一种钯的Schiff碱配合物的制备方法及其抗肿瘤的应用与流程

本发明属于抗癌药物技术领域，尤其涉及一种钯的schiff碱配合物的制备方法及其抗肿瘤的应用。

背景技术

自从顺铂的出现，并以其为代表的一系列铂类金属配合物的研发，推动了铂类金属配合物在整个抗癌领域的发展。并相继合成了一些高效、低毒、具有抗癌活性的金属配合物。但铂配合物存在毒副作用大、水溶性小等诸多缺点，从而在临床上可引起肾毒性、耳毒性、神经毒性等诸多副作用。为降低以上缺点，本专利引入schiff碱类配体，让其增加抗肿瘤活性，减少其常见副作用。因schiff碱类配体中含有的一些功能性官能团，具有各类生命现象所需要的一些理化性质和较好的抗细菌、抗病毒和抗肿瘤活性。将schiff碱类的配体与金属钯配位形成配合物会进一步提高其抗肿瘤活性的性质。

技术实现要素：

本发明的首要目的在于提供一种钯的schiff碱配合物，该钯的schiff碱配合物与顺铂相比，具有相对高抗肿瘤活性，高选择性，在体内易吸收并很快被排泄及克服钯类药物的细胞耐药性等特点。

本发明的再一目的在于提供上述钯的schiff碱配合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述钯的schiff碱配合物在抗肿瘤活性方面的应用。

本发明是这样实现的，一种钯的schiff碱配合物，该配合物的分子式为：c30h30n4o2pd，化学结构式如下式(i)所示：

本发明进一步公开了上述钯的schiff碱配合物的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)搅拌状态下，将钯盐溶解于混合溶剂中，得到溶液1；其中，所述钯盐(17.3mg，0.1mmol)溶解于(3～5)ml的混合溶剂中；

(2)将schiff碱配体化合物溶解于4ml的混合溶剂中并加入搅拌0.5-1h，得到溶液2。将步骤(1)得到的溶液1加入到溶液2中，搅拌约0.5-1h，过滤后得到溶液3；其中，schiff碱配体化合物与混合溶剂的质量体积比为44.82mg：(3-5)ml；所述钯盐与schiff碱配体化合物的摩尔比为1：1。

在步骤(1)、步骤(2)中，所述混合溶剂由甲醇、乙腈、乙醇和甲苯中的两种以上组份构成；

(3)将步骤(2)得到的溶液3在室温下持续搅拌0.5～1.0h后置于高压反应釜，程序控制升温和降温后，得到红棕色晶体的钯的schiff碱配合物。

优选地，在步骤(1)中，所述钯盐为二氯化钯，所述钯盐与混合溶剂的质量体积比为17.3：4ml。

优选地，在步骤(2)中，所述schiff碱配体化合物与混合溶剂的质量体积比范围为44.82：5ml；

所述钯盐与schiff碱配体化合物的摩尔比为1：2；

在步骤(2)中，所述schiff碱配体化合物的制备包括以下步骤：将1-(2-羟基苯基)乙酮与n-甲基-n-苯肼溶于混合溶剂发生缩合反应得到schiff碱配体化合物；其中，所述1-(2-羟基苯基)乙酮、n-甲基-n-苯肼、混合溶剂的摩尔体积比0.1mmol：0.1mmol：(1～5)ml。

优选地，在步骤(2)中，所述1-(2-羟基苯基)乙酮、n-甲基-n-苯肼、混合溶剂的摩尔体积比为0.1mmol：0.1mmol：5ml。

优选地，在步骤(1)或步骤(2)中，所述混合溶剂由按体积比为(1～5)：1的甲醇和乙腈构成，或者，所述混合溶剂由按体积比为(1～5)：2的乙腈和甲苯构成，或者，所述混合溶剂由按体积比为2：(1～5)的甲醇和甲苯构成，或者，所述混合溶剂由按体积比为2：(1～5)的乙醇和甲苯构成。

优选地，所述混合溶剂由按体积比为2：1的乙醇和甲苯构成。

优选地，在步骤(3)中，所述程序控制升温和降温具体为：使温度上升到80℃保持1h，继续升温到120℃保持6～8h，逐渐升温到180℃保持12-16h，然后缓慢降温至120℃保持4-6h，降温到80℃保持1h，最后降至室温。

本发明进一步公开了上述钯的schiff碱配合物在抗肿瘤活性方面的应用。

优选地，所述肿瘤包括人体乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌。

本发明克服现有技术的不足，提供一种钯的schiff碱配合物的制备方法及其在抗肿瘤活性方面的应用。本发明采用混合溶剂溶解1-(2-羟基苯基)乙酮与n-甲基-n-苯肼，使其发生缩合反应，通过二氯化钯溶解于的混合溶剂中，再与一定量的schiff碱配体一起进入高压反应釜中，通过程序升温控制后得到钯的schiff碱配合物，通过mtt法对钯的schiff碱配合物进行抗肿瘤活性测定，实验表明该配合物对人乳腺癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞、肺癌细胞有明显抑制作用，抑制率效果显著，这对于未来研究钯类schiff碱配合物的抗肿瘤药物有重要的意义。

相比于现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：本发明钯的schiff碱配合物具有晶型稳定性好、制备方法及后处理方式也相对较简单，抗肿瘤活性明显等优势，为后续抗肿瘤药物研究提供了重要依据。

附图说明

图1是本发明钯的schiff碱配合物的晶体结构图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

将乙腈和甲苯按体积比为(1～5)：2混合后得到混合溶剂1；

将乙醇和甲苯按体积比为1：(1～5)混合后得到混合溶剂2。

将乙醇和甲苯按体积比为2：1混合后得到混合溶剂3。

实施例2

将0.1mmol的1-(2-羟基苯基)乙酮与0.1mmol的n-甲基-n-苯肼溶于3ml混合溶剂1发生缩合反应得到schiff碱配体化合物1。

实施例3

将0.1mmol的1-(2-羟基苯基)乙酮与0.1mmol的n-甲基-n-苯肼溶于4ml混合溶剂2发生缩合反应得到schiff碱配体化合物2。

实施例4

将0.1mmol的1-(2-羟基苯基)乙酮与0.1mmol的n-甲基-n-苯肼溶于5ml混合溶剂3发生缩合反应得到schiff碱配体化合物3。

实施例5

(1)搅拌状态下，将17.3mg二氯化钯溶解于4ml混合溶剂1中，得到溶液1；

(2)将44.82mg的schiff碱配体化合物1溶解于3ml混合溶剂1中，得到溶液2，将步骤(1)得到的溶液1加入到溶液2中，搅拌约0.5-1h，过滤后得到溶液3；

(3)将步骤(2)得到的溶液3在室温下持续搅拌0.5h后置于高压反应釜，程序控制使温度上升到80℃保持1h，继续升温到120℃保持6～8h，逐渐升温到180℃保持12-16h，然后缓慢降温至120℃保持4-6h，降温到80℃保持1h，最后降至室温。得到红棕色晶体的钯的schiff碱配合物1。

实施例6

(1)搅拌状态下，将17.3mg二氯化钯溶解于5ml混合溶剂2中，得到溶液1；

(2)将44.82mg的schiff碱配体化合物1溶解于6ml混合溶剂1中，得到溶液2，将步骤(1)得到的溶液1加入到溶液2中，搅拌约0.5-1h，过滤后得到溶液3；

(3)将步骤(2)得到的溶液3在室温下持续搅拌1.0h后置于高压反应釜，程序控制使温度上升到80℃保持1h，继续升温到120℃保持6～8h，逐渐升温到180℃保持12-16h，然后缓慢降温至120℃保持4-6h，降温到80℃保持1h，最后降至室温。得到红棕色晶体的钯的schiff碱配合物2。

实施例7

(1)搅拌状态下，将17.3mg二氯化钯溶解于4ml混合溶剂3中，得到溶液1；

(2)将44.82mg的schiff碱配体化合物3溶解于5ml混合溶剂3中，将步骤(1)得到的溶液1加入到溶液2中，搅拌约0.5-1h，过滤后得到溶液3；

(3)将步骤(2)得到的溶液3在室温下持续搅拌0.8h后置于高压反应釜，程序控制使温度上升到80℃保持1h，继续升温到120℃保持6～8h，逐渐升温到180℃保持12-16h，然后缓慢降温至120℃保持4-6h，降温到80℃保持1h，最后降至室温。得到红棕色晶体的钯的schiff碱配合物3。

效果实施例1

对实施例7中得到的红棕色晶体的钯的schiff碱配合物3进行过滤，用少量混合溶剂3洗涤晶体3次，然后真空干燥，计算产率为53％。

对所得到的钯的schiff碱配合物3进行元素分析，结果为：c30h30n4o2pd(计算值)c,61.59；h,5.17；n,9.58；(测试值)c，61.56；h，5.15；n，9.59。

钯的schiff碱配合物3单晶结构是利用brukersmart1000ccd面探衍射仪进行测试的，采用波长为的mokα射线，ω扫面方式。利用saint程序对所收集的衍射点进行数据还原，用sadabs程序进行数据校正。基于全角最小二乘的方法，利用shelxtl5.1程序包，用直接法在差值傅立叶图上找出全部非氢原子的坐标，然后将所有的非氢原子都采用各向异性精修。钯的schiff碱配合物3的晶体学参数如下表1、表2所示：

表1钯的schiff配合物3晶体学数据

r1＝∑||fo|-|fc||/∑|fo|，wr2＝[∑w(fo²-fc²)²/∑w(fo²)²]^1/2.

表2配合物的部分键长和键角(°)数据

效果实施例2

以实施例7中得到的钯的schiff碱配合物3来分析其对肿瘤细胞mcf-7、hela、a549、hepg2的抑制作用。

在本效果实施例中，采用mtt法研究了配合物的体外毒性实验。将实验细胞置于37℃，5.0％ru2培养箱中生长至对数期，0.25％胰酶消化收集细胞，调整细胞悬液浓度，使细胞密度大约在1×10⁴个/ml，每孔100ml接种于96孔板，细胞密度约为3～5×10³个/孔，置于37℃、5％ru2的培养箱中培养24h。换液，加入不同浓度梯度的药物，每个浓度做3个平行样，设置空白调零组(培养基、mtt、dmso)，空白组(培养基、细胞、相同浓度的药物溶解介质、mtt、dmso)，阳性对照组(培养基、细胞、不同浓度的顺钯、mtt、dmso)。置于37℃、5％ru2的培养箱中继续培养48h。吸去上清，每孔加入90μl新鲜培养液，再加入10μlmtt溶液(5mg/ml，即0.5％mtt)，继续培养4h。终止培养，弃去孔内培养液，每孔加入150μldmso，置于摇床上低速振荡30min，使结晶物充分溶解。酶联免疫检测仪检测490nm波长的各孔的吸光度值od相关的细胞增殖的抑制率及半数抑制浓度(ic50)用下面的公式进行计算：生长抑制率＝(od对照-od实验)/(od对照-od空白)，所有od值均减去空白调零组od值。钯的schiff碱配合物对mcf-7(人乳腺癌细胞)、hela(人宫颈癌细胞)、a549(肺癌细胞)、hepg2(肝癌细胞)增殖抑制作用的ic50值如下表3所示。

表3

从表中数据可知，实例7中的schiff碱钯的配合物3对上述肿瘤细胞显示了很好抑制作用。尤其对mcf-7的抑制作用可以达到15.9±2.4ic50μm抑制率是顺铂1.4倍，对hela(ic50μm)的抑制作用可以达到16.2±2.4抑制率是顺铂1.3倍。可能原因是schiff碱特有的抗菌、抑制肿瘤活性并在此基础上结合钯的金属盐形成的配合物在抑制肿瘤细胞上会更有利。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。