视黄酸受体相关的孤儿受体(ror)是核受体(nr)超家族的成员，其被鉴定为许多疾病中的重要病理调节剂。ror亚族由rorα，rorβ和rorγ组成。小鼠和人rorγ基因产生两种同种型γ1和γ2，后者最常被称为γt。通常响应于il-23/il-23受体信号传导的rorγt信号传导是将幼稚cd4+t细胞分化成命名为th17的t细胞亚群所必需的，th17不同于典型的th1和th2细胞，并且支持它们的维持。th17细胞产生白细胞介素-17a(il-17)和il-17f。此外，th17细胞产生一系列已知可驱动炎症应答的其他因子，包括肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、白细胞介素-6(il-6)、gm-csf、cxcl1和ccl20。nk细胞和先天淋巴样细胞如淋巴组织诱导物(lti)样细胞表达il-23受体和rorγt并响应刺激和il-23产生il-17。有实质性证据表明，il-23反应性、rorγt和表达il-17的细胞与自身免疫疾病(ai)、炎症性疾病和癌症有关。因此，靶向抑制rorγt可能对减少这些疾病的发病机制是重要的。ai疾病是目前尚无治愈的慢性疾病。ai疾病的治疗典型地涉及通过施用抗炎、止痛或免疫抑制药物来控制疾病过程和减轻症状的尝试。不幸的是，抗炎和止痛药物的使用有时是无效的，并且免疫抑制剂的使用经常导致破坏性的长期副作用。免疫抑制药物最显著的副作用是感染风险增加和较高的癌症风险。已经鉴定了rorγt的天然和合成配体。文献中已经报道了用于ai的针对rorγt的小分子抑制剂。参见wo2015/017335和wo2014/179564。然而，ai疾病的流行加上当前治疗的无效性或破坏性副作用需要为患者提供更多的治疗选择。靶向于rorγt可以通过靶向于致病性免疫细胞而最大化治疗益处同时最小化抑制宿主防御的风险，从而呈现优于当前ai疗法的优势。本发明提供了作为rorγt抑制剂的新化合物。这些新化合物可满足对葡萄膜炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、移植物抗宿主病、克罗恩病、其他炎症性肠病、癌症、银屑病和血清阴性的脊椎关节病例如轴性脊柱关节炎、强直性脊柱炎和银屑病关节炎的有力、有效治疗的需求。本发明提供下式的化合物：其中x独立地为–n–或–ch–；r1和r2均为ch3；或r1和r2可以连接在一起以形成3-元碳环；r3为–cn或–cf3；或其药学上可接受的盐。本发明还提供了治疗患者的银屑病的方法，该方法包含给有此需要的患者施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供了治疗患者的血清阴性的脊椎关节病的方法，该方法包含给有此需要的患者施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐。在所述实施方案中，血清阴性的脊椎关节病是轴性脊柱关节炎、强直性脊柱炎或银屑病关节炎。本发明提供药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在进一步的实施方案中，该组合物还包含一种或多种其他治疗剂。在另一个实施方案中，本发明提供用于治疗银屑病的药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗血清阴性的脊椎关节病的药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在所述实施方案中，血清阴性的脊椎关节病是轴性脊柱关节炎、强直性脊柱炎或银屑病关节炎。此外，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗，特别是用于治疗银屑病。更进一步地，本发明提供了用于治疗银屑病的本发明化合物或其药学上可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗银屑病的药物中的用途。此外，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗，特别是用于治疗血清阴性的脊椎关节病。更进一步，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗血清阴性的脊椎关节病。在另一个实施方案中，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗血清阴性的脊椎关节病的药物中的用途。在所述实施方案中，血清阴性的脊椎关节病是轴性脊柱关节炎、强直性脊柱炎或银屑病关节炎。本发明还包括可用于合成本发明化合物的中间体和方法。本文所用的术语“治疗”是指抑制、减缓、停止或逆转现有症状、病症或障碍的进展或严重程度。术语“脊椎关节病”是指许多慢性关节疾病，其通常涉及脊柱以及韧带和肌腱附着于骨的区域。脊椎关节病有时也称为脊柱关节病或脊椎关节炎。术语“血清阴性的”是指类风湿因子呈阴性的疾病。本发明化合物可反应形成药学上可接受的盐。药学上可接受的盐和制备它们的常用方法是本领域公知的。参见，例如p.stahl等人handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selectionanduse,第2次修订版(wiley-vch,2011)；s.m.berge等人“pharmaceuticalsalts,”journalofpharmaceuticalsciences,第66卷,第1期,1977年1月。本领域技术人员将理解，如(i)中所示的本发明化合物或其药学上可接受的盐由包含至少一个手性中心的核组成，手性中心如下面*所示：尽管本发明考虑了所有单独的对映体以及所述化合物的对映体的混合物，包括外消旋体，但本发明的优选化合物由下面的(ii)表示：或其药学上可接受的盐。本领域技术人员还将理解，所有手性中心的cahn-ingold-prelog(r)或(s)名称将根据特定化合物的取代模式的不同而变化。单一对映异构体或非对映异构体可以从手性试剂开始制备，或者通过立体选择性或立体特异性合成技术制备。或者，可以在合成本发明化合物的任何方便的点通过标准手性色谱或结晶技术从混合物中分离单一对映异构体或非对映异构体。本发明化合物的单一对映体是本发明的优选实施方案。优选将本发明化合物配制成通过各种途径施用的药物组合物。这种药物组合物和制备它们的方法是本领域众所周知的。参见，例如remington:thescienceandpracticeofpharmacy(a.gennaro等人编辑,第22版,pharmaceuticalpress,2012)。更特别优选包含下式化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物，其中x独立地为–n–或–ch–；r1和r2均为ch3；或r1和r2可以连接在一起以形成3-元碳环；r3为–cn或–cf3。本发明化合物的优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐，x独立地为–n–或–ch–；r1和r2均为ch3；或r1和r2可以连接在一起以形成3-元碳环；r3为–cn或–cf3。本发明化合物的另一个优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐，x独立地为–n–或–ch–；r1和r2均为ch3；或r1和r2可以连接在一起以形成3-元碳环；r3为–cn或–cf3。本发明化合物的一个优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐，r1和r2均为ch3；或r1和r2可以连接在一起以形成3-元碳环。本发明化合物的另一个优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐。本发明化合物的另一个优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐。本发明化合物的另一个优选实施方案涉及下式的化合物或其药学上可接受的盐。本发明的一个特别优选的实施方案涉及化合物n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-1-{(1r)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺或其药学上可接受的盐。本发明的另一个特别优选的实施方案涉及化合物n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-1″-{(1r)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺或其药学上可接受的盐。本发明化合物通常在很宽的剂量范围内有效。例如，每天的剂量落在约1mg至1g的范围内。在一些情况下，低于上述范围的下限的剂量水平可能超过足够水平，而在其他情况下，可以使用更大的剂量同时维持有利的益处/风险特征，因此，上述剂量范围不旨在以任何方式限制本发明的范围。应当理解，实际施用的化合物的量将由临床医师根据相关情况确定，包括待治疗的病症，所选择的施用途径，施用的实际化合物，个体患者的年龄、体重、反应，以及患者症状的严重程度。本发明化合物或其盐可通过本领域已知的各种方法制备，其中一些方法在下面的方案、制备例和实施例中示例。所描述的每种途径的具体合成步骤可以以不同方式组合，或与来自不同方案的步骤组合，以制备本发明的化合物或盐。以下方案中每个步骤的产物可通过本领域众所周知的常规方法回收，包括萃取，蒸发，沉淀，色谱，过滤，研磨和结晶。在下面的方案中，除非另有指示，否则所有取代基如上文所定义。本领域普通技术人员能容易地获得所述试剂和原料。另外，以下方案中描述的某些中间体可含有一个或多个氮或氧保护基团。可变保护基团在每次出现时可以相同或不同，这取决于具体的反应条件和要进行的特定转化。保护和脱保护条件是本领域技术人员众所周知的并且在文献中有描述(参见例如“greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis”,第4版,peterg.m.wuts和theodoraw.greene,johnwiley和sons,inc.2007)。某些立体化学中心未被指定，并且在以下方案中已经去除了某些取代基，这是为了清楚起见，并且不意味着以任何方式限制这些方案的教导。单一对映异构体或非对映异构体可以从手性试剂开始制备，或者通过立体选择性或立体特异性合成技术制备。或者，可通过标准手性色谱或结晶技术在合成本发明化合物的任何方便的点通过例如选择性结晶技术或手性色谱法这样的方法从混合物中分离单一对映体或外消旋体(参见例如j.jacques等人"enantiomers,racemates,andresolutions",johnwiley和sons,inc.,1981,和e.l.eliel和s.h.wilen,”stereochemistryoforganiccompounds”,wiley-interscience,1994)。本发明的一些中间体或化合物可具有一个或多个手性中心。本发明考虑了所有单独的对映异构体或非对映异构体，以及所述化合物的对映异构体和非对映异构体的混合物，包括外消旋体。含有至少一个手性中心的本发明化合物优选作为单一的对映异构体或非对映异构体存在。单一的对映异构体或非对映异构体可从手性试剂开始制备，或者通过立体选择性或立体特异性合成技术制备。或者，可通过标准手性色谱或结晶技术从混合物中分离单一的对映异构体或非对映异构体。本领域技术人员将会理解，在某些情况下，由于不同的色谱柱和流动相，对映体或非对映体的洗脱顺序可能不同。名称“异构体1”和“异构体2”分别指第一个和第二个从手性色谱中洗脱的化合物，并且如果在合成早期就开始手性色谱，则相同的名称适用于随后的中间体和实施例。某些缩写定义如下：“acn”是指乙腈；“auc”是指曲线下面积；“bpr”是指背压调节器；“bsa”是指牛血清白蛋白；“dba”是指浅棕色非刺豚鼠；“dcc”是指1,3-二环己基碳二亚胺；“dcm”是指二氯甲烷；“de”指的是非对映异构体过量；“dft”是指密度泛函理论；“dic”是指二异丙基碳二亚胺；“dipea”是指二异丙基乙胺、n-乙基-n-异丙基-丙-2-胺或n,n-二异丙基乙胺；“dmap”是指4-二甲基氨基吡啶；“dmem”是指达尔贝科改良伊格尔培养基；“dmf”是指二甲基甲酰胺；“dmso”是指二甲亚砜；“dna”是指脱氧核糖核酸；“dpbs”是指达尔贝科磷酸盐缓冲盐水；“edci”是指1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；“ec50”是指最大响应一半的有效浓度；“ee”是指对映体过量；“elisa”是指酶联免疫测定；“etoac”是指乙酸乙酯；“etoh”是指乙醇；“et2o”是指乙醚；“ex”是指实施例；“fbs”是指胎牛血清；“g”是指引力；“gal”指β-半乳糖苷酶dna结合结构域；“gpi”是指葡萄糖-6-磷酸异构酶；“hbtu”是指(2-(1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐)；“hec”是指羟乙基纤维素；“hek”是指人胚肾；“hepes”是指4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸；“hoat”是指1-羟基-7-氮杂苯并三唑；“hobt”是指1-羟基苯并三唑水合物；“ic50”是指对该药物可能产生50％最大抑制反应的药物浓度；“il”是指白细胞介素；“离子交换色谱法”是指使用flashscx-2离子交换色谱法、用2mnh3的meoh溶液洗脱的纯化；“ipa”是指异丙醇；“ipam”是指异丙胺；“kd”是指解离常数；“ki”是指抑制常数；“min”指分钟；“mem”指最低基础培养基；“meoh”是指甲醇；“ms”是指质谱；“mtbe”是指甲基叔丁基醚；“nbs”是指n-溴琥珀酰亚胺；“pbmc”指外周血单核细胞；“pbs”是指磷酸盐缓冲盐水，“pem”是指光弹性调节剂；“prep”是指制备例；“rar是指视黄酸受体；“rpmi”是指roswellpark纪念研究所；“rt”指室温；“rt”是指保留时间；“scx”是指强阳离子交换；“sfc”是指超临界流体色谱；是指1-丙膦酸酐溶液，2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物溶液或ppaca；“tea”是指三乙胺；“thf”是指四氢呋喃；“vcd”是指振动循环二色性，且“xrd”是指x-射线粉末衍射。在下面的方案中，除非另有说明，否则所有取代基如前所定义。本领域普通技术人员容易获得试剂和原料。其他试剂和原料可以通过有机和杂环化学的标准技术制备，所述有机和杂环化学的标准技术类似于已知的结构相似的化合物的合成以及随后的制备例和实施例中描述的方法，包括任何新的方法。方案1在方案1中，pg是适合的胺保护基团。胺保护基团是本领域众所周知和理解的，并且可包括氨基甲酸酯和酰胺。本领域技术人员将认识到添加和除去所述保护基团的可选试剂和方法。本领域技术人员将认识到存在多种制备取代的羟乙基噻吩的方法。例如，化合物(1)可以通过下列步骤制备：由取代的2-(3-噻吩基)乙酸酯与取代的环氧化物，在强碱如仲丁基锂或正丁基锂存在下，在-78℃至-60℃温度下，然后用路易斯酸如三氟化硼乙醚合物开环。在步骤1中，可以将取代的羟乙基噻吩(1)和保护的或未保护的4-酮哌啶(2)在酸如三氟乙酸的存在下合并，得到螺噻吩基吡喃并哌啶(3)。如果在步骤1中除去保护基pg，则可以使用标准胺保护基如叔丁氧基羰基保护化合物(3)中的胺。在步骤2中，化合物(3)可以被卤化；例如，化合物(3)可以用nbs和催化剂如二甲氨基吡啶溴化，得到化合物(4)。在步骤3中，可以使化合物(4)在有机金属配体如4,5-双-(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨和催化剂例如乙酸钯(ii)和碱例如dipea的存在下与一氧化碳和胺(5)反应，得到化合物(6)。本领域技术人员将理解，存在可选的配体和催化剂。或者，在步骤3中，可以将化合物(4)的溴化物在标准偶联条件下转化为羧酸并与胺(5)偶联。在适合的偶联剂如和适合的胺碱如dipea的存在下，羧酸与胺(5)的偶联可实现。备选的偶联剂包括hobt、hbtu和hoat和碳二亚胺，例如dcc、dic、edci。可选的碱包括三甲胺和tea。本领域技术人员将认识到，存在许多由羧酸和胺的反应产生的用于酰胺形成的其他方法和试剂。诸如dmap这样的添加剂可用于增强反应。或者，化合物(5)可以在碱(例如tea或吡啶)存在下使用羧酸化合物的取代酰氯进行酰化。在步骤4中，化合物(6)可以按照本领域已知的适当条件脱保护。例如，可以用hcl除去叔丁氧基羰基保护基。可以在有机碱如dipea或无机碱如碳酸钾存在下，用适当取代的甲基嘧啶(7)使游离胺烷基化，其中卤素如br或磺酸酯是离去基团，从而得到式(i)的化合物。本发明化合物的药学上可接受的盐，例如盐酸盐，可以通过例如使本发明化合物的适当的游离碱、适合的药学上可接受的酸如盐酸在本领域众所周知的标准条件下，在溶剂如乙醚中反应形成。另外，这类盐的形成可以在氮保护基脱保护时同时发生。这类盐的形成是本领域众所周知和可以理解的。参见，例如gould,p.l.,“saltselectionforbasicdrugs,”internationaljournalofpharmaceutics,33:201-217(1986)；bastin,r.j.等人“saltselectionandoptimizationproceduresforpharmaceuticalnewchemicalentities,”organicprocessresearchanddevelopment,4:427-435(2000)；和berge,s.m.等人“pharmaceuticalsalts,”journalofpharmaceuticalsciences,66:1-19,(1977)。本发明化合物或其盐可通过本领域已知的各种方法制备，其中一些方法在下面的制备例和实施例中示例说明。所述的每种途径的具体合成步骤可以以不同方式组合以制备本发明化合物或其盐。下面每个步骤的产物可以通过本领域众所周知的常规方法回收，包括萃取、蒸发、沉淀、色谱、过滤、研磨和结晶。本领域普通技术人员可容易地获得所述试剂和原料。以下制备例和实施例进一步说明了本发明，并代表了本发明化合物的典型合成。制备例和实施例制备例11-(噻吩-3-基甲基)环丙醇将异丙醇钛(iv)(25ml,84.4mmol)、然后将在et2o中的溴化乙基镁(3.0mol/l,55ml,170mmol)滴加到用冰浴冷却至0℃的2-(3-噻吩基)乙酸乙酯(10g,58.74mmol)在thf(100ml)中的溶液中。将该反应混合物在0℃搅拌5小时，然后用冰使该反应混合物猝灭。通过硅藻土过滤该反应混合物，用dcm洗涤。用dcm水溶液萃取(2×)，合并有机萃取物，用硫酸镁干燥，过滤，浓缩至干。通过硅胶快速色谱法纯化，用etoac/异己烷(0:100-30:70)梯度洗脱，得到标题产物(7.34g,77％)。质谱(m/z):155(m+h)。制备例22-甲基-1-(噻吩-3-基)丙-2-醇将在thf中的三氯化镧氯化锂复合物(0.6mol/l,60ml,38.412mmol)加入到2-(3-噻吩基)乙酸甲酯(6g,38.41mmol)在thf(60ml)中的溶液中。搅拌该混合物40分钟，然后滴加在et2o中的溴化甲基镁(3.0mol/l,38ml,115.24mmol)，加热回流1小时。冷却至0℃，再通过添加1/1冰冷水和盐水混合物(100ml)猝灭。用dcm(3×100ml)萃取该混合物，合并有机萃取物，通过相分离柱过滤，浓缩至干，得到标题化合物(5.07g,84％)，为黄色液体。质谱(m/z):139(m-oh)。制备例35,5-二甲基螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]在0℃将三氟化硼乙醚合物(1.51ml,5.60mmol)加入到4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.23g,11.2mmol)和2-甲基-1-(噻吩-3-基)丙-2-醇(1.75g,11.2mmol)在甲苯(20ml)中的溶液中。在0℃搅拌1小时，然后在环境温度搅拌18小时。在50℃将该反应体系加热1小时，然后冷却至环境温度，浓缩至干。将残余物溶于少量meoh。使粗物质上scx柱，用meoh洗涤，用2n氨/meoh洗脱产物，然后浓缩至干。用反相色谱法纯化粗物质，得到标题化合物(0.54g,16％)。质谱(m/z):238(m+h)。制备例45,5-环丙基螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶在0℃将三氟化硼乙醚合物(4.6ml,17mmol)加入到4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.23g,11.2mmol)和1-(噻吩-3-基甲基)环丙醇(5.2g,34mmol)在甲苯(52ml)中的溶液中。在0℃搅拌1小时，在环境温度搅拌1小时，在50℃搅拌1小时。在50℃加入hcl(4m的二噁烷溶液,2.1ml,8.4mmol)，在50℃搅拌1小时，然后冷却至环境温度，浓缩至干。将残余物溶于少量meoh。使粗物质上scx柱，用meoh洗涤，用2n氨/meoh洗脱产物，然后浓缩至干，得到标题化合物(6.10g,70％)。质谱(m/z):236(m+h)。制备例5[5,1'-环丙烷][螺[4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1-甲酸叔丁酯将5,1'-环丙烷][螺[4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶(5.81g,22.23mmol)溶于dcm(45ml)冷却至0℃，然后加入三甲胺(15.5ml,111.2mmol)，随后加入二碳酸二叔丁酯(7.35g,33.35mmol)。将该反应体系温热至环境温度，搅拌18小时。用水猝灭，分离各层，用dcm洗涤。合并有机层，用盐水洗涤，通过相分离器，浓缩至干。使用硅胶色谱法用0-15％etoac的己烷溶液纯化，得到标题化合物(4.00g,51％)，为黄白色油状物。质谱(m/z):358(m+na)。制备例65,5-二甲基螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯将5,5-二甲基螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶](0.54g,1.79mmol)溶于dcm(10ml)，冷却至0℃，然后加入三甲胺(0.50ml,3.58mmol)，随后加入二碳酸二叔丁酯(0.48g,2.15mmol)。将该反应体系温热至环境温度，搅拌18小时。用水猝灭，分离各层，用dcm洗涤。合并有机层，用1nhcl、然后用盐水洗涤，使物质通过相分离器，浓缩至干，得到标题化合物(0.34g,53％)，为黄白色油状物。质谱(m/z):238(m-boc+h)制备例72-溴-5,5-环丙基-螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯将[5,1'-环丙烷][螺[4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1-甲酸叔丁酯(1.2g,3.4mmol)在acn(24ml)中的溶液冷却至0℃，加入dmap(0.042g,0.34mmol)和nbs(1.0g,5.8mmol)，搅拌1小时。温热至环境温度，搅拌30分钟，然后加入mtbe/异己烷混合物(1:2,45ml)至反应混合物，搅拌30分钟。过滤出固体。浓缩滤液至干，得到标题化合物(1.55g,77％)，为黄色油状物。质谱(m/z):(79br/81br)436/438(m+na)。制备例82-溴-5,5-二甲基-螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯将5,5-二甲基螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.34g,0.95mmol)在acn(3.4ml)中的溶液冷却至0℃，加入dmap(0.012g,0.095mmol)和nbs(0.19g,1.05mmol)，搅拌1小时。温热至环境温度，浓缩至干。将残余物溶于dcm，用饱和na2so3水溶液洗涤，通过相分离器过滤有机层，浓缩至干，得到标题化合物(0.41g,78％)，为棕色油状物。质谱(m/z):(79br/81br)316/318(m-boc)。制备例95-(乙硫基)吡啶-2-甲腈将5-溴吡啶-2-甲腈(49.42g,270.1mmol)和碳酸钾(113.5g,821.2mmol)溶于1-甲基-2-吡咯烷酮(280ml)，分批加入乙硫醇(26.4ml,356mmol)，历时30分钟，使得温度保持低于50℃。将该反应体系冷却至室温，搅拌过夜。用etoac(1200ml)和水(2200ml)稀释。采集有机层，用盐水(3×300ml)洗涤，用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩，得到标题化合物(44.87g,100％)，为黄白色固体。1hnmr(400.13mhz,d6-dmso)δ8.63(s,1h),7.93(s,2h),3.17(q,j＝7.3,2h),1.29(t,j＝7.3,3h)。制备例105-(乙基磺酰基)吡啶-2-甲腈将5-(乙硫基)吡啶-2-甲腈(44.36g,270.1mmol)溶于无水dcm(540ml)，冷却至-20℃。分成10-12克的部分加入3-氯过苯甲酸(130g,565.0mmol)，历时1小时，维持内部温度在0℃至-10℃。在冷浴中搅拌该反应混合物，使得温热至室温过夜。用1nnaoh(1l)、水、1nnaoh(2×500ml)和盐水洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩，得到标题化合物(49.52g,93％)，为白色固体。1hnmr(400.13mhz,d6-dmso)δ9.20(d,j＝1.9,1h),8.56(dd,j＝2.0,8.1,1h),8.36(d,j＝8.1,1h),3.52(q,j＝7.3,2h),1.16(t,j＝7.5,3h)。制备例111-[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲胺盐酸盐将5-(乙基磺酰基)吡啶-2-甲腈(49.52g,252.4mmol)分成3个16.5g的部分。在n2气氛中，在250mlparr瓶中，加入10％pd/c(1.65g,15.5mmol)至容器中，用meoh(750ml)湿润。加入溶于meoh(750ml)的5-(乙基磺酰基)吡啶-2-甲腈(16.5g,84.09mmol)。加入hcl(6n水溶液,17.1ml,102.6mmol)。密封瓶，用n2吹扫，用h2吹扫，在室温用氢气加压至68.9kpa3小时。用n2吹扫，然后过滤该混合物。对其余的5-(乙基磺酰基)吡啶-2-甲腈部分重复上述步骤。合并全部滤液，减压浓缩，得到标题化合物(59.61g,99％)，为浅褐色固体。质谱(m/z)：201(m+h-hcl)。制备例121-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙醇将2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲醛(11.31mmol,1.992g)溶于thf(56.56ml)，冷却至0℃，缓慢地加入溴化甲基镁(3minet2o)(33.94mmol,11.31ml)。将该反应体系温热至室温，搅拌2.5小时。用1nhcl使反应体系猝灭。加入etoac，用1nhcl洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩，得到标题化合物(1.66g,76.5％)。质谱(m/z):193.0(m+h)。制备例135-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)嘧啶将1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙醇(1.663g,8.655mmol)和三苯膦(3.405g,12.98mmol)溶于dcm(86.55ml)，在室温加入nbs(12.98mmol,2.311g)。3小时后，减压浓缩该反应体系。通过硅胶色谱法纯化得到的残余物，用10％etoac/己烷洗脱，得到标题化合物(1.641g,74.34％)。1hnmr(400.13mhz,d6-dmso)δ9.26(s,2h),5.63(q,j＝7.0hz,1h),2.09(d,j＝7.0hz,3h)。制备例142'-({[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}氨基甲酰基)-5',5'-二甲基-4',5'-二氢-1h-螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-1-甲酸叔丁酯加入在甲苯(4.9ml)中的2-溴-5,5-二甲基-螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.41g,0.74mmol)、(5-乙基磺酰基-2-吡啶基)甲胺盐酸盐(0.26g,1.11mmol)和dipea(0.39ml,2.21mmol)，然后加入乙酸钯(ii)(8.3mg,0.036mmol)和4,5-双-(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(0.043g,0.074mmol)。给该反应体系脱气，再充co(60psi)，然后加热至90℃过夜。冷却至环境温度。通过硅藻土过滤，用dcm(2×20ml)洗涤，浓缩溶剂，得到棕色泡沫体。通过硅胶快速色谱法纯化，用dcm/meoh(100:0-95:5)洗脱，得到标题产物(0.29g,52％)。质谱(m/z):586(m+na)。制备例152'-({[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}氨基甲酰基)-1″h,4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-1″-甲酸叔丁酯加入在甲苯(29ml)中的2-溴-5,5-环丙基-螺[4h-噻吩并[2,3-c]吡喃-7,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁基酯(2.38g,4.19mmol)、(5-乙基磺酰基-2-吡啶基)甲胺盐酸盐(1.49g,6.29mmol)和dipea(2.21ml,12.6mmol)，然后加入乙酸钯(ii)(48mg,0.21mmol)和4,5-双-(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(0.25g,0.42mmol)。给该反应体系脱气，再充co(60psi)，然后加热至90℃过夜。冷却至环境温度。用硅藻土垫过滤，用dcm(2×20ml)洗涤，浓缩溶剂，得到棕色泡沫。通过硅胶快速色谱法纯化，用dcm/meoh(100:0-95:5)洗脱，得到标题产物(1.29g,49％)，为黄褐色固体。质谱(m/z):584(m+na)。基本上通过制备例15的方法制备下列化合物。表1制备例17n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺将hcl的1,4-二噁烷溶液(4mol/l,0.74ml,2.95mmol)加入到2'-({[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}氨基甲酰基)-5',5'-二甲基-4',5'-二氢-1h-螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-1-甲酸叔丁酯(0.291g,0.38mmol)在meoh(10ml)中的溶液中，在50℃加热1小时。浓缩至干，上scx离子交换柱，用meoh洗涤，用2n氨/meoh洗涤，得到标题产物(0.188g,38％)。质谱(m/z)：464(m+h)。制备例18n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺盐酸盐将hcl的1,4-二噁烷溶液(4mol/l,0.86ml,3.43mmol)加入到2'-({[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}氨基甲酰基)-1″h,4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-1″-甲酸叔丁酯(0.43g,0.68mmol)在meoh(5ml)中的溶液中，在50℃加热30分钟。浓缩至干，得到标题产物(0.34g,100％)。质谱(m/z):462(m+h-hcl)基本上通过制备例18的方法制备下列化合物。表2实施例1n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-1-{1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺在微波容器中，将n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺(0.19g,0.28mmol)溶于乙腈(10ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(0.64ml,3.69mmol)，然后加入5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)嘧啶(0.24g,0.96mmol)。密封容器，在60℃加热1小时，然后冷却至环境温度，浓缩至干。将残余物溶于dcm，用水洗涤，通过相分离器过滤，将有机层浓缩至干。通过硅胶快速色谱法纯化残余物，用dcm/meoh(100:0-95:5)洗脱。用反相色谱法纯化，得到标题产物(0.14g,49％)。质谱(m/z):638(m+h)。实施例2n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-1″-{1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺在微波容器中，将n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺盐酸盐(0.34g,0.69mmol)溶于乙腈(5ml)，加入n,n-二异丙基乙胺(0.72ml,4.12mmol)，然后加入5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)嘧啶(0.22g,0.86mmol)。密封容器，在60℃加热1小时，然后冷却至环境温度，浓缩至干。将残余物溶于dcm，上scx柱，用meoh洗涤，然后用2n氨的meoh溶液洗脱。将氨层浓缩至干，通过硅胶快速色谱法纯化，用dcm/meoh(100:0-95:5)洗脱，得到标题产物(0.37g,86％)。质谱(m/z):636(m+h)。基本上通过实施例2的方法制备下列化合物。表3实施例4n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-1-{(1s)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺实施例5n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-1-{(1r)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺将n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-5',5'-二甲基-1-{1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4',5'-二氢螺[哌啶-4,7'-噻吩并[2,3-c]吡喃]-2'-甲酰胺(138mg,0.217mmol)溶于meoh(10.5ml)。用手性hplc色谱法分离异构体[chiralpakia柱(30×250mm)，使用50％acn:50％ipa(含有0.2％ipam)，68ml/min,在225nmuv检测(在250nm监测)]。分析条件：45％ipa(0.2％ipam)的acn溶液，5.0ml/min,chiralpak柱[ia(4.6x150mm)]，在204nm检测。合并纯流分，浓缩至干，冻干，得到淡黄色固体，实施例4,(47mg,34％收率,de>99％,rt＝2.01分钟),质谱(m/z):638(m+h)。实施例5,(45mg,32％收率,de>99％,rt＝2.97分钟),质谱(m/z):638(m+h)。通过vcd指定这些物质的绝对构型。vcd-分光光度计＝chirallr-x，具有dualpem；4.0mg/100μl,分辨率＝4cm-1；pem＝1400cm-1；72000次扫描,24小时；baf2池,路径长度＝100μm。用于molmec计算的力场＝mmf94s,mmff,sybyl。为dft计算设定的方法和基组＝scrf-b3lyp/6-31g(d),scrf-b3pw91/6-31g(d)。置信水平＝99％。实施例6n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-1″-{(1s)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺实施例7n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-1″-{(1r)-1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺将n-{[5-(乙基磺酰基)吡啶-2-基]甲基}-1″-{1-[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]乙基}-4'h-二螺[环丙烷-1,5'-噻吩并[2,3-c]吡喃-7',4″-哌啶]-2'-甲酰胺(369mg,0.581mmol)溶于meoh(22ml)，过滤该溶液。用手性hplc色谱法分离异构体[chiralpakia柱(30×250mm)，使用50％acn:50％ipa(含有0.2％ipam)，130ml/min，每隔9.7min注射2.0ml，在225nmuv检测]。分析条件：45％ipa(0.2％ipam)的acn溶液，5.0ml/min,chiralpak柱[ia(4.6x150mm)]，在204nm检测。合并纯流分，浓缩至干，冻干，得到淡黄色固体，实施例6,(146mg,39％收率,de>99％,rt＝1.61分钟),质谱(m/z):636(m+h)。实施例7,(143mg,37％收率,de>98％,rt＝2.02分钟),质谱(m/z):636(m+h)。通过vcd指定这些物质的绝对构型。vcd-分光光度计＝chirallr-x，具有dualpem；4.0mg/100μl,分辨率＝4cm-1；pem＝1400cm-1；72000次扫描,24小时；baf2池,路径长度＝100μm。用于molmec计算的力场＝mmf94s,mmff,sybyl。为dft计算设定的方法和基组＝scrf-b3lyp/6-31g(d),scrf-b3pw91/6-31g(d)。置信水平＝99％。基本上通过实施例6和7的方法，使用hplc手性纯化以下化合物。表4生物学测定rora、b和g结合抑制剂his标记的人rar相关孤儿受体α(hrora)、人rar相关孤儿受体β(hrorb)和人rar相关孤儿受体γ(hrorg)用于受体-配体竞争结合测定以确定ki值。典型方法如下。受体竞争结合测定在由dpbs(1l)(hyclone#sh30028.03)、2.2gbsa级分v(roche#9048-46-8)、100ml甘油(fischer#56-81-5)和40mldmso(试剂级)构成的缓冲液中进行。最终的孔含有20μg/ml抑肽酶和20μg/ml亮肽素和10μmpefabloc。典型地，受体结合测定包括放射性标记的配体，例如用于α结合的7nm[3h]-25-羟基胆固醇，用于β结合的20nm[3h]-3-[[4-[[3-(2,6-二氯苯基)-5-异丙基-异噁唑-4-基]甲氧基]-n,2-二甲基-苯胺基]甲基]苯甲酸，和用于γ结合的6nm[3h]-25-羟基胆固醇，以及每孔0.5μgrora受体，0.03μgrorb受体，或0.13μgrorg受体。分析典型地以96-孔模式进行。竞争测试化合物以约0.4nm至25μm的不同浓度添加。对于rora和rorg结合，在250nm25-羟基胆固醇存在下测定非特异性结合，对于rorb结合，在250nm3-[[4-[[3-(2,6-二氯苯基)-5-异丙基-异噁唑-4-基]甲氧基]–n,2-二甲基-苯胺基]甲基]苯甲酸存在下测定非特异性结合。将样品、标记物和受体溶液合并在96孔测定板(costar3632)中并在室温下温育过夜，然后将25μl珠(amershamysi(2-5微米)铜his-标签spa珠，#rpnq0096)加入到每个反应体系中，最终珠浓度1mg/孔。将板在室温下在轨道振荡器上混合30分钟。温育4小时后，在wallac计数器中读板。该数据用于使用四参数逻辑拟合计算估计的ic50。用于rora和rorg的[3h]-25-羟基胆固醇的kd和用于rorb结合的[3h]-3-[[4-[[3-(2,6-二氯苯基)-5-异丙基-异噁唑-4-基]甲氧基]-n,2-二甲基-苯胺基]甲基]苯甲酸通过饱和结合来确定。使用cheng-prushoff方程将化合物的ic50值转换为ki。以下示例化合物的结果显示在下表5中。表5实施例编号roraki(nm)rorbki(nm)rorgki(nm)55679±2132,n＝2>125006.96±3.89,n＝273461>125006.401±2.618,n＝28>20390>125006.00±1.81,n＝2平均值±标准偏差这些结果表明，表5的化合物对rorg的选择性超过对rora和rorb。hek293rorggal4受体-报道分子测定作为反向激动剂活性的指示剂，在hek293细胞中进行rar相关的孤儿受体γ(rorg)受体-报道分子测定(rorg-gal4/pgl4.31)。使用fugenetm试剂共转染hek293细胞。将含有gal4结合结构域和萤火虫荧光素酶基因的最小腺病毒启动子上游的报道质粒与组成型表达与酵母gal4dna结合结构域融合的人rorg配体结合结构域的质粒共转染。将细胞在t150cm2烧瓶中不含fbs的mem培养基中转染。温育18小时后，将转染的细胞用胰蛋白酶消化，在96-孔微量滴定板中含有10％fbs的3:1dmem-f12培养基中铺板，温育4小时，然后暴露于不同浓度的约0.05nm至10μm的测试化合物中。与化合物一起温育18小时后，裂解细胞并使用标准技术定量荧光素酶活性。将数据拟合至4参数拟合逻辑以确定ic50值。以下示例化合物的结果显示在下表6中。表6实施例#hic50(nm)516.68±20.28,n＝4722.34±23.79,n＝4834.41±6.01,n＝2平均值±标准偏差这些结果表明表6的化合物是人rorg受体的反向激动剂。pbmcil-17的分泌elisa和细胞titerglo存活率测定通过首先将新鲜血沉棕黄层与等体积的磷酸盐缓冲盐水组合，从全血血沉棕黄层中分离pbmc。然后将35mlpbs/血沉棕黄层溶液缓慢地覆盖在50ml锥形管中的15mlficoll上。在500×g(缓慢加速和减速)下离心30分钟后，弃去顶层血浆并收集沿ficoll界面的细胞层，并合并。用室温rpmi-1640培养基对每个250ml试管填充到顶部。将试管以500×g(缓慢加速和减速)旋转10分钟，通过抽吸除去培养基，并重复洗涤步骤。将细胞重悬浮于冰上的来自lifetechnologies(目录号12648-010)的冰冷的回收细胞培养物冷冻培养基中。将细胞浓度调节至6.67x107细胞/ml。将细胞以-1℃/分钟的速度在具有1亿个细胞的小瓶中缓慢冷冻并储存在液氮中。il-17分泌的刺激和化合物添加通过重悬在1ml完全培养基(含有30mmhepes，100单位/ml青霉素，100μg/ml链霉素，3.25mml-谷氨酰胺，0.2μmβ-巯基乙醇和10％fbs的rpmi-1640)使pbmc解冻，接着滴加2ml、4ml、8ml和16ml完全培养基，适度旋转。将细胞离心5分钟，将细胞沉淀重悬于完全培养基中。通过23号注射器针头和40μm细胞过滤器运行细胞溶液来破碎细胞团块。将每孔10万个细胞加入到384孔聚苯乙烯组织培养物处理的平底板中，总计30μl。将含有抗-人cd3抗体、抗-人cd28抗体、il-23和在完全培养基中制备的化合物的刺激混合物同时以30μl的总体积加入细胞中。对于抗-cd3抗体、抗-cd28抗体和il-23，添加的刺激剂的最终浓度分别为160ng/ml、500ng/ml和5ng/ml，对于dmso，最终浓度为0.3％。用密封膜密封板，并在37℃，95％湿度和5％co2下温育48小时。温育期后，将板以200×g旋转5分钟。将上清液用等体积的1％bsa/pbs按照1：1稀释，并根据试剂盒提供的方案用来自r&d系统(目录号d317e)的人il-17elisa试剂盒测试il-17，但有一个例外-比色法使用底物opd(邻苯二胺二盐酸盐，sigmacat#p6912)代替试剂盒中提供的底物。使用envision多标记板读数器测量492nm处的吸光度。基于il-17标准曲线将a492值转换为il-17的浓度，如下所示：pg/mlil-17＝ec50*[[(顶-底)/(a492-底)]-1](1/-hill)。用于抑制il-17分泌的ic50基于使用标准4-参数拟合的转换值计算，其中最大抑制由没有添加刺激剂、也没有化合物的孔的平均值确定，而最小抑制来自仅用刺激剂、但没有添加化合物的孔的平均值。将等体积的cell细胞存活测试试剂(promegacat#g7573)加入到保留在平板中的细胞中，并在室温下缓慢地摇动温育15分钟后，用envision多标记平板读数器测量发光。通过将100％活性(细胞死亡)设定为零发光单位，最小活性(活细胞的最大数量)设定为仅含有刺激剂且不添加化合物的孔的平均发光单位，从而计算细胞死亡百分比。ic50使用标准的四参数拟合计算。以下示例化合物的结果显示在下表7中。表7实施例编号hpbmcil-17elisa(ec50,nm)细胞titerglo存活(ec50,μm)510.97±7.67,n＝5>1.0714.61±8.24,n＝8>1.0810.94±6.44,n＝6>1.0平均值±标准偏差这些结果表明，表7的化合物在pbmc中抑制抗-cd3/抗-cd28/il-23刺激的il-17分泌，而且没有可测量的细胞毒性作用。当前第1页12