27(m,1H),4.63(dt,J＝5.0,1.5Hz,2H),3.90(s,3H)ppm；ESI-MS:m/z＝193[M+H]+.
制备实施例2、2-(3-丁烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯(1b)
以4-溴-1-丁烯为原料，合成及后处理同制备实施例1，得无色油状液体4.0g，收率88％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.77(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.47–7.38(m,1H),7.00–6.91(m,2H),6.00–5.88(m,1H),5.22–5.07(m,2H),4.08(t,J＝6.5Hz,2H),3.88(s,3H),2.62–2.54(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝207[M+H]+.
制备实施例3、2-(4-戊烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯(1c)
以5-溴-1-戊烯为原料，合成及后处理同制备实施例1，得无色油状液体5.8g，收率80％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.78(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.0,7.5,1.5Hz,1H),6.99–6.94(m,2H),5.92–5.80(m,1H),5.09–5.04(m,1H),5.02–4.98(m,1H),4.05(t,J＝6.5Hz,2H),3.89(s,3H),2.34–2.25(m,2H),1.98–1.88(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝221[M+H]+.
制备实施例4、2-(5-己烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯(1d)
以6-溴-1-己烯为原料，合成及后处理同制备实施例1，得无色油状液体6.3g，收率81％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.47–7.41(m,1H),6.99–6.93(m,2H),5.88–5.78(m,1H),5.08–4.94(m,2H),4.04(t,J＝6.5Hz,2H),3.88(s,3H),2.17–2.10(m,2H),1.90–1.81(m,2H),1.65–1.57(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝235[M+H]+.
制备实施例5、2-(6-庚烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯(1e)
以7-溴-1-庚烯为原料，合成及后处理同制备实施例1，得无色油状液体6.1g，收率75％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.46–7.41(m,1H),6.98–6.93(m,2H),5.89–5.76(m,1H),5.04–4.90(m,2H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.89(s,3H),2.13–2.06(m,2H),1.89–1.80(m,2H),1.56–1.42(m,4H)ppm；ESI-MS:m/z＝249[M+H]+.
制备实施例6、2-(7-辛烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯(1f)
以8-溴-1-辛烯为原料，合成及后处理同制备实施例1，得无色油状液体6.1g，收率70％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.46–7.40(m,1H),6.99–6.92(m,2H),5.87–5.75(m,1H),5.05–4.90(m,2H),4.03(t,J＝6.5Hz,2H),3.89(s,3H),2.10–2.01(m,2H),1.88–1.79(m,2H),1.55–1.46(m,2H),1.46–1.34(m,4H)ppm；ESI-MS:m/z＝263[M+H]+.
制备实施例7、2-(烯丙氧基)苯甲酸(2a)
原料2-(烯丙氧基)苯甲酸甲酯(6.0g，31mmol)溶于20mL甲醇和20ml THF中，逐滴加入3N KOH水溶液50mL，加热至50℃反应3小时。反应液减压蒸除甲醇和THF，水层用3N HCl调pH至2-3，乙酸乙酯提取(50mL×3)，合并有机层，无水硫酸钠干燥后减压蒸除溶剂。所得产物直接用于下步反应。
制备实施例8、2-(3-丁烯-1-基氧基)苯甲酸(2b)
以2-(丁-3-烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯为原料，合成及后处理同制备实施例7，所得产物直接用于下步反应。
制备实施例9、2-(4-戊烯-1-基氧基)苯甲酸(2c)
以2-(戊-4-烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯为原料，合成及后处理同制备实施例7，所得产物直接用于下步反应。
制备实施例10、2-(5-己烯-1-基氧基)苯甲酸(2d)
以2-(己-5-烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯为原料，合成及后处理同制备实施例7，所得产物直接用于下步反应。
制备实施例11、2-(6-庚烯-1-基氧基)苯甲酸(2e)
以2-(庚-6-烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯为原料，合成及后处理同制备实施例7，所得产物直接用于下步反应。
制备实施例12、2-(7-辛烯-1-基氧基)苯甲酸(2f)
以2-(辛-7-烯-1-基氧基)苯甲酸甲酯为原料，合成及后处理同制备实施例7，所得产物直接用于下步反应。
制备实施例13、Boc-Ser-OBn(3a)
Boc-L-丝氨酸(4.0g，19.5mmol)溶于500ml DMF中，加入碳酸钾(3.2g，23mmol)，冰浴冷却至0℃，溴化苄(2.8ml，23mmol)溶于100ml DMF后缓缓滴入上述反应液，室温反应10小时。往反应液中加入乙酸乙酯100ml和水100ml，分出有机层，再依次用饱和碳酸氢钠水溶液100ml，饱和食盐水100ml洗涤，无水硫酸钠干燥后减压蒸除溶剂，通过柱层析分离得白色固体5.2g，收率90％。m.p.:69-71℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.40–7.31(m,5H),5.45(s,1H),5.28–5.16(m,2H),4.48–4.38(m,1H),3.99(dd,J＝11.0,3.5Hz,1H),3.92(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),1.94(br s,1H),1.45(s,9H)ppm；ESI-MS:m/z＝296[M+H]+.
制备实施例14、O-烯丙基-Boc-Ser-苄酯(4a)
反应物3a(2.7g，9.1mmol)和四三苯基膦钯(0.53g，0.46mmol)溶于40mL THF，N2保护下缓缓注入烯丙基甲基碳酸酯(1.5ml，12.7mmol)，加热回流5小时。反应液减压蒸除溶剂，加入乙酸乙酯50ml和饱和碳酸氢钠水溶液(50ml x 1)，有机层再用饱和食盐水(30ml x 1)洗涤，无水硫酸钠干燥后减压蒸除溶剂，通过柱层析分离得淡黄色油状液体1.9g，收率62％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.41–7.30(m,5H),5.86–5.68(m,1H),5.41(d,J＝8.5Hz,1H),5.32–5.17(m,2H),5.17–5.10(m,2H),4.51–4.42(m,1H),3.99–3.84(m,3H),3.65(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),1.45(s,9H)ppm；ESI-MS:m/z＝336[M+H]+.
制备实施例15、O-烯丙基-Ser-OBn盐酸盐(5a)
反应物4a(3.4g，10mmol)溶于15mL CH2Cl2，冰浴冷却至0℃，加入2N HCl饱和的乙酸乙酯溶液(20mL)，室温反应2小时。反应液减压蒸除溶剂得淡黄色固体，所得产品直接用于下步反应。
制备实施例16、N-(2-(烯丙氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6a)
原料2-(烯丙氧基)苯甲酸(2a，0.18g，1.0mmol)置于10ml反应瓶中，加入4mL无水CH2Cl2溶解，随即加入1-羟基苯并三氮唑(0.16g，1.2mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.35g，1.8mmol)，室温反应半小时。随后，冷却至0℃，加入O-烯丙基-Ser-OBn盐酸盐(5a，0.33g，1.2mmol)和DIPEA(0.50ml，3.0mmol)，室温反应3小时。反应液加入5mL饱和碳酸氢钠水溶液稀释，分出有机层，饱和食盐水洗(5mL x 2)，无水硫酸钠干燥后减压除去溶剂，柱层析分离得无色油状液体0.28g，收率71％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.87(d,J＝8.0Hz,1H),8.21(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.46–7.41(m,1H),7.39–7.29(m,5H),7.10–7.05(m,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),6.16–6.06(m,1H),5.86–5.73(m,1H),5.46–5.40(m,1H),5.32–5.18(m,4H),5.16–5.11(m,1H),5.05(dt,J＝8.0,3.5Hz,1H),4.68(d,J＝5.5Hz,2H),4.03–3.90(m,3H),3.79(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H)ppm；ESI-MS:m/z＝396[M+H]+.
制备实施例17、N-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6b)
以2-(3-丁烯-1-基氧基)苯甲酸为原料，合成及后处理同制备实施例16，得无色油状液体0.34g，收率83％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.89(d,J＝7.5Hz,1H),8.22(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.48–7.40(m,1H),7.39–7.29(m,5H),7.11–7.03(m,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),5.99–5.85(m,1H),5.84–5.72(m,1H),5.33–5.01(m,7H),4.16(t,J＝7.0Hz,2H),4.02–3.90(m,3H),3.79(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),2.70–2.60(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝410[M+H]+.
制备实施例18、N-(2-(戊-4-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6c)
以2-(4-戊烯-1-基氧基)苯甲酸为原料，合成及后处理同制备实施例16，得无色油状液体0.33g，收率78％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.95(d,J＝8.0Hz,1H),8.22(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.46–7.40(m,1H),7.38–7.29(m,5H),7.10–7.03(m,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),5.88–5.72(m,2H),5.33–5.26(m,1H),5.23–5.16(m,2H),5.15–5.10(m,1H),5.09–5.03(m,2H),5.02–4.98(m,1H),4.15–4.09(m,2H),4.02–3.88(m,3H),3.79(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),2.30–2.22(m,2H),2.03–1.95(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝424[M+H]+.
制备实施例19、N-(2-(己-5-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6d)
以2-(5-己烯-1-基氧基)苯甲酸为原料，合成及后处理同制备实施例16，得无色油状液体0.39g，收率89％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.97(d,J＝8.0Hz,1H),8.22(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.0,7.5,2.0Hz,1H),7.39–7.29(m,5H),7.09–7.02(m,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),5.86–5.71(m,2H),5.33–5.28(m,1H),5.23–5.16(m,2H),5.15–5.10(m,1H),5.07(dt,J＝8.0,3.0Hz,1H),5.05–4.99(m,1H),4.98–4.94(m,1H),4.12(t,J＝6.5Hz,2H),4.01–3.96(m,2H),3.95–3.89(m,1H),3.78(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),2.14–2.08(m,2H),1.96–1.88(m,2H),1.63–1.56(m,2H)ppm；ESI-MS:m/z＝438[M+H]+.
制备实施例20、N-(2-(6-庚烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6e)
以2-(6-庚烯-1-基氧基)苯甲酸为原料，合成及后处理同制备实施例16，得无色油状液体0.40g，收率89％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.98(d,J＝8.0Hz,1H),8.22(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.0,7.5,2.0Hz,1H),7.38–7.28(m,5H),7.09–7.02(m,1H),7.00–6.92(m,1H),5.87–5.71(m,2H),5.31–5.29(m,1H),5.23–5.17(m,2H),5.15–5.11(m,1H),5.07(dt,J＝8.0,3.0Hz,1H),5.03–4.98(m,1H),4.97–4.93(m,1H),4.14–4.08(m,2H),4.01–3.96(m,2H),3.95–3.90(m,1H),3.78(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),2.10–2.05(m,2H),1.96–1.86(m,2H),1.54–1.41(m,4H)ppm；ESI-MS:m/z＝452[M+H]+.
制备实施例21、N-(2-(7-辛烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(6f)
以2-(7-辛烯-1-基氧基)苯甲酸为原料，合成及后处理同制备实施例16，得无色油状液体0.42g，收率90％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.98(d,J＝7.5Hz,1H),8.22(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.5,7.5,2.0Hz,1H),7.39–7.29(m,5H),7.09–7.02(m,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),5.87–5.71(m,2H),5.31–5.30(m,1H),5.23–5.17(m,2H),5.15–5.10(m,1H),5.07(dt,J＝8.0,3.0Hz,1H),5.03–4.97(m,1H),4.96–4.91(m,1H),4.11(t,J＝6.5Hz,2H),4.02–3.96(m,2H),3.95–3.89(m,1H),3.78(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),2.08–2.02(m,2H),1.96–1.85(m,2H),1.53–1.45(m,2H),1.44–1.32(m,4H)ppm；ESI-MS:m/z＝466[M+H]+.
制备实施例22、(S)-11-氧代-2,7-二氧杂-10-氮杂双环[10,4,0]十六碳-1(16),12,14-三烯-9-羧酸(7a)
原料N-(2-(烯丙氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯(5a，0.079g，0.20mmol)置于250ml两颈瓶中，加入60mL甲苯溶解，在N2保护下加热至100℃。随后将Grubbs第二代催化剂溶于7ml甲苯中并缓慢注入反应体系，在该温度下反应1小时。减压除去溶剂，柱层析分离得灰色油状液体52mg(含阻转异构体)，收率71％，所得产品直接用于下步反应。
将上述原料溶于3ml甲醇中，加入10％Pd/C(6mg)，H2保护下于室温中反应3h，用硅藻土过滤去除催化剂，减压蒸除溶剂得灰白色泡沫状固体37mg，收率94％。ESI-MS:m/z＝280[M+H]+.
制备实施例23、N-[(S)-12-氧代-2,8-二氧杂-11-氮杂双环[11,4,0]十七碳-1(17),13,15-三烯-10-羧酸(7b)
以N-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯为原料，合成及后处理同制备实施例22，得白色泡沫状固体42mg，两步收率72％。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.89(d,J＝7.5Hz,1H),7.98(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.51(ddd,J＝8.0,7.0,2.0Hz,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.09–7.02(m,1H),4.52–4.41(m,1H),4.18–4.08(m,2H),4.05(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.70–3.64(m,1H),3.59(dd,J＝9.5,3.8Hz,1H),3.44(td,J＝9.7,3.4Hz,1H),1.89–1.74(m,3H),1.73–1.64(m,1H),1.63–1.55(m,1H),1.54–1.45(m,1H)ppm；ESI-MS:m/z＝294[M+H]+.
制备实施例24、N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-羧酸(7c)
以N-(2-(戊-4-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯为原料，合成及后处理同制备实施例22，得白色泡沫状固体49mg，两步收率80％。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.84(d,J＝8.5Hz,1H),8.01(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.51(ddd,J＝8.5,7.5,2.0Hz,1H),7.16(d,J＝8.0Hz,1H),7.11–7.02(m,1H),4.61–4.54(m,1H),4.28–4.19(m,1H),4.13(td,J＝9.0,1.5Hz,1H),3.89(dd,J＝9.5,2.0Hz,1H),3.70–3.59(m,2H),3.37–3.28(m,1H),1.96–1.84(m,1H),1.82–1.73(m,1H),1.73–1.64(m,1H),1.64–1.45(m,5H)ppm；ESI-MS:m/z＝308[M+H]+.
制备实施例25、N-[(S)-14-氧代-2,10-二氧杂-13-氮杂二环[13,4,0]十九碳-1(19),15,17-三烯-12-羧酸(7d)
以N-(2-(己-5-烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯为原料，合成及后处理同制备实施例22，得白色泡沫状固体53mg，两步收率82％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.97(d,J＝7.5Hz,1H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.48–7.39(m,1H),7.08–7.01(m,1H),6.95(d,J＝8.0Hz,1H),5.05–4.96(m,1H),4.27–4.18(m,1H),4.11(t,J＝8.5Hz,1H),4.00(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.82–3.73(m,1H),3.64–3.55(m,1H),3.53–3.45(m,1H),1.98–1.75(m,3H),1.69–1.31(m,7H)ppm；ESI-MS:m/z＝322[M+H]+.
制备实施例26、N-[(S)-15-氧代-2,11-二氧杂-14-氮杂双环[14,4,0]二十烷-1(20),16,18-三烯-13-羧酸(7e)
以N-(2-(6-庚烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯为原料，合成及后处理同制备实施例22，得白色泡沫状固体51mg，两步收率76％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.96(d,J＝8.0Hz,1H),8.24(d,J＝6.5Hz,1H),7.48–7.40(m,1H),7.10–7.02(m,1H),6.99(d,J＝8.5Hz,1H),5.11–5.03(m,1H),4.27–4.07(m,2H),3.96(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.90–3.83(m,1H),3.58–3.49(m,1H),3.48–3.41(m,1H),2.05–1.89(m,1H),1.85–1.66(m,2H),1.62–1.21(m,9H)ppm；ESI-MS:m/z＝336[M+H]+.
制备实施例27、N-[(S)-16-氧代-2,12-二氧杂-15-氮杂二环[15,4,0]二十一烷-1(21),17,19-三烯-14-羧酸(7f)
以N-(2-(7-辛烯-1-基氧基)苯甲酰基)-O-烯丙基-L-丝氨酸苄酯为原料，合成及后处理同制备实施例22，得白色泡沫状固体52mg，两步收率74％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.08(d,J＝7.5Hz,1H),8.25(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.50–7.41(m,1H),7.12–7.03(m,1H),6.98(d,J＝8.5Hz,1H),5.14–5.05(m,1H),4.28–4.10(m,2H),3.96(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.90(dd,J＝9.5,2.0Hz,1H),3.58–3.51(m,1H),3.47–3.40(m,1H),2.11–1.99(m,1H),1.87–1.76(m,1H),1.75–1.66(m,1H),1.62–1.30(m,11H)ppm；ESI-MS:m/z＝350[M+H]+.
制备实施例28、N-(Boc-O-甲基-丝氨酰基)-L-Leu-环氧酮(8a)
原料Boc-O-甲基-丝氨酸(0.44g，2.0mmol)溶于8ml无水THF，加入1-羟基苯并三氮唑(0.32g，2.4mmol)，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.91g，2.4mmol)和Leu-环氧酮三氟乙酸盐(0.68g，2.4mmol)，冰浴下冷却至0℃。随后，加入DIPEA(0.66mL，4.0mmol)，室温反应3小时。减压除去溶剂，加入15mL乙酸乙酯和12ml水，分出有机层，依次用饱和碳酸氢钠溶液(12mL x 2)和饱和食盐水(12mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，柱层析分离得无色油状液体0.50g，收率67％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.90(d,J＝3.5Hz,1H),5.34(d,J＝3.0Hz,1H),4.66–4.58(m,1H),4.27–4.15(m,1H),3.76(dd,J＝9.0,3.5Hz,1H),3.46–3.36(m,4H),3.28(d,J＝5.0Hz,1H),2.88(d,J＝5.0Hz,1H),1.71–1.59(m,1H),1.58–1.49(m,4H),1.45(s,9H),1.32–1.23(m,1H),0.98–0.89(m,6H)ppm；ESI-MS:m/z＝373[M+H]+.
制备实施例29、N-(Boc-O-甲基-丝氨酰基)-L-Phe-环氧酮(8b)
以Phe-环氧酮三氟乙酸盐为原料，合成及后处理同制备实施例28，得无色油状液体0.49mg，两步收率60％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.32–7.27(m,2H),7.26–7.22(m,1H),7.16–7.11(m,2H),7.02(d,J＝6.0Hz,1H),5.27(d,J＝3.0Hz,1H),4.83(td,J＝7.5,5.0Hz,1H),4.21–4.09(m,1H),3.72(d,J＝6.5Hz,1H),3.38(dd,J＝9.0,7.0Hz,1H),3.35–3.25(m,4H),3.13(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),2.90(d,J＝4.9Hz,1H),2.86(dd,J＝14.0,7.3Hz,1H),1.50(s,3H),1.43(s,9H)ppm；ESI-MS:m/z＝407[M+H]+.
制备实施例30、O-甲基-丝氨酰基-L-Leu-环氧酮三氟乙酸盐(9a)
反应物Boc-Leu-环氧酮(0.50g，1.3mmol)溶于2.6mL CH2Cl2，冰浴冷却至0℃，加入1.3mL三氟乙酸，该温度下反应5小时。反应液减压除去溶剂得淡黄色油状液体，所得产品直接用于下步反应
制备实施例31、O-甲基-丝氨酰基-L-Phe-环氧酮三氟乙酸盐(9b)
以8b为原料，合成及后处理同制备实例30，所得产品直接用于下步反应。
制备实施例32、N-[(S)-11-氧代-2,7-二氧杂-10-氮杂双环[10,4,0]十六碳-1(16),12,14-三烯-9-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮(10a)
原料(S)-11-氧代-2,7-二氧杂-10-氮杂双环[10,4,0]十六碳-1(16),12,14-三烯-9-羧酸(7a，28mg，0.10mmol)溶于2mL无水THF，加入1-羟基苯并三氮唑(18mg，0.13mmol)，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(49mg，0.13mmol)和Phe-环氧酮三氟乙酸盐(55mg，0.13mmol)，冰浴下冷却至0℃。随后，加入DIPEA(0.043mL，0.26mmol)，室温反应3小时。减压除去溶剂，加入5mL乙酸乙酯和4ml水，分出有机层，依次用饱和碳酸氢钠溶液(3mL x 2)和饱和食盐水(3mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，柱层析分离得白色固体33mg，收率58％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.86(d,J＝6.5Hz,1H),8.76(d,J＝6.5Hz,1H),8.21(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),8.13(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.50–7.43(m,1H),7.41–7.36(m,1H),7.33–7.23(m,2H),7.22–6.98(m,14H),6.95(d,J＝7.0Hz,1H),6.89(d,J＝8.5Hz,1H),4.87–4.68(m,4H),4.51–4.39(m,2H),4.25–4.16(m,2H),4.02–3.94(m,2H),3.79(dd,J＝10.2,3.5Hz,1H),3.74–3.68(m,2H),3.65(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),3.62–3.53(m,2H),3.50–3.40(m,2H),3.39–3.21(m,6H),3.19–3.05(m,8H),2.87–2.82(m,2H),2.80(s,2H),2.18–2.08(m,2H),2.00–1.91(m,2H),1.86–1.70(m,2H),1.67–1.55(m,2H),1.49–1.42(m,6H)ppm；ESI-MS:m/z＝568[M+H]+.
制备实施例33、N-[(S)-12-氧代-2,8-二氧杂-11-氮杂双环[11,4,0]十七碳-1(17),13,15-三烯-10-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮(10b)
以N-[(S)-12-氧代-2,8-二氧杂-11-氮杂双环[11,4,0]十七碳-1(17),13,15-三烯-10-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体36mg，收率62％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.26(d,J＝5.0Hz,1H),8.20(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.0,7.5,2.0Hz,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.22–7.11(m,5H),7.08–7.01(m,2H),6.95(d,J＝8.2Hz,1H),4.85–4.76(m,1H),4.68–4.63(m,1H),4.50–4.43(m,1H),4.18–4.11(m,3H),3.77–3.68(m,2H),3.64(dd,J＝9.0,4.0Hz,1H),3.51(td,J＝9.5,4.0Hz,1H),3.37(dd,J＝9.5,5.5Hz,1H),3.33(d,J＝5.0Hz,1H),3.14(s,3H),3.11(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),2.88(dd,J＝13.5,8.5Hz,1H),2.84(d,J＝5.0Hz,1H),1.94–1.85(m,3H),1.81–1.75(m,1H),1.74–1.68(m,1H),1.67–1.60(m,1H),1.44(s,3H)ppm；ESI-MS:m/z＝582[M+H]+.
制备实施例34、N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮(10c)
以N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体39mg，收率65％。11H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.00(d,J＝6.5Hz,1H),8.20(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.48(ddd,J＝8.5,7.5,2.0Hz,1H),7.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.15–7.03(m,6H),7.02–6.97(m,2H),4.77(td,J＝8.0,5.0Hz,1H),4.73–4.68(m,1H),4.49–4.43(m,1H),4.23–4.14(m,2H),3.99(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.74–3.68(m,3H),3.44–3.39(m,1H),3.37(dd,J＝9.5,5.5Hz,1H),3.32(d,J＝5.0Hz,1H),3.13(s,3H),3.08(dd,J＝13.5,5.0Hz,1H),2.85–2.78(m,2H),1.91–1.82(m,1H),1.80–1.69(m,2H),1.68–1.58(m,5H),1.45(s,3H)ppm；ESI-MS:m/z＝596[M+H]+.
制备实施例35、N-[(S)-14-氧代-2,10-二氧杂-13-氮杂二环[13,4,0]十九碳-1(19),15,17-三烯-12-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Leu-环氧酮(10d)
以N-[(S)-14-氧代-2,10-二氧杂-13-氮杂二环[13,4,0]十九碳-1(19),15,17-三烯-12-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体36mg，收率59％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.56(d,J＝7.0Hz,1H),8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.48–7.43(m,1H),7.25–7.17(m,2H),7.16–6.95(m,7H),4.80–4.72(m,2H),4.50–4.45(m,1H),4.21–4.12(m,2H),3.99(dd,J＝10.0,2.5Hz,1H),3.75–3.67(m,2H),3.56–3.51(m,1H),3.50–3.44(m,1H),3.36(dd,J＝9.5,5.5Hz,1H),3.31(d,J＝5.5Hz,1H),3.12(s,3H),3.06(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),2.83(d,J＝4.5Hz,1H),2.81–2.77(m,1H),1.76–1.68(m,1H),1.65–1.45(m,9H),1.43(s,3H)ppm；ESI-MS:m/z＝610[M+H]+.
制备实施例36、N-[(S)-15-氧代-2,11-二氧杂-14-氮杂双环[14,4,0]二十烷-1(20),16,18-三烯-13-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮(10e)
以N-[(S)-15-氧代-2,11-二氧杂-14-氮杂双环[14,4,0]二十烷-1(20),16,18-三烯-13-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体35mg，收率56％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.51(d,J＝6.5Hz,1H),8.13(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.49–7.43(m,1H),7.25–7.20(m,1H),7.18–7.10(m,3H),7.10–6.97(m,5H),4.82–4.72(m,2H),4.51–4.44(m,1H),4.25–4.14(m,2H),3.97(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),3.78–3.68(m,2H),3.51–3.45(m,2H),3.36(dd,J＝9.5,5.5Hz,1H),3.33–3.29(m,1H),3.14(s,3H),3.08(dd,J＝13.5,5.0Hz,1H),2.86–2.81(m,2H),2.79(s,1H),1.91–1.77(m,2H),1.61–1.35(m,13H)ppm；ESI-MS:m/z＝624[M+H]+.
制备实施例37、N-[(S)-16-氧代-2,12-二氧杂-15-氮杂二环[15,4,0]二十一烷-1(21),17,19-三烯-14-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Phe-环氧酮(10f)
以N-[(S)-16-氧代-2,12-二氧杂-15-氮杂二环[15,4,0]二十一烷-1(21),17,19-三烯-14-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体35mg，收率55％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.55(d,J＝7.0Hz,1H),8.11(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.48–7.39(m,1H),7.26–7.19(m,2H),7.18–6.95(m,7H),4.83–4.71(m,2H),4.51–4.44(m,1H),4.21–4.10(m,2H),3.94(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),3.54–3.41(m,2H),3.35(dd,J＝9.5,6.0Hz,1H),3.32–3.22(m,2H),3.16(s,3H),3.07(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),2.85–2.76(m,3H),1.97–1.88(m,1H),1.86–1.78(m,1H),1.59–1.29(m,15H)ppm；ESI-MS:m/z＝638[M+H]+.
制备实施例38、N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-甲酰基]-(O-甲基)-Ser-Leu-环氧酮(10g)
以N-[(S)-13-氧代-2,9-二氧杂-12-氮杂二环[12,4,0]十八碳-1(18),14,16-三烯-11-羧酸为原料，合成及后处理同制备实施例32，得白色固体33mg，收率59％。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.01(d,J＝6.0Hz,1H),8.16(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.50–7.43(m,1H),7.08–7.03(m,2H),7.01(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(d,J＝8.0Hz,1H),4.69–4.64(m,1H),4.56–4.46(m,2H),4.21–4.09(m,2H),3.98(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),3.86(dd,J＝9.5,3.0Hz,1H),3.74–3.67(m,2H),3.46–3.37(m,2H),3.31(d,J＝5.0Hz,1H),3.28(s,3H),2.83(d,J＝5.0Hz,1H),2.07–2.00(m,1H),1.91–1.82(m,1H),1.80–1.70(m,2H),1.69–1.65(m,1H),1.64–1.59(m,3H),1.54–1.45(m,4H),1.43–1.37(m,1H),1.31–1.21(m,1H),0.83–0.79(m,6H)ppm；ESI-MS:m/z＝562[M+H]+.
试验实施例1、三肽大环化合物的蛋白酶体抑制活性测试
实验方法：采用荧光底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC检测活性，观察不同化合物对酶的活性抑制，以初步评价化合物的抑制效果。Human proteasome chymotrypsin-like protease水解底物中的Tyr-AMC序列,释放出AMC，在激发光355nm发射光460nm的条件下可以检测到水解后产物AMC的荧光吸收值，以观察化合物对酶活性的抑制情况。结果参见表1。
表1化合物对蛋白酶体CT-L及对多发性骨髓瘤细胞的增值抑制活性
注：NA-没有活性；NT-没有测试
试验实施例2、三肽大环化合物的多发性骨髓瘤细胞增殖抑制活性测试
实验方法：运用MTT法检测细胞存活率，即将生长在对数生长期的细胞，经0.01％的胰酶消化，计数，以2.0×103/well的细胞密度接种在96孔板中100ml，置于5％CO2培养箱内37℃培养过夜。每一化合物设六个浓度梯度，每一浓度设三个复孔，每一浓度分别加入到对应孔中，5％CO2 37℃培养箱内培养72小时，加入20ml的5mg/ml MTT。37℃孵育3小时后，吸弃上清，加入100ml的DMSO溶解，使用SpectraMAX 340测550nm(L1)光吸收值，参考波长690nm(L2)，将(L1-L2)值对抑制剂不同浓度作图，经公式拟合得IC50。结果参见表1。
从表中数据可以看出，大部分化合物对蛋白酶体具有中等到强的抑制活性，有4个化合物的蛋白酶体抑制活性在1μM以下。我们也可以看出大部分化合物对多发性骨髓瘤细胞均显示了中等到强的体外增殖抑制活性。因此，本发明所涉及的可用作蛋白酶体抑制剂的大环环氧酮类衍生物具有广阔的抗肿瘤应用前景。