本发明采用超临界co2萃取桃金娘果中多糖的方法，属于中药开发技术领域，专用于桃金娘果中多糖的提取。
背景技术：
桃金娘rhodomyrtustomentosa(ait.)hassk.为桃金娘科桃金娘属常绿多花小灌木，又名稔子、山稔子等，广泛分布于我国广东、海南、广西等省，印度、越南、日本、菲律宾等东南亚国家也常见有分布，由于其果实中富含花青素、多酚、多糖等多种成分，我国南方地区民间常以桃金娘根茎、叶、果入药，常用于急、慢性肠胃炎、痢疾以及提高人体免疫等。目前，抗生素的不规范使用以及抗生素残留和抗药性问题日趋严重，一些抗生素能够通过动物性食品转移到人体中，对人类的健康造成了严重威胁。因此，寻找新型无毒、无害、无污染和无残留的抗生素替代品迫在眉睫。而植物多糖与抗生素作用性质相同，并且具有无污染、无残留和无“三致”作用等优点，能够作为一种绿色新型畜禽用免疫增强剂，成为近代畜牧养殖道路上新的方向。
目前对桃金娘果中多糖的提取主要是通过水多次浸提，该方法多糖提取率不高，经优化水浴浸提时间、浸提温度以及料液比等提取工艺，最高提取率为1.86%。
技术实现要素：
本发明目的是针对传统水浸提法的技术不足，提供了一种从桃金娘果中提取多糖的方法，本发明工艺流程简单、经济、可操作性强，适用于工业化大规模生产，得到的桃金娘果多糖可应用于中药制药或作为畜禽用药免疫增强剂。
为解决水浸提法的技术问题，本发明的技术方案是：一种超临界co2萃取桃金娘果中多糖的方法，包括以下工艺步骤：
（1）原料选取：桃金娘果；
（2）粉碎：将自然晾干后的桃金娘果经粉碎机粉碎，过40~80目筛，烘干至恒重；
（3）浸泡：将称量好的桃金娘果放入烧杯中用夹带剂浸湿；
（4）超临界co2提取：将（3）浸润好的桃金娘果置于超临界co2萃取釜中，调节萃取温度25~65℃、夹带剂比例15~40%、萃取压力80~150bar、总流量15~30g/min、萃取时间30~210min，萃取完毕直接在收集釜出口收集桃金娘果提取液。
优选地，所述co2的纯度为99.99%。
优选地，所述步骤（4）中的夹带剂包括95%乙醇、80%乙醇、60%乙醇、甲醇和60%甲醇中一种或多种。
优选地，所述步骤（4）中的超临界co2提取过程工艺参数为：萃取温度35℃、夹带剂95%乙醇、夹带剂比例30%、萃取压力100bar、总流量25g/min、萃取时间120min，将得到的提取液浓缩后加3倍体积无水乙醇进行醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀物蒸干得到粗多糖，称重。
本发明超临界co2萃取桃金娘果中多糖的方法，与传统技术相比具有以下优点和积极效果：
1、本发明超临界co2萃取桃金娘果中多糖具有残留少、选择性强、条件温和、提取率高、绿色环保等优点，具有一定的市场应用价值；
2、由于乙醇极性较高，选择95%乙醇作为夹带剂无毒且绿色环保，并且能够提高桃金娘果中极性较大的多糖组分的选择性、溶解性以及提取率；
3、本发明涉及的超临界co2流体技术萃取桃金娘果多糖得到的萃取率较传统方法高；
4、本发明萃取得到的桃金娘果多糖能够作为一种绿色新型畜禽用免疫增强剂代替抗生素的使用。
具体实施方式
下面根据具体实施方法对本发明的技术方案做进一步说明。
以下所述4个实施例所采用的桃金娘果产地均为广西平乐，经广西植物研究所温放副研究员鉴定为桃金娘根radixrhodomyrti。
实施例1
将桃金娘干果经粉碎机粉碎，过60目筛，烘干至恒重。准确称取桃金娘干果粉末100g，用95%乙醇夹带剂浸湿，放入超临界装置中的萃取釜中，进行萃取前，先将co2制冷液化，设置萃取压力100bar、温度35℃、95%的乙醇夹带剂比例为30%、总流量为25g/min（总流量为co2和夹带剂流量之和）、萃取时间120min，待萃取完毕，关闭co2气瓶，从收集釜中收集所得桃金娘果多糖提取物。将该提取液浓缩至一定体积，加3倍体积无水乙醇进行醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀物蒸干得到粗多糖，称重，根据公式：粗多糖得率=(蒸干后粗多糖质量/原料质量)×100%，计算得到粗多糖得率为4.56%。
实施例2
将桃金娘干果经粉碎机粉碎，过60目筛，烘干至恒重。准确称取桃金娘干果粉末100g，用95%乙醇夹带剂浸湿，放入超临界装置中的萃取釜中，进行萃取前，先将co2制冷液化，设置萃取压力100bar、温度35℃、95%的乙醇夹带剂比例为30%、总流量为25g/min（总流量为co2和夹带剂流量之和）、萃取时间90min，待萃取完毕，关闭co2气瓶，从收集釜中收集所得桃金娘果多糖提取物。将该提取液浓缩至一定体积，加3倍体积无水乙醇进行醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀物蒸干得到粗多糖，称重，根据公式：粗多糖得率=(蒸干后粗多糖质量/原料质量)×100%，计算得到粗多糖得率为3.03%。
实施例3
将桃金娘干果经粉碎机粉碎，过40目筛，烘干至恒重。准确称取桃金娘干果粉末100g，用95%乙醇夹带剂浸湿，放入超临界装置中的萃取釜中，进行萃取前，先将co2制冷液化，设置萃取压力120bar、温度35℃、95%的乙醇夹带剂比例为30%、总流量为25g/min（总流量为co2和夹带剂流量之和）、萃取时间30min，待萃取完毕，关闭co2气瓶，从收集釜中收集所得桃金娘果多糖提取物。将该提取液浓缩至一定体积，加3倍体积无水乙醇进行醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀物蒸干得到粗多糖，称重，根据公式：粗多糖得率=(蒸干后粗多糖质量/原料质量)×100%，计算得到粗多糖得率为2.39%。
实施例4
将桃金娘干果经粉碎机粉碎，过60目筛，烘干至恒重。准确称取桃金娘干果粉末100g，用80%乙醇夹带剂浸湿，放入超临界装置中的萃取釜中，进行萃取前，先将co2制冷液化，设置萃取压力100bar、温度35℃、80%的乙醇夹带剂比例为30%、总流量为25g/min（总流量为co2和夹带剂流量之和）、萃取时间120min，待萃取完毕，关闭co2气瓶，从收集釜中收集所得桃金娘果多糖提取物。将该提取液浓缩至一定体积，加3倍体积无水乙醇进行醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀物蒸干得到粗多糖，称重，根据公式：粗多糖得率=(蒸干后粗多糖质量/原料质量)×100%，计算得到粗多糖得率为3.78%。
通过实施例1至实施例4中本发明的超临界co2萃取桃金娘果中多糖的方法，所计算得到粗多糖得率与现有提取方法制备粗多糖得率对比如表1所示，可以明显看出本发明的制备方法的萃取率明显优于传统方法，值得推广应用。
表1本发明从桃金娘果中萃取得到的粗多糖得率与传统方法从桃金娘果中萃取得到的粗多糖的对比。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或简单替换，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。