本发明涉及邻羟基苯酮的衍生物领域，具体涉及一种取代邻羟基苯酮化合物在制备治疗神经变性疾病药物中的应用。
背景技术：
目前我国人口的老龄化问题日趋严重，《2011年度中国老龄事业发展统计公报》显示，截止2011年末，全国60岁及以上人口数量已达1.85亿，已经进入了老年型社会。其中，老年痴呆症等退行性疾病是老年人的常见病和多发病，65岁以上人群的发病率为8％，75岁以上为20％，到85岁以上则高达40％。
目前治疗老年痴呆的主要上市药物为五个乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase，ache)抑制剂和一个n-甲基-d-天冬氨酸(n-methyl-d-asparticacid，nmda)受体拮抗剂，但均只能延缓轻度或中度ad(阿尔茨海默病)病人的症状，难以遏制或逆转ad的病情发展。
已上市药物的治疗策略主要针对某一靶点，采用“一个药物、一个靶点、一个疾病”的模式，难以达到理想的ad治疗效果，如乙酰胆碱酯酶抑制剂仅能延缓轻、中度ad病人的症状；γ分泌酶抑制剂会对生长、发育相关的notch信号通路产生影响；pparγ不仅与神经保护相关，还在脂肪形成、糖脂代谢，以及免疫系统中发挥重要作用，因此其激动剂容易产生外周副作用；gsk-3抑制剂由于缺乏特异性，会阻断所有gsk-3底物的磷酸化，导致wnt信号通路中β连环蛋白浓度增加，长期使用有引发癌症的危险；金属离子螯合剂大多由于水溶性较高，难以穿透血脑屏障达到治疗部位发挥作用。
研究表明，ad的发病机制十分复杂，所以，使用单一靶点药物不能有效控制或治愈ad。双靶点药物通过对疾病的不同病理生理环节发挥作用，可以增强疗效，减少副作用，为ad的新药研发提供了新的思路。
近年来，双靶点抗ad药物的研发已经取得了一定的成果，已经有多靶点药物进入了临床试验。比如进入ii期临床研究的ladostigil就具有ache和mao双重抑制活性。还有部分化合物也处于临床前研究阶段，如kogen研究小组利用选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(ssri)氟西汀(fluoxetine)和ache抑制剂利伐司替明中共有的甲乙胺结构进行骈合，得到新化合物1对ache和sert都有较高的抑制活性；elsinghorst等人通过含酰肼的连接链将三碘季铵酚与他克林连接，得到化合物2具有拮抗m2受体的能力，并且对ache的抑制活性在纳摩尔水平(中国药物化学杂志.2011,21:433-441.)。
开发双靶点抗ad药物的研究对我国医药产业和社会发展具有重大意义。最近研究表明，脑内金属离子的代谢絮乱可以加速ad病情的发展，特别是铁，铜，锌等离子。通过对ad病人脑内的金属离子浓度监测发现，ad患者脑内的金属离子(铁，铜，锌)是正常人浓度的3-7倍。金属离子浓度异常不仅可以直接影响ad病程的发展，还可以加速aβ的聚集，促进ad患者脑内的老年斑的形成。因此，金属离子螯合剂亦是ad治疗药物的热点研究领域之一。去铁胺(dfo)是临床长期使用的金属离子螯合剂，为期两年的双盲实验表明，肌注dfo能够显著改善ad患者的症状。氯碘羟喹(cq)起初用于治疗疟疾，后发现其具优良的金属离子螯合作用，ii期临床研究也表明氯碘羟喹可以明显减少患者脑内的淀粉样蛋白的聚集，是一有前景的ad治疗药物。邻羟基苯乙酮是一类常见的金属离子螯合片段，具有分子量小，易于结构改造等优点。
ache抑制剂利伐斯替明是目前临床使用的一线药物，具有低毒性，良好的药代动力学性质，无药物间的相互作用等优势。本实验室在中国专利申请201710170290.8中已公开以金属离子和乙酰胆碱酯酶为靶点，从利伐司替明与ache催化三联体的特殊作用方式出发，结合苯乙酮的金属螯合片段，采用“融合法”设计、合成和药理活性筛选得到了一系列有研发前景的抗老年痴呆化合物，在体外活性筛选中表现出了很好的金属离子螯合能力以及aβ聚集抑制能力，但其ache抑制活性尚待提升。
技术实现要素：
针对已有的抗ad药物都是单靶点治疗药物，仅能延缓ad疾病的发展，本发明提供一种新型、高效的双靶点抗ad化合物取代邻羟基苯酮化合物及其应用。
本发明所提供的技术方案为：一种取代邻羟基苯酮化合物，结构如式i所示：
式i中，r1的结构式为
r2的结构式独立地为-nr8r9或者含有-n的五元环、六元环或七元环；
所述r3独立地选自h、羟基、胺基、c1-c10烷基、c1-c10烯基、或c1-c10卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基或卤素；
所述r4或r6独立地选自h、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基；
所述r5或r7独立地选自h、羟基、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基、卤素。
所述r8或r9独立地选自h、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基。
上述具有式i所示结构的化合物对乙酰胆碱酯酶有较好的体外抑制作用，且具有显著的金属离子螯合作用和aβ聚集抑制作用。
优选的，根据式i所述取代邻羟基苯酮化合物，所述r2独立地选自恶唑基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、吡唑基等五元环，或者独立地选自哌啶基、哌嗪基、甲基哌嗪基、吗啉基等六元环，或者独立地选自高哌嗪基等七元环，或者该类五元环、六元环、七元环的取代物；
所述r3独立地选自h、羟基、胺基、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、甲胺基、二甲胺基、甲乙胺基、氟、氯、溴、氯甲基、溴甲基、三氟甲基；
所述r4或r6独立地选自h、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、取代芳基；
所述r5或r7独立地选自h、羟基、胺基、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、甲氧基、乙氧基、甲胺基、二甲胺基、氯、溴、氯甲基、溴甲基、取代芳基；
所述r8或r9独立地选自h、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、取代芳基。
进一步优选，所述的取代邻羟基苯酮化合物选自如下结构式的化合物：
乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
氨基甲酸2-[2-(哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
吡咯烷-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
吗啉-4-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
4-甲基-哌嗪-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
二甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
二乙基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
吡咯烷-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
吗啉-4-羧酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
4-甲基-哌嗪-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
二甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
吡咯烷-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
吗啉-4-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯酯；
二甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
吡咯烷-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
哌啶-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
吗啉-4-羧酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯。
作为发明内容的一部分，本发明还公开一种上述的取代邻羟基苯酮化合物的制备方法，由以下步骤来制备：
步骤a)，将式1结构的哌啶(单保护的哌啶)与卤代烃x-r4缩合反应，得到式2结构的化合物；
步骤b)，将式2结构的化合物通过反应脱保护基，得到式3结构的化合物；
步骤c)，缩合引入邻羟基苯酮片段，式3结构的化合物通过缩合引入邻羟基苯酮片段，得到式4或式5结构的化合物；
步骤d)，酰化引入酚羟基取代基，式4结构的化合物通过酰化引入酚羟基取代基得到式a结构的化合物，式5结构的化合物通过酰化引入酚羟基取代基得到式b结构的化合物；
反应式如下：
所述步骤a,b,c,d的反应均可采用常规方法进行，其中，r2、r3、r4、r5、r6、r7的定义如前文所述。该制备方法具有原材料来源广泛、成本低、方法操作简单、条件温和等优点。
本发明提供一种如上述的取代邻羟基苯酮化合物或者其旋光异构体在药学上可接受的盐。所述药学上可接受的盐为取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体与无机酸、有机酸反应所形成的盐。
作为优选，所述药学上可接受的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、草酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、柠檬酸盐或琥珀酸盐。
所述药学上可接受的盐的制备方法如下：将反应制得的各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的一种，滴加无机酸或有机酸的溶液，制成药学上可接受的盐。
具体可以为：将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，于冰水浴下通入氯化氢气体或滴加氯化氢的饱和乙酸乙酯溶液，制成盐酸盐；
或者将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，滴加等摩尔甲磺酸，得其甲磺酸盐；
或者将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，于冰水浴下滴加浓硫酸溶液制成硫酸盐。
本发明还提供一种如上述的取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体或者及其药学上可接受的盐在制备治疗神经变性疾病药物中的应用。
所述神经变性疾病是指阿尔茨海默症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、白内障、帕金森氏病、克-雅二氏病及其与“疯牛”相关的新变种、亨廷顿氏病、伴有lewy体形成的痴呆、多系统萎缩症、哈-斯病、弥散性lewy体疾病、致命性家族失眠症、格斯特曼-斯特劳斯勒-杉克病或者伴有淀粉样变性病-荷兰型的遗传性脑溢血。
优选的，所述神经变性疾病包括阿尔茨海默症或帕金森氏病。初步的药理试验发现该类化合物大多数对乙酰胆碱酯酶有抑制作用，部分化合物其抑制活性强于先导化合物rivastigmine，且所有化合物的水解产物均具有金属离子螯合能力。因此，取代邻羟基苯酮化合物具有aβ聚集制剂作用。
同现有技术相比，本发明的有益效果体现在：
以ache抑制剂rivastigmine为先导化合物，在保留基本母核基础上，引入具有金属离子螯合作用的苯乙酮片段得到一系列的取代邻羟基苯酮化合物。具有原材料易于制备，方法操作简单、条件温和，成本低，适于工业化生产等优点。
取代邻羟基苯酮化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗神经变性疾病方面的药物中的应用，该类化合物不仅具有乙酰胆碱酯酶抑制活性，其水解产物还具有金属离子螯合作用，因而，可以从多个靶点进行治疗，适合用于制备治疗神经变性疾病药物，特别适合用于治疗阿尔茨海默症或帕金森氏病，具有较好的神经变性疾病应用前景。
附图说明
图1为化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物的紫外光谱以及它与不同铜离子浓度混合溶液的紫外差谱图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明作进一步发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1：(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基-甲酮(2-1)
将1.5g(8.06mmol)n-boc哌嗪溶于20ml二氯甲烷中，然后加入1.68ml(9.68mmol)的dipea，再在0℃时缓慢加入1.03ml(8.82mmol)的苯甲酰氯。随后升温至室温25℃，搅拌反应2h。反应结束后，用30ml的二氯甲烷稀释，再用1m的氢氧化钠溶液50ml洗涤。使用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸发，得黄色固体1.487g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.37-7.41(m,5h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.38(m,2h,piperazine),2.94(m,2h,piperazine),2.81(m,2h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例2(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(4-氯-苯基)-甲酮(2-2)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.34-7.41(m,4h,arh),3.48(m,4h,piperazine),3.45(m,4h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例3(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(4-硝基-苯基)-甲酮(2-3)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):8.31(t,1h,j＝2.0hzarh),8.29(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.59(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.57(t,1h,j＝2.0hzarh),3.77(m,2h,piperazine),3.55(m,2h,piperazine),3.41(m,2h,piperazine),3.35(m,2h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例41-叔丁基-4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪(2-4)
将2g(10.7mmol)n-boc哌嗪溶于30ml干燥的dmf中，再加入4.452g(32.2mmol)的碳酸钾，在氮气的保护下，反应混合物在0℃时缓慢加入2.27g(11.2mmol)4-甲氧基溴苄。反应物搅拌过夜，tlc监测反应结束后，将50ml冰水混合物加入反应液中，过滤出白色固体，并用4×30ml水冲洗，干燥，得到产物2.474g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.23(s,1h,arh),7.21(s,1h,arh),6.87(d,1h,j＝2.8hz,arh),6.84(d,1h,j＝2.8hz,arh),3.79(s,3h,-och3),3.44(s,2h,-nch2),3.41(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),2.36(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),1.45(s,9h,-c(ch3)3).
实施例5(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(6-氯-吡啶-3-基)-甲酮(2-5)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):8.45(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.74(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.42(d,1h,j＝8.4hz,pyridine),3.73(m,2h,piperazine),3.48(m,6h,piperazine),1.48(s,9h,-c(ch3)3).
实施例6(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-萘-2-基-甲酮(2-6)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.79-7.83(m,4h,arh),7.44-7.50(m,2h,arh),7.41(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),3.38-3.70(m,8h,piperazine),1.40(s,9h,-c(ch3)3).
实施例7联苯-4-基-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-甲酮(2-7)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.65(s,1h,arh),7.63(s,1h,arh),7.60(s,1h,arh),7.58(s,1h,arh),7.49(s,1h,arh),7.48(d,1h,j＝2.0hz,arh),7.46(s,1h,arh),7.44(s,1h,arh),7.38(t,1h,j＝7.2hz,arh),3.48-3.75(m,8h,piperazine),1.48(s,9h,-c(ch3)3).
实施例8苯基-哌嗪-1-基-甲酮(3-1)
将1.487g(5.13mmol)化合物2-1溶于15ml二氯甲烷中，然后加入1.5ml(20mmol)tfa。室温反应，tlc监测反应结束后，将产物浓缩，加入40ml1mhcl溶液溶解，搅拌半小时，再加入40ml二氯甲烷洗涤。随后水相层加入1m的氢氧化钠溶液调ph至10左右，再用二氯甲烷2×40ml萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸发，得无色油状物0.583g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.37-7.41(m,5h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.37(m,2h,piperazine),2.90(m,2h,piperazine),2.78(m,2h,piperazine).
实施例9(4-氯-苯基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-2)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.34-7.40(m,4h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.39(m,2h,piperazine),2.90(m,2h,piperazine),2.84(m,2h,piperazine).
实施例10(4-硝基-苯基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-3)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):8.30(t,1h,j＝2.0hzarh),8.27(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.59(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.56(t,1h,j＝2.0hzarh),3.78(m,2h,piperazine),3.34(m,2h,piperazine),2.97(m,2h,piperazine),2.82(m,2h,piperazine).
实施例111-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪(3-4)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.23(t,1h,j＝2.8hz,arh),7.21(t,1h,j＝2.0hz,arh),6.86(t,1h,j＝2.8hz,arh),6.84(t,1h,j＝2.0hz,arh),3.79(s,3h,-och3),3.43(s,2h,-nch2),2.89(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),2.41(m,4h,piperazine).
实施例12(6-氯-吡啶-3-基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-5)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):8.45(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.73(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.40(d,1h,j＝8.0hz,pyridine),3.76(m,2h,piperazine),3.42(m,2h,piperazine),2.94(m,2h,piperazine),2.86(m,2h,piperazine).
实施例13萘-2-基-哌嗪-1-基-甲酮(3-6)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.85-7.90(m,4h,arh),7.50-7.56(m,2h,arh),7.48(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.6hz,arh),3.81(m,2h,piperazine),3.50(m,2h,piperazine),2.93(m,4h,piperazine).
实施例14联苯-4-基-哌嗪-1-基-甲酮(3-7)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.64(d,1h,j＝1.6hz,arh),7.62(d,1h,j＝2.0hz,arh),7.60(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.58(s,1h,arh),7.49(d,1h,j＝1.6hz,arh),7.47(d,1h,j＝2.4hz,arh),7.46(s,1h,arh),7.44(s,1h,arh),7.37(m,1h,arh),3.50-3.77(m,4h,piperazine),2.91(m,4h,piperazine).
实施例152-(4-苄基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-1)
在圆底烧瓶中加入1.3g(6.05mmol)2-溴-2'-羟基苯乙酮和2.2g(12.10mmol)1-苄基哌嗪，加入氯仿溶解，再加入4.1g(30.25mmol)碳酸钾和0.1g(0.6mmol)碘化钾。室温反应，tlc监测反应结束后，过滤，使用水洗涤三次，减压浓缩得粗品。再使用pe：ea1:1过柱纯化得产物987mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.87(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.45(m,1h,arh),7.23-7.32(m,5h,arh),6.97(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.87(m,1h,arh),3.73(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),2.69(m,4h,piperazine),2.59(m,4h,piperazine).
实施例161-(2-羟基-苯基)-2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-2)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.80(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.37(m,1h,arh),7.15(t,1h,j＝2.8hz,arh),7.13(t,1h,j＝2.8hz,arh),6.89(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.75-6.79(m,3h,arh),3.71(s,3h,-och3),3.63(s,2h,-coch2),3.39(s,2h,-nch2),2.59(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine).
实施例172-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-3)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.83(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.40-7.43(m,5h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.8hz,j2＝1.2hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.89(s,2h,-coch2),3.55(m,2h,piperazine),3.48(m,2h,piperazine),2.63-2.75(m,4h,piperazine).
实施例182-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-4)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.82(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.35-7.41(m,4h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.88(s,4h,-coch2,piperazine),3.53(m,2h,piperazine),2.64-2.70(m,4h,piperazine).
实施例191-(2-羟基-苯基)-2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-5)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):8.29(dd,2h,j1＝6.8hz,j2＝2.0hz,arh),7.81(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.59(dd,2h,j1＝6.8hz,j2＝2.0hz,arh)7.50(m,1h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.91(m,1h,arh),3.91(s,2h,-coch2),3.48(m,4h,piperazine),2.62-2.78(m,4h,piperazine).
实施例202-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-6)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):8.46(dd,1h,j1＝2.4hz,j2＝0.8hzpyridine),7.81(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hzpyridine),7.75(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝2.4hzpyridine),7.50(m,1h,arh),7.41(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hzarh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hzarh),6.91(m,1h,arh),3.90(m,4h,-coch2,piperazine),3.54(m,2h,piperazine),2.73(m,2h,piperazine),2.65(m,2h,piperazine).
实施例211-(2-羟基-苯基)-2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-7)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):12.14(s,1h,-oh),7.83-7.92(m,5h,arh),7.46-7.56(m,4h,arh),7.00(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.88-3.93(m,4h,piperazine,-coch2),3.60(m,2h,piperazine),2.63-2.81(m,4h,piperazine).
实施例222-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-8)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):12.15(s,1h,-oh),7.84(dd,1hj1＝8.0hz,j2＝1.2hzarh),7.58-7.64(m,4h,arh),7.44-7.51(m,5h,arh),7.38(m,1h,arh)7.00(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.87(m,4h,-coch2,piperazine),3.61(m,2h,piperazine),2.67(m,4h,piperazine).
实施例233-(4-苄基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-1)
将0.4g(2.25mmol)1-苄基哌嗪溶于10ml无水乙醇中，然后加入2ml(11.3mmol)dipea，搅拌均匀。再加入0.428g(2.25mmol)色酮-3-甲酸，室温下反应。tlc监测反应结束后，减压抽干。使用pe：ea1:1过柱纯化，得产品0.62g。1h-nmr(δ,cdcl3):13.87(s,1h,-oh),7.83(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.66(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hzarh),7.31-7.37(m,6h,arh,-chch),6.93(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.80(m,1h,arh),5.89(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.57(s,2h,-nch2),3.46(m,4h,piperazine),2.54(m,4h,piperazine).
实施例241-(2-羟基-苯基)-3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酮(5-2)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.86(s,1h,-oh),7.83(d,1h,j＝12.0hz,arh),7.65(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.35(m,1h,-chch),7.24(m,2h,arh),6.86(m,4h,arh),5.88(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.81(s,3h,-och3),3.50(s,2h,-nch2),3.45(m,4h,piperazine),2.52(m,4h,piperazine).
实施例253-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-3)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.56(s,1h,-oh),7.75(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.59(d,1h,j＝8.0hz,arh),7.28-7.43(m,5h,arh,-chch),6.88(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.75(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.89(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.64(m,4h,piperazine),3.39(m,4h,piperazine).
实施例263-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-4)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.58(s,1h,-oh),8.49(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.76-7.86(m,2h,pyridine),7.67(d,1h,j＝8.0hz,arh),7.36-7.47(m,2h,arh,-chch),6.95(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.83(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.97(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.74(m,4h,piperazine),3.49(m,4h,piperazine).
实施例271-(2-羟基-苯基)-3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酮(5-5)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.66(s,1h,-oh),7.82-7.94(m,5h,arh),7.49-7.67(m,4h,arh),7.37(m,1h,-chch),6.94(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.82(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.97(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.78(m,4h,piperazine),3.49(m,4h,piperazine).
实施例283-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-6)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.58(s,1h,-oh),7.77(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.52-7.60(m,5h,arh),7.28-7.47(m,6h,arh,-chch),6.87(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.75(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.90(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.70(m,4h,piperazine),3.42(m,4h,piperazine).
实施例29乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-1)
将312mg(1mmol)的4-1、12mg(0.1mmol)的dmap和1.66ml(12mmol)的三乙胺溶于20ml四氢呋喃中，室温搅拌下分批加入610mg(5mmol)的甲乙氨基甲酰氯，回流反应4h。反应结束后，将四氢呋喃浓缩干，向反应体系中加入适量的水，用稀盐酸调ph值至5-6，并搅拌半小时，然后用乙酸乙酯萃取三次取水层，水层用饱和碳酸钠溶液调ph值至9，并搅拌半小时，再用乙酸乙酯萃取水层三次，混合的乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥后，浓缩蒸干后再使用pe：ea1:2过柱纯化得产物349mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.49(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.23-7.33(m,6h,arh),7.13(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.72(s,2h,-coch2),3.59(s,2h,-nch2),3.38(q,2h,j＝6.8hz,-nch2ch3),3.09(s,1.5h,-nch3),2.96(s,1.5h,-nch3),2.62-2.64(m,8h,piperazine),1.17(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝396.
实施例30乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-2)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.49(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.21-7.27(m,3h,arh),7.13(t,1h,j＝8.4hz,arh),6.84-6.87(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.51(s,2h,-nch2),3.38(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.09(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.57-2.63(m,8h,piperazine),1.18(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝426.
实施例31乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-3)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.71(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.51(t,1h,j＝8.0hz,arh),7.34-7.41(m,5h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.79-3.85(m,4h,-coch2,piperazine),3.36-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.59-2.77(m,4h,piperazine),1.17(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝410.
实施例32乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-4)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(m,1h,arh),7.51(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.34-7.42(m,4h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.79-3.84(m,4h,-coch2,piperazine),3.47-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.58-2.70(m,4h,piperazine),1.16(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝444.
实施例33乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-5)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):8.30(m,2h,arh),7.71(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝2.8hz,arh),7.50-7.61(m,3h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.88(m,2h,piperazine),3.80(s,2h,-coch2),3.36-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.59-2.77(m,4h,piperazine),1.17(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝455.
实施例34乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-6)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):8.46(dd,1h,j1＝2.4hz,j2＝0.8hz,pyridine),7.70-7.75(m,2h,pyridine),7.52(t,1h,j＝7.2hz,arh),7.40(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),7.28(m,1h,arh),7.15(t,1h,j＝8.0hz,arh),3.85(m,2h,piperazine),3.79(s,2h,-coch2),3.37-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.12(s,1.5h,-nch3),2.98(s,1.5h,-nch3),2.60-2.77(m,4h,piperazine),1.19(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝445.
实施例35乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-7)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.85-7.90(m,4h,arh),7.72(m,1h,arh),7.48-7.56(m,4h,arh),7.28(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),7.14(t,1h,j＝8.0hz,arh),3.90(m,2h,piperazine),3.79(s,2h,-coch2),3.36-3.55(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.58-2.76(m,4h,piperazine),1.15(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝460.
实施例36乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-8)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1hj1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.39-7.53(m,9h,arh),7.27(m,2h,arh)7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.89(m,2h,piperazine),3.82(s,2h,-coch2),3.61(m,2h,piperazine),3.39(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.60-2.77(m,4h,piperazine),1.19(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝486.
实施例37二甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-9)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.2hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.24-7.33(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),3.12(s,3h,-nch3),2.99(s,3h,-nch3),2.57-2.62(m,8h,piperazine).[m+h]+＝382.
实施例38二乙基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-10)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.48(m,1h,arh),7.23-7.35(m,6h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.72(s,2h,-coch2),3.58(s,2h,-nch2),3.47(q,2h,j＝6.8hz,-nch2ch3),3.37(m,2h,-nch2ch3),2.60-2.65(m,8h,piperazine),1.26(m,3h,-nch2ch3),1.19(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝410.
实施例39吡咯烷-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-11)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.23-7.35(m,6h,arh),7.17(d,1h,j＝8.4hz,arh),3.73(s,2h,-coch2),3.60(m,2h,pyrrolidine),3.57(s,2h,-nch2),3.45(m,2h,pyrrolidine),2.60-2.64(m,8h,piperazine),1.91-1.99(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝408.
实施例40哌啶-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-12)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.0hz,arh),7.40(m,1h,arh),7.28-7.34(m,6h,arh),7.13(d,1h,j＝8.0hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.56(s,2h,-nch2),3.48(m,4h,piperidine),2.58-2.63(m,8h,piperazine),1.66(m,6h,piperidine).[m+h]+＝422.
实施例41吗啉-4-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-13)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.77(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.51(m,1h,arh),7.27-7.35(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.67(m,2h,morpholine),3.54(m,2h,morpholine),3.58(s,2h,-nch2),3.28(m,2h,morpholine),2.59-2.64(m,8h,piperazine),2.44(m,2h,morpholine).[m+h]+＝424.
实施例424-甲基-哌嗪-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-14)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.50(m,1h,arh),7.27-7.34(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.73(m,2h,n-methylpiperazine),3.71(s,2h,-coch2),3.58(m,2h,n-methylpiperazine),3.57(s,2h,-nch2),2.59-2.63(m,8h,piperidine),2.41-2.53(m,4h,n-methylpiperazine),2.36(s,3h,-nch3).[m+h]+＝437.
实施例43二甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-15)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.27(m,3h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.84-6.87(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),3.12(s,3h,-nch3),2.99(s,3h,-nch3),2.56-2.64(m,8h,piperazine).[m+h]+＝412.
实施例44二乙基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-16)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.48(m,1h,arh),7.21-7.25(m,3h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),6.85-6.88(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.72(s,2h,-coch2),3.56(s,2h,-nch2),3.47(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.35(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),2.64(m,4h,piperazine),2.63(m,4h,piperazine),1.27(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3),1.18(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝440.
实施例45吡咯烷-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-17)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.76(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.51(m,1h,arh),7.19-7.25(m,3h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.83-6.88(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.58(s,2h,-nch2),3.26-3.29(m,4h,pyrrolidine),2.65(m,8h,piperazine),1.34-1.38(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝438.
实施例46哌啶-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-18)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.67(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.40(m,1h,arh),7.14-7.17(m,3h,arh),7.06(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.76-6.79(m,2h,arh),3.72(s,3h,-och3),3.63(s,2h,-coch2),3.55(m,2h,piperidine),3.42(m,2h,piperidine),3.39(s,2h,-nh2),2.45-2.53(m,8h,piperazine),1.54-1.58(m,6h,piperidine).[m+h]+＝452.
实施例47吗啉-4-羧酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-19)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.25(m,3h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.83-6.87(m,2h,arh),3.79(s,3h,-och3),3.73(s,2h,-coch2),3.59(t,2h,j＝6.8hz,morpholine),3.52(s,2h,-nch2),3.45(t,2h,j＝6.8hz,morpholine),2.58-2.63(m,8h,piperazine),1.90-1.99(m,4h,morpholine).[m+h]+＝454.
实施例484-甲基-哌嗪-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-20)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.28(m,3h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),6.83-6.87(m,2h,arh),3.79(s,3h,-och3),3.71(m,2h,n-methylpiperazine),3.69(s,2h,-coch2),3.57(m,2h,n-methylpiperazine),3.48(s,2h,-nh2),2.54-2.61(m,8h,piperidine),2.38-2.51(m,4h,n-methylpiperazine),2.35(s,3h,-nch3).[m+h]+＝467.
实施例49乙基-甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯基酯(b-1)
将322mg(1mmol)的5-1溶于20ml乙腈溶液中，再加入651mg(2mmol)的碳酸铯，在室温下缓慢加入610mg(5mmol)的甲乙氨基甲酰氯。加热回流反应，tlc监测反应结束后，向反应体系中加入30ml水，再用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，减压抽干后再使用pe：ea1:1过柱纯化得产品301mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.28-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.45(dd,1h,j1＝12.8hz,j2＝4.0hz,-chch),3.53(s,2h,-nch2),3.35-3.44(m,2h,-nch2ch3),3.30(m,4h,piperazine),3.03(s,1.5h,-ch3),2.95(s,1.5h,-ch3),2.46(m,4h,piperazine),1.13-1.21(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝408.
实施例50乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-2)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.2hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.50(dd,1h,j1＝12.4hz,j2＝3.2hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.47(s,2h,-nch2),3.35-3.44(m,2h,-nch2ch3),3.29(m,4h,piperazine),3.03(s,1.5h,-ch3),2.95(s,1.5h,-ch3),2.44(m,4h,piperazine),1.11-1.21(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝438.
实施例51乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-3)
操作同实施例49。熔点：170-173.5℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.35-7.43(m,6h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.53(dd,1h,j1＝12.4hz,j2＝2.8hz,-chch),3.64(m,4h,piperazine),3.36-3.47(m,2h,-nch2ch3),3.31(m,4h,piperazine),3.04(s,1.5h,-nch3),2.96(s,1.5h,-nch3),1.13-1.24(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝456.
实施例52乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-4)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):8.39(d,1h,j＝2.4hz,pyridine),7.67(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.28-7.40(m,4h,pyridine,arh,-chch),7.16(t,1h,j＝7.2hz,arh),7.05(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.47(dd,1h,j1＝12.8hz,j2＝3.6hz,,-chch),3.57-3.63(m,4h,piperazine),3.17-3.43(m,6h,-nch2ch3,piperazine),2.97(s,1.5h,-nch3),2.89(s,1.5h,-nch3),1.06-1.18(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝457.
实施例53乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-5)
操作同实施例49。熔点：142.1-146.7℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.86-7.92(m,4h,arh),7.37-7.59(m,6h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.54(d,1h,j＝10.4hz,-chch),3.67-3.72(m,4h,piperazine),3.24-3.48(m,6h,-nch2ch3,piperazine),3.04(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),1.10-1.24(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝472.
实施例54乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-6)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.58-7.66(m,4h,arh),7.37-7.50(m,8h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.13(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.54(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.68-3.73(m,4h,piperazine),3.24-3.47(m,6h,-nch2ch3,piperazine),3.05(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),1.10-1.23(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝498.
实施例55二甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-7)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.29-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.13(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),5.46(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.53(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),3.06(s,3h,-nch3),2.97(s,3h,-nch3),2.47(m,4h,piperazine).[m+h]+＝394.
实施例56二乙基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-8)
操作同实施例49。熔点：68.9-70.7℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.45(dd,1h,j1＝6.4hz,j2＝1.2hz,arh),7.28-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),5.44(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.52(s,2h,-nch2),3.39-3.46(m,2h,-nch2ch3),3.33-3.37(m,2h,-nch2ch3),3.29(m,4h,piperazine),2.45(m,4h,piperazine),1.15-1.22(m,6h,-nch2ch3).[m+h]+＝422
实施例57吡咯烷-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-9)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.29-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),5.47(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.52-3.55(m,4h,-nch2,pyrrolidine),3.43(m,2h,pyrrolidine),3.30(m,4h,piperazine),2.46(m,4h,piperazine),1.87-1.95(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝420.
实施例58哌啶-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-10)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.46(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.27-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),5.45(d,1h,j＝13.2hz,-chch),3.54(m,4h,piperidine),3.46(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine),1.55-1.67(m,6h,piperidine).[m+h]+＝434.
实施例59吗啉-4-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯酯(b-11)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.28-7.40(m,7h,arh,-chch),7.23(m,1h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),5.45(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.71(m,4h,morpholine),3.64(m,2h,morpholine),3.55(m,4h,-nch2,morpholine),3.32(m,4h,piperazine),2.49(m,4h,piperazine).[m+h]+＝436.
实施例60二甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯酯(b-12)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.13(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.46(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.48(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),3.06(s,3h,-nch3),2.97(s,3h,-nch3),2.46(m,4h,piperazine).[m+h]+＝424.
实施例61二乙基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-13)
操作同实施例49。熔点：79.1-84.3℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.45(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.36(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.12(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.44(d,1h,j＝13.2hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.47(s,2h,-nch2),3.31-3.42(m,4h,-nch2ch3),3.28(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.15-1.22(m,6h,-nch2ch3).[m+h]+＝452.
实施例62吡咯烷-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-14)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(dd,1h,j1＝7.2hz,j2＝1.2hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.19-7.23(m,3h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.47(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.53(t,2h,j＝6.8hz,pyrrolidine),3.47(s,2h,-nch2),3.42(t,2h,j＝6.8hz,pyrrolidine),3.29(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.87-1.94(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝450.
实施例63哌啶-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-15)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.46(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.2hz,arh),7.35(m,2h,arh,-chch),7.19-7.23(m,3h,arh),7.12(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.50(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.55(m,2h,piperidine),3.47(m,2h,-nch2,piperidine),3.29(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.57-1.65(m,6h,piperidine).[m+h]+＝464.
实施例64吗啉-4-羧酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-16)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.23(m,3h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.45(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.71(m,4h,morpholine),3.64(m,2h,morpholine),3.49(m,4h,-nch2,morpholine),3.32(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine).[m+h]+＝466.
实施例65化合物a-15的盐酸盐
取化合物a-151.0g，溶于10ml乙酸乙酯中，冰水浴中冷却至0℃，通入干燥hcl气体，离心，得白色固体，为a-15的盐酸盐，收率75％。
应用例1：乙酰胆碱酯酶抑制活性测试方法
a.用100mm的磷酸钾(ph＝7.5)和0.05％的brij-35制备缓冲溶液。
b.将20个a系列化合物溶于dmso，浓度为20μm，五倍开始稀释，均设置七个浓度。然后通过echo550将250nl的化合物储备溶液转移到384孔板中,最大最小控制组分别移入250nldmso。
c.另选取10个a系列化合物和16个b系列化合物溶于dmso，均设置七个浓度分别为200.00μm、66.67μm、22.22μm、7.41μm、2.47μm、0.82μm和0.47μm；将利伐司替明溶于dmso，设置7个浓度分别为50.00μm、16.67μm、5.56μm、1.85μm、0.62μm、0.21μm、0.07μm；将多奈哌齐溶于dmso，设置7个浓度分别为1.00μm、0.3333μm、0.1111μm、0.0370μm、0.0123μm、0.0041μm、0.0014μm。然后通过echo550将250nl的化合物储备溶液转移到384孔板中,最大最小控制组分别移入250nldmso。
d.将人源性乙酰胆碱酯酶溶于缓冲溶液中，浓度为1μm，在除了最小控制孔以外的其他孔中分别移入25μl人源性乙酰胆碱酯酶溶液，最小控制孔中加入25μl缓冲溶液，混匀后于室温孵化60min。
e.在缓冲溶液中制备dtnb和氯化乙酰硫代胆碱底物溶液，浓度分别为dtnb50μm，乙酰硫胆碱氯化物200μm。
f.向测试板的每个孔中加入25μl底物溶液开始反应，摇盘，动态监测在405nm处的吸光度。
g.收集数据，并根据实验结果计算部分化合物的ic50值。
实验结果如下：
表1.36个终产物对人源性乙酰胆碱酯酶抑制活性的测试结果
从表1中可以看出，当取代基r2为二甲氨基，r4为对甲氧基苄基时，化合物a-15活性最好，ic50值为8.8μm，仅次于上市药物利伐司替明。
应用例2金属离子螯合能力测试
化合物的乙酰胆碱酯酶水解试验：将20μl化合物(a-15)的pbs溶液加入到160μlpbs缓冲液中(ph＝7.4)，再加入10μl的0.05％(v/v)的tritonx-100和20μl的乙酰胆碱酯酶匀浆，在37℃下孵育48小时。乙酸乙酯提取，合并有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸去溶剂，得到化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物。
将上述水解产物溶于甲醇，浓度为25μm，加入不同铜离子浓度(铜离子浓度范围1,2.5,5,12.5,25,50μm)。使用紫外分光光度计-u3010检测化合物的紫外光谱以及化合物与不同铜离子浓度的混合溶液的紫外差谱图(化合物的紫外差谱图由化合物-金属离子混合溶液的紫外光谱图减去金属离子紫外光谱图得到)，实验结果如图1所示。
图1中，起点210nm处最上面的谱线1是化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物的紫外光谱，其余各条曲线分别为化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物溶液中加入不同浓度的铜离子的紫外吸收光谱减去相应浓度铜离子的紫外吸收光谱图。从图中可以看出，当化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物溶液中加入不同浓度的铜离子后，在λ215，λ255，λ335处的紫外吸收强度随着金属离子浓度的增加都有明显的下降，在λ280处的紫外吸收强度随着金属离子浓度的增加而增加。该实验结果说明化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物能与铜离子形成络合物，具有潜在的金属离子鳌合能力。同时，由于25μm的金属离子曲线(6)和50μm的金属离子曲线(7)的曲线近乎重合，说明25μm的铜离子与化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物的络合接近饱和，铜离子与化合物a-15的乙酰胆碱酯酶水解产物的络合比很可能是1:1。
总而言之，该类新化合物不仅具有乙酰胆碱酯酶抑制活性，其水解产物还具有金属离子螯合作用，可以从多个靶点对神经变性疾病进行治疗，具有较好的抗神经变性疾病应用前景，因而具有良好的商业价值。
无需进一步详细阐述，相信采用前面所公开的内容，本领域技术人员可最大限度地应用本发明。因此，前面的实施方案应理解为仅是举例说明，而非以任何方式限制本发明的范围。