一种体外培养细胞的直流电场干预装置的制作方法

本实用新型属于生物医学领域，涉及一种体外培养细胞的直流电场干预装置。

背景技术：

近年来，人们对内生性电场的生物效应的研究逐渐深入，涉及胚胎发育中组织形成、炎症反应、损伤修复以及肿瘤生长等细胞生物学的各个领域，已经证实多种细胞的运动、分裂受到生理内生性电场(EFs)的影响。对生理内生性电场生物学效应的研究需要一个适当的装置，其性能应稳定、重复性好；能够模拟稳定的生理强度的内生性电场，长时间作用于培养的细胞；并能在显微镜下进行形态学观察。现有的装置制作复杂，不能重复使用，电源设备精密而昂贵。参照细胞电泳装置，改进制作了对培养细胞给予外加直流内生性电场干预的装置，可以产生生理强度的直流内生性电场，模拟内生内生性电场，作用于体外培养的细胞，研究内生性电场干预对细胞行为的影响。

技术实现要素：

有鉴于此，本实用新型的目的在于提供一种体外培养细胞的直流电场干预装置，参照细胞电泳装置，改进制作了对培养细胞给予外加直流内生性电场干预的装置，可以产生生理强度的直流内生性电场，模拟内生性电场，作用于体外培养的细胞，研究内生性电场干预对细胞行为的影响。

为达到上述目的，本实用新型提供如下技术方案：

一种体外培养细胞的直流电场干预装置，包括细胞培养室、设于所述细胞培养室上的细胞观察罩、电极装置和直流稳压稳流电源，所述细胞培养室包括一底座和与该底座连接的支撑架体；细胞培养组件，设于所述底座上，包括一观测小室，所述观测小室包括由一块载玻片和一块加厚盖玻片粘贴，并打磨去中心部分的盖玻片，形成用于放入细胞爬片的U型槽，所述U型槽上方还通过VALAP密封有一载玻片；细胞观察罩与所述支撑架体的上端固定连接，所述细胞观察罩顶部设有一适于显微镜探察的观测口，且两端设有用于通过电极的通孔，所述观测小室上方的细胞观察罩还设有用于测量电压的通孔；

所述电极装置为U型琼脂-盐桥电极，所述电极装置的一端通过细胞观察罩的通孔设于细胞培养室内，另一端设置在缓冲液中，所述缓冲液中还放置有与直流稳压稳流电源连接的碳棒电极。

进一步，所述直流稳压稳流电源输出电压0.1-200V，输出电流0.01-10mA，连续可调，所述直流稳压稳流电源上还包括电压电流显示器和计时器。

进一步，所述细胞培养室使用有机玻璃制作。

进一步，所述细胞培养室的底座正中通过铣床铣有一长方形缺损，用于粘贴观测小室。

本实用新型的有益效果在于：改进制作了对培养细胞给予外加直流内生性电场干预的装置，可以产生生理强度的直流内生性电场，模拟内生性电场，作用于体外培养的细胞，结构简单。

附图说明

为了使本实用新型的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本实用新型提供如下附图进行说明：

图1为本实用新型所述的体外培养细胞的直流电场干预装置结构示意图。

附图标记：直流稳压稳流电源1、细胞培养室2、细胞观察罩3、电极装置4、碳棒电极5。

具体实施方式

下面将结合附图，对本实用新型的优选实施例进行详细的描述。

一种体外培养细胞的直流电场干预装置，包括细胞培养室2、设于所述细胞培养室2上的细胞观察罩3、电极装置4和直流稳压稳流电源1，所述细胞培养室2包括一底座和与该底座连接的支撑架体；细胞培养组件，设于所述底座上，包括一观测小室，所述观测小室包括由一块载玻片和一块加厚盖玻片粘贴，并打磨去中心部分的盖玻片，形成用于放入细胞爬片的U型槽，所述U型槽上方还通过VALAP密封有一载玻片；细胞观察罩3与所述支撑架体的上端固定连接，所述细胞观察罩3顶部设有一适于显微镜探察的观测口，且两端设有用于通过电极的通孔，所述观测小室上方的细胞观察罩3还设有用于测量电压的通孔；

所述电极装置4为U型琼脂-盐桥电极，所述电极装置4的一端通过细胞观察罩3的通孔设于细胞培养室2内，另一端设置在缓冲液中，所述缓冲液中还放置有与直流稳压稳流电源1连接的碳棒电极5。

所述直流稳压稳流电源1输出电压0.1-200V，输出电流0.01-10mA，连续可调，所述直流稳压稳流电源1上还包括电压电流显示器和计时器。

所述细胞培养室2使用有机玻璃制作。

所述细胞培养室2的底座正中通过铣床铣有一长方形缺损，用于粘贴观测小室。

观测小室的制备流程包括：取载玻片1片(75mm×25mm)，加厚盖玻片2片(50mm×24mm×0.26-0.34mm)，在载玻片上沿长轴相距18mm平行粘贴加厚盖玻片,用金刚砂打磨去多余的盖玻片，形成一U型槽。进行EFs干预实验时将18mm×18mm盖玻片制成的细胞爬片放入U型槽，再取50mm×25mm载玻片一片，置于U型槽上，用VALAP密封，制成一长方形观测小室，也是直流电通过作用于细胞的空间，其大小为50mm×18mm×0.26-0.34mm。

细胞培养室2的制备流程包括：取有机玻璃制作一内径100mm×25mm×15mm方形细胞培养室2，底板正中用精密铣床铣出一50mm×20mm长方形缺损。将观测小室粘贴在长方形缺损上，制成细胞培养室2。另制一有机玻璃顶盖，其两端各钻一直径6mm孔，用于电极通过。在观测小室上方部位的顶盖上相距50mm钻2个直径1.5mm孔，用于实验中测量电压。细胞培养室2制作完成后按细胞培养用品要求清洗，环氧乙烷灭菌，常温保存。

电极装置4包括：与细胞培养室2相连的电极采用琼脂-盐桥电极。用长度≥300mm，直径6mm玻璃管高温塑型成U型管，清洗及高温灭菌，充灌56℃2％琼脂+Steinberg’s溶液，自然冷却制成。填充琼脂时，避免玻璃管中出现气泡，造成电极电阻增加，影响EFs作用。实验时琼脂-盐桥电极的一端置入细胞培养室2的培养基中，另一端置入碳棒电极5所在的Steinberg’s溶液，通过碳棒电极5和导线连接直流电源。

直流稳压稳流电源1包括：根据实验要求设计输出电压0.1-200V，输出电流0.01-10mA，连续可调，电压电流显示的双稳直流电源，可计时。使用时，将两条输出线连接于碳棒电极5。最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本实用新型进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本实用新型权利要求书所限定的范围。