本发明涉及多肽提取技术领域，具体涉及一种从枇杷果实中提取活性多肽的方法。
背景技术：
多肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫多肽。一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼：由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10,000Da（Dalton，道尔顿），能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽（小分子肽）；10~50个氨基酸组成的肽称为多肽；由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质,换言之,蛋白质有时也被称为多肽。多肽也简称为肽，是20世纪被发现的。
目前，在多肽分离或提取技术领域中，通常对肉类、水果等富含蛋白质的食物进行多肽的分离提取。现有技术中，多肽提取方法多为将肉或者果肉搅碎后进行酶解，此方法虽能保证多肽的提取，却不能充分保证多肽本身的活性，由于多肽本身具有多种对人体有效的营养成分，提取过程中应针对保护多肽活性来进行一系列的活性保护。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种从枇杷果实中提取活性多肽的方法，它的步骤简单，操作方便，具有较高的实用性，能够在保证提取多肽工作效率的同时，保证枇杷果肉中多肽的活性，它提取的多肽具有较高的增强人体免疫力、抗衰老功效。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：一种从枇杷果实中提取活性多肽的方法，它包括以下步骤：第一步，按计量配比，取适量的新鲜枇杷，枇杷去皮，去核后，放置于容器中备用；第二步，按计量配比，取适量的纯净水放置于容器中，加入适量多糖，充分搅拌融合后得到混合液A；第三步，将第二步所述的混合液A与新鲜枇杷果肉混合，放置在容器中得到混合物B；第四步，对第三步所述的混合物B进行预加热，加热一段时间后，加入水解酶，保持原先的温度，在高速搅拌机中搅拌；第五步，将搅拌后的混合物B进行过滤，取酶解液；第六步；对酶解液进行灭酶处理，灭酶后的液体在容器中静置冷却；第七步，取液体上清液进行包装即可完成多肽的提取。
所述的使用容器均为无菌容器，可保证多肽提取过程中避免细菌的干扰，保证多肽的原始活性。
所述的多糖包含蔗糖、葡聚糖，且蔗糖、葡聚糖的使用配比为1:1。
所述的第二步骤中搅拌时间为15-20min。多糖加入纯净水后搅拌15-20min，可使多糖充分溶解于水中，以便于融合后的混合液A与枇杷果肉充分融合，且混合液A中的多糖成分与枇杷本身所含的糖分融合。
所述的预加热过程中，加热温度为32-36℃，可充分保证多肽的活性。
所述的第三步骤中预加热时间为8-10min。对混合物B进行预加热，可使混合液A与果肉中的预先适应加热温度，且避免破坏枇杷果肉内的多肽组成被破坏。
所述的水解酶有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成，且胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的配比为2:1。
所述的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶依次加入，且加入时间间隔为50min。由于胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的配比为2:11，胰蛋白酶加入混合物B内后，需要反应较长的时间，且当胰蛋白酶水解完成后，混合物B需要静置一段时间后方可继续加入木瓜蛋白酶进行蛋白质的水解工作。
所述的过滤过程中，只过滤液体。加入水解酶对枇杷果肉内的蛋白质进行水解后，枇杷果肉在多肽提取的过程中已经不具有可用性，只取酶解后的液体即可。
采用上述技术方案后，本发明有益效果为：它的步骤简单，操作方便，具有较高的实用性，能够在保证提取多肽工作效率的同时，保证枇杷果肉中多肽的活性，它提取的多肽具有较高的增强人体免疫力、抗衰老功效。
具体实施方式
实施例1
本具体实施方式采用的技术方案是：一种从枇杷果实中提取活性多肽的方法，它包括以下步骤：第一步，按计量配比，取适量的新鲜枇杷，枇杷去皮，去核后，放置于无菌的容器中备用；第二步，按计量配比，取适量的纯净水放置于容器中，加入适量多糖，充分搅拌20min后融合得到混合液A；第三步，将第二步所述的混合液A与新鲜枇杷果肉混合，放置在容器中得到混合物B；第四步，对第三步所述的混合物B进行预加热，在35℃的温度下加热8min，加入水解酶，保持原先的温度，在高速搅拌机中搅拌均匀；第五步，将搅拌后的混合物B进行过滤，取酶解液；第六步；对酶解液进行灭酶处理，灭酶后的液体在容器中静置冷却；第七步，取液体上清液进行包装即可完成多肽的提取。
枇杷，别名：芦橘、金丸、芦枝。蔷薇科、枇杷属植物，枇杷原产中国东南部，因叶子形状似琵琶乐器而名，其花可入药。成熟的枇杷味道甜美，营养颇丰，有各种果糖、葡萄糖、钾、磷、铁、钙以及维生素A、B、C等。当中胡萝卜素含量在各水果中为第三位。中医认为枇杷果实有润肺、止咳、止渴的功效。吃枇杷时要剥皮。除了鲜吃外，亦有以枇杷肉制成糖水罐头，或以枇杷酿酒。枇杷不论是叶、果和核都含有扁桃苷。
采用上述技术方案后，本发明有益效果为：它的步骤简单，操作方便，具有较高的实用性，能够在保证提取多肽工作效率的同时，保证枇杷果肉中多肽的活性，它提取的多肽具有较高的增强人体免疫力、抗衰老功效。
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，EC 3.4.4.4，是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后，作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺少的工具。
木瓜蛋白酶（Papain），又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。
实施例2
本实施例与实施例1的不同点在于它包括以下步骤：第一步，按计量配比，取适量的新鲜枇杷，枇杷去皮，去核后，放置于无菌的容器中备用；第二步，按计量配比，取适量的纯净水放置于容器中，加入适量多糖，充分搅拌20min后融合得到混合液A；第三步，将第二步所述的混合液A与新鲜枇杷果肉混合，放置在容器中得到混合物B；第四步，对第三步所述的混合物B进行预加热，在32℃的温度下加热10min，加入水解酶，保持原先的温度，在高速搅拌机中搅拌均匀；第五步，将搅拌后的混合物B进行过滤，取酶解液；第六步；对酶解液进行灭酶处理，灭酶后的液体在容器中静置冷却；第七步，取液体上清液进行包装即可完成多肽的提取。
采用上述技术方案后，本发明有益效果为：它的步骤简单，操作方便，具有较高的实用性，能够在保证提取多肽工作效率的同时，保证枇杷果肉中多肽的活性，它提取的多肽具有较高的增强人体免疫力、抗衰老功效。
以上所述，仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。