本发明涉及一类含有1,2,5-噁二唑结构的ido(吲哚胺2,3-双加氧酶)抑制剂，其制备方法，包含其的药物组合物，及其在制备用于预防或治疗与ido介导的免疫抑制相关的疾病的药物中的用途。
背景技术：
由于恶性肿瘤的无限制生长与浸润、转移，现今临床采用的三大常规治疗方法(手术、放疗和化疗)无法完全切除或彻底杀灭肿瘤细胞，肿瘤细胞又可通过多种途径逃脱机体免疫系统的监视，因此导致肿瘤转移或复发。肿瘤免疫治疗是通过调动机体免疫系统来增强肿瘤微环境的抗肿瘤免疫力(比如抑制ido介导的肿瘤免疫逃逸机制)，从而控制和杀伤肿瘤细胞。因其安全、有效、不良反应低等特点，成为继手术、放疗、化疗之后肿瘤治疗的新疗法。
ido是目前进入临床研究阶段的最有潜力的肿瘤免疫治疗的小分子药物靶点之一。1967年hayaishi小组(hayaishio.等人,science,1969,164,389–396)首次在细胞内发现ido，它是一种含有亚铁血红素的单体酶，其cdna编码蛋白由403氨基酸组成，分子量为45kda，是催化色氨酸经犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶，广泛分布在人和其他哺乳动物(例如兔、鼠)除肝脏以外的组织中，是肝脏以外唯一可催化色氨酸分解代谢的限速酶。肿瘤微环境中多种细胞的ido高表达，导致色氨酸代谢耗竭，犬尿氨酸水平升高，从而阻断t细胞的活化，诱导氧自由基介导的t细胞凋亡，增强调节性t细胞(treg)介导的免疫抑制作用，促使肿瘤逃脱机体的免疫监视。
除肿瘤外，ido与抑郁症、老年痴呆、白内障等疾病的发生相关。此外，ido还涉及神经病学和精神病学障碍(如心境障碍)以及由ido活化导致色氨酸降解引发的其它慢性疾病，例如病毒感染(如aids)、自身免疫疾病、细菌感染例如莱姆病和链球菌感染等。
newlinkgenetics公司开发的口服小分子ido抑制剂1-甲基色氨酸(1-methyltryptophan)目前在美国进行临床二期实验，主要用于治疗转移性乳腺癌和实体瘤；incyte公司正在研发的ido小分子抑制剂incb-24360在进行临床三期试验，主要用于治疗包括骨髓增生异常综合症在内的多种癌症。bms公司的ido小分子抑制剂bms-986205目前在临床二或三期试验，主要用于治疗包括膀胱癌，黑色素瘤在内的多种癌症。公开的选择性抑制ido的抑制剂专利申请包括cn106883194a、wo2017106062a1等。
ido抑制剂具有治疗和预防多种疾病的巨大潜能，但是目前尚未有抑制ido的药物上市。为了达到更好的治疗效果，更好地满足市场需求，亟需开发出新一代的高效低毒的ido抑制剂用于预防或治疗与ido介导的免疫抑制相关的疾病。
发明概述
在一个方面，本发明提供了一种具有新型结构的安全有效的ido抑制剂。所述ido抑制剂为式i所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，a、r1、x、v、o的定义见发明详述。
在一个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药；以及一种或多种药学上可接受的载体。
在一个方面，本发明提供了选自下列的物质在制备用于预防或治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病的药物中的用途：本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
在一个方面，本发明提供了一种预防或治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病的方法，其包括给有此需要的个体预防或治疗有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，以及任选的一种或多种其他治疗剂。
在一个方面，本发明提供了一种药盒，其包含本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
在一个方面，本发明还提供了一种抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性的方法，包括将有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物施予所述细胞。
在一个方面，本发明还提供了选自下列的物质在制备用于抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性的药盒中的用途：本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
发明详述
化合物
本发明提供了如式i所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中：
a选自
b选自h、卤素、氰基、羟基以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c1-c8烷氧基，c2-c8烯基、3-7元环烷基、3-10元杂环基、5-12元并杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
r1选自任选被取代基取代的下列基团：6-10元芳基和5-10元杂芳基；
u选自-so2-、-so-、-co-、
任选地，当u选自
v选自o、s、nr4和cr4’r4”，其中，r4、r4’、r4”各自独立地选自氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元环烷基、6-10元并环基、5-10元螺环基、5-10元桥环基、3-10元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
任选地，当v为cr4’r4”时，r4’与r4”之间可以和其相连的碳原子一起形成任选被取代基取代的3-8元环烷基或任选被取代基取代的4-8元杂环基；
y选自n、c、cr5、nr5’和cr5”r5”’，其中，r5、r5’、r5”、r5”’各自独立地选自氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元环烷基、6-10元并环基、5-10元螺环基、5-10元桥环基、3-10元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
z选自nr6、nr6’r6”、cr7r7’、cr7”r7”’r7””，其中，r6、r6’、r6”、r7、r7’、r7”、r7”’、r7””各自独立地选自：氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元环烷基、6-10元并环基、5-10元螺环基、5-10元桥环基、3-10元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
任选地，当z为nr6’r6”时，r6’与r6”之间可以和其相连的氮原子一起形成任选被取代基取代的4-8元杂环基；
任选地，当z为cr7r7’或cr7”r7”’r7””时，r7与r7’之间、或者r7”、r7”’与r7””中任意两个之间可以和其相连的碳原子一起形成任选被取代基取代的3-8元环烷基或任选被取代基取代的4-8元杂环基；
w选自nr8、nr9r9’、cr10r10’、cr10”r10”’r10””，其中，r8、r9、r9’、r10、r10’、r10”、r10”’、r10””各自独立地选自：氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元环烷基、6-10元并环基、5-10元螺环基、5-10元桥环基、3-10元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
任选地，当w为nr9r9’时，r9与r9’之间可以和其相连的氮原子连接一起形成任选被取代基取代的下列基团：4-8元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元桥杂环基或5-10元螺杂环基；
任选地，当w为cr10r10’或cr10”r10”’r10””时，r10与r10’之间、或者r10”、r10”’与r10””中任意两个之间可以和其相连的碳原子一起形成任选被取代基取代的3-8元环烷基或任选被取代基取代的4-8元杂环基；
x选自nr13、cr14r15、o、s，其中，r13、r14、r15各自独立地选自h和任选被取代基取代的c1-c4烷基；或者，r14、r15和其相连的碳原子一起形成任选被取代基取代的3-12元环烷基或3-10元杂环基；
r11、r12各自独立地选自氢或任选被取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元环烷基、6-10元并环基、5-10元螺环基、5-10元桥环基、3-10元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基、6-10元芳基、5-10元杂芳基；
o、r、s、t各自独立地选自0-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5、6)，并且r+s+t大于或等于1；
所述“被取代基取代”是指被一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)独立地选自下列的取代基所取代：卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、c1-c4烷基、c2-c4烯基、c2-c4炔基、c1-c4烷氧基、c1-c4烷硫基、3-6元环烷基、磺酰基、亚磺酰基、酰基、酰胺基、磺酰胺基和酯基；
所述3-10元杂环基、5-12元并杂环基、5-12元螺杂环基、5-12元桥杂环基、4-8元杂环基、5-10元并杂环基、5-10元螺杂环基、5-10元桥杂环基各自独立地含有1-4个相同或不同的、选自n、o、s的杂原子。
特别地，本发明提供了如式ii所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，z为nr6或cr7r7’；
w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
y为n或cr5；
b、u、v、x、r1、r5、r6、r7、r7’、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、o、r、s、t如式i所定义。
在某些实施方案中，x选自nr13、o、s，其中，r13如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式iii所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，z为nr6或cr7r7’；
w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
y为n或cr5；
b、u、r1、r5、r6、r7、r7’、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式iii-1所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
b、u、r1、r6、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式iii-2所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
b、u、r1、r7、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式iv所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，z为nr6或cr7r7’；
w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
y为n或cr5；
b、u、r1、r5、r6、r7、r7’、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式v所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，z为nr6或cr7r7’；
w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
b、u、r1、r5、r6、r7、r7’、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了如式vi所示的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，
其中，z为nr6或cr7r7’；
w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””；
x选自nr13、o、s；
y为nr5’或cr5”r5”’；
b、u、v、r1、r5’、r5”、r5”’、r6、r7、r7’、r9、r9’、r10”、r10”’、r10””、r13、o、r、s、t如式i所定义。
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，b选自h、卤素、氰基、羟基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基或c2-c4烯基。
在某些实施方案中，b选自h、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、烯丙基或甲氧基。
在某些实施方案中，b选自h或甲基。
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，r1选自任选被取代基取代的下列基团：6-10元芳基、5-6元单杂芳基和8-10元稠杂芳基。
在某些实施方案中，r1选自任选被取代基取代的苯基。
在某些实施方案中，所述取代基选自：卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、c1-c4烷基。
在某些实施方案中，所述取代基为卤素(例如f、cl、br、i中的一个或多个)。
在某些实施方案中，r1选自
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，x为nr13或s。
在某些实施方案中，r13选自h和任选被取代基取代的c1-c4烷基。
在某些实施方案中，所述取代基选自：卤素、氰基、硝基、羟基、氨基。
在某些实施方案中，x为nh或s。
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，u选自-so2-、-co-、
在某些实施方案中，r3、r3’各自独立地选自h、卤素、氰基、羟基、硝基以及任选被取代基取代的c1-c4烷基。
在某些实施方案中，所述取代基选自：卤素、氰基、硝基、羟基、氨基。
在某些实施方案中，u选自-so2-、-co-、-ch2-。
特别地，本发明提供了式i至iv(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，
特别地，本发明提供了式i至iv所示的化合物：
其中，
特别地，本发明提供了式i所示的化合物：
其中，当a为
特别地，本发明提供了式vi所示的化合物：其中，y为nr5’。
在某些实施方案中，r5’各自独立地选自氢以及任选被取代基取代的下列基团：c1-c4烷基或c2-c4烯基。
在某些实施方案中，所述取代基选自：卤素、羟基或氨基。
在某些实施方案中，y选自-nh-、-n(ch3)-。
特别地，本发明提供了式i、v或vi所示的化合物：
其中，
特别地，本发明提供了式i所示的化合物：
其中，a为
特别地，本发明提供了式v所示的化合物：
其中，
特别地，本发明提供了式vi所示的化合物：
其中，
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，当z为nr6或cr7r7’时，r6、r7、r7’各自独立地选自：氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、c1-c4烷基的取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元饱和环烷基、4-8元不饱和环烷基、6-10元芳基、5-6元单杂芳基、8-10元稠杂芳基。
特别地，本发明提供了式iii-1或iii-2所示的化合物：
其中，r6、r7、r7’各自独立地选自：氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、c1-c4烷基的取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元饱和环烷基、4-8元不饱和环烷基、6-10元芳基、5-6元单杂芳基、8-10元稠杂芳基。
在某些实施方案中，r6、r7、r7’各自独立地选自：氢、氰基、硝基、r11so2、r11co、r11r12nso2、r11r12nco、r11oco以及任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代的c1-c4烷基。
在某些实施方案中，r11、r12各自独立地选自氢、c1-c4烷基、苯基、3-8元饱和环烷基。
在某些实施方案中，r6、r7、r7’各自独立地选自：氢，氰基，硝基，甲磺酰基(ms)，甲酰胺基，磺酰氨基，乙磺酰基、环丙基磺酰基、异丙基磺酰基、环己基磺酰基、苯磺酰基、-ch2cf3，-ch2cn。
在某些实施方案中，z选自nh、n-cn、n-so2ch3、chno2。
特别地，本发明提供了式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，w为nr9r9’或cr10”r10”’r10””，其中，r9、r9’、r10”、r10”’、r10””各自独立地选自：氢和任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基酰胺基、氨基、c1-c4烷基的取代基取代的下列基团：c1-c8烷基、c2-c8烯基、3-8元饱和环烷基、3-8元不饱和环烷基、5-6元单杂芳基、8-10元稠杂芳基。
任选地，当w为nr9r9’时，r9与r9’之间可以和其相连的氮原子连接成4-8元杂环基或4-10元螺杂环基，所述4-8元杂环基或4-10元螺杂环基任选被选自c1-c4烷基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代。
任选地，当w为cr10r10’或cr10”r10”’r10””时，r10与r10’之间、或者r10”、r10”’与r10””中任意两个之间可以和其相连的碳原子连接成3-8元环烷基或4-8元杂环基，所述3-8元环烷基或4-8元杂环基任选被选自c1-c4烷基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代。
在某些实施方案中，w为nr9r9’，其中，r9、r9’各自独立地选自：氢及任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、酰胺基、c1-c4烷基的取代基取代的下列基团：c1-c4烷基、3-6元饱和或不饱和环烷基、苯基；或者，r9与r9’之间可以和其相连的氮原子连接成任选被选自c1-c4烷基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代的下列基团：吗啉基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡咯基或4-10元螺杂环基。
在某些实施方案中，w选自氨基、叔丁氨基、苯氨基、苄氨基、异丙氨基、二甲氨基、吗啉基、哌啶基、甲氨基、环己氨基、乙氨基、环丙氨基、
在某些实施方案中，w选自氨基、甲氨基、二甲氨基、吗啉基、
特别地，本发明提供式i至vi(包括iii-1和iii-2)所示的化合物：
其中，当v选自nr4和cr4’r4”时，r4、r4’、r4”独立地选自氢、氰基、硝基以及任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代的下列基团：c1-c4烷基、c2-c4烯基。
在某些实施方案中，r4、r4’、r4”独立地选自氢、任选被选自卤素、氰基、硝基、羟基、氨基的取代基取代的c1-c4烷基。
在某些实施方案中，r4、r4’、r4”独立地选自氢和甲基。
在某些实施方案中，r4、r4’、r4”各自为氢。
在某些实施方案中，o为0或1。
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物选自但不限于：
制备方法
本发明的又一目的在于提供制备本发明的化合物的方法，所述方法按照以下反应路线1、2、3或4进行：
反应路线1
第一步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下进行；
第二步在有机酸或无机酸存在下进行；
第三步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下进行；
第四步在胺类试剂存在条件下，于20-180℃(例如40-80℃，如65±2℃)的温度下进行。
反应路线2
第一步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下进行；
第二步在有机酸或无机酸存在下进行；
第三步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下，于20-180℃(例如40-80℃，如65±2℃)的温度下进行；
第四步在碱性条件下，于20-180℃(例如40-80℃，如65±2℃)的温度下进行。
反应路线3
第一步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下进行；
第二步在有机酸或无机酸存在下进行；
第三步在碱性条件下，于20-180℃(例如40-80℃，如65±2℃)的温度下进行。
反应路线4
第一步在有机碱或无机碱和/或缩合试剂的存在下进行；
第二步在有机酸或无机酸存在下进行；
第三步在胺类试剂存在条件下，于20-180℃(例如40-80℃，如65±2℃)的温度下进行。
第四步在碱性条件下，于20-180℃(例如40-80℃，如65℃)的温度下进行。
在某些实施方案中，上述反应在惰性气体保护下进行。
在某些实施方案中，反应在质子性溶剂中进行。可在本发明的化合物制备方法中使用的质子性溶剂包括但不限于水、甲醇、乙醇、乙酸等，特别优选叔丁醇。
在某些实施方案中，反应在非质子性溶剂中进行。可在本发明的化合物制备方法中使用的非质子性溶剂包括但不限于乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯、dmf、dmso、dmi、hmpa、1,2-二氯乙烷、乙腈、n-甲基吡咯烷酮等。
可在本发明的化合物制备方法中使用的有机碱包括但不限于叔丁醇钠、三乙胺、dipea、吡啶或dmap；可在本发明的化合物制备方法中使用的无机碱包括但不限于nah、naoh、na2co3或k2co3。
定义
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
如本文中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
如本文中所使用，术语“任选取代”是指基团被取代或未被取代。
如本文中所使用，术语“烷基”定义为直链或支链的饱和脂肪族烃基。在一些实施方案中，烷基具有1至12个，例如1至6个或1至4个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“c1-c12烷基”指具有1至12个碳原子的直链或支链的烷基，包括但不限于c1-c8烷基、c1-c6烷基、c1-c4烷基、c3-c6烷基、c1-c10烷基、c4-c8烷基,例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正十二烷基。
如本文中所使用，术语“烯基”定义为含有至少一个碳碳双键的不饱和脂肪族烃基，其可以是含有2至12个，例如2至6个或2至8个碳原子的直链或支链。例如，如本文中所使用，术语“c2-c12烯基”指含有2至12个碳原子的直链或支链的烯基，包括但不限于c2-c6烯基、c2-c8烯基、c2-c10烯基、c4-c8烯基、c4-c6烯基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、异丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基或1,3-丁二烯基。
如本文中所使用，术语“炔基”定义为含有至少一个碳碳叁键的不饱和直链或支链的脂肪族烃基。在一些实施方案中，炔基具有2至10个，例如2至6个或2至4个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“c2-c4炔基”指含有2至4个碳原子的直链或支链的炔基，例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基或2-丁炔基。
如本文中所使用，术语“环烷基”是指饱和或不饱和的且不具有芳香性的单环环状烷基，所述3-12元环烷基是指含有3-12个环原子的饱和或不饱和的且不具有芳香性的单环环状烷基，包括3-12元饱和环烷基、4-12元不饱和环烷基、3-8元饱和环烷基、4-8元不饱和环烷基等。所述3-8元饱和环烷基包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基等；所述4-8元不饱和环烷基包括但不限于环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己-1,3-二烯、环己-1,4-二烯、环庚烯基、环庚-1,3-二烯基、环庚-1,4-二烯基、环庚-1,3,5-三烯基，环辛烯基、环辛-1,3-二烯基、环辛-1,4-二烯基、环辛-1,5-二烯基、环辛-1,3,5-三烯基、环辛四烯基等。
如本文中所使用，术语“6-12元并环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的碳原子所形成的含有6-12个环原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的并环中的一个环可以为芳香性环，但并环整体不具备芳香性，例如6-10元并环基、6-8元并环基、8-9元并环基等，其实例包括但不限于：二环[3.1.0]己烷基、二环[4.1.0]庚烷基、二环[2.2.0]己烷基、二环[3.2.0]庚烷基、二环[4.2.0]辛烷基、八氢并环戊二烯基、八氢-1h-茚基、十氢化萘基、双环[3.1.0]己-2-烯基、双环[4.1.0]庚-3-烯基、双环[3.2.0]庚-3-烯基、双环[4.2.0]辛-3-烯基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并环己烯基、苯并环戊烯基等。
如本文中所使用，术语“5-12元螺环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用一个碳原子所形成的、含有5-12个环碳原子的饱和或部分饱和的环状结构，包括但不限于7-10元螺环基、6-9元螺环基、7-8元螺环基、9-10元螺环基等，例如
如本文中所使用，术语“5-12元桥环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻碳原子所形成的、含有5-12个环碳原子的饱和或部分饱和的环状结构，包括但不限于7-10元桥环基、6-9元桥环基、7-8元桥环基、9-10元桥环基，例如
如本文中所使用，术语“芳基”指具有共轭π电子系统的全碳单环或稠合环多环芳族基团。在一些实施方案中，芳基具有6至10个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“6-10元芳基”意指含有6至10个碳原子的芳族基团，诸如苯基或萘基。
如本文中所使用，术语“杂芳基”指单环、双环或三环芳族环系，其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，且其包含一个或多个(例如1、2、3或4个)相同或不同的杂原子(例如氧、氮或硫)，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。所述杂芳基包括但不限于5-10元杂芳基，例如5-6元单杂芳基、8-10元稠杂芳基。如本文中所使用，术语“5-6元单杂芳基”意指含有5-6个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。术语“8-10元稠杂芳基”意指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的环状结构。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、噁二唑基、噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物。
如本文中所使用，术语“卤代”是指被“卤素原子”取代，“卤素原子”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
如本文中所使用，术语“烷氧基”意指通过氧原子连接至母体分子部分的如上文所定义的烷基。c1-c4烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基。
如本文中所使用，术语“烷硫基”意指通过硫原子连接至母体分子部分的如上文所定义的烷基。c1-c4烷硫基的代表性实例包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、叔丁硫基。
如本文中所使用，术语“3-10元杂环基”是指至少含有一个杂原子(例如，含有1个、2个、3个、4个或5个)的且环原子数为3-10个的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子或硫原子)可以被氧代。优选地，本发明所述的“3-10元杂环基”含有1-2个杂原子，例如含有1个氮原子、氧原子或硫原子，或含有1个氮原子和1个氧原子。所述“3-10元杂环基”优选“3-8元杂环基”、“3-6元杂环基”、“4-7元杂环基”、“4-6元杂环基”、“3-6元饱和杂环基”、“5-6元饱和杂环基”、“3-8元含氧杂环基”、“3-6元含氧杂环基”、“5-6元含氧杂环基”、“5-6元饱和含氧杂环基”、“3-8元含氮杂环基”、“5-6元含氮杂环基”、“5-6元饱和含氮杂环基”等。“3-10元杂环基”的具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2h-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3h-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基等。
如本文中所使用，术语“5-12元并杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有5-12个环原子的、且至少一个环原子为杂原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的并环中其中一个环可以为芳香性环，但并环整体不具备芳香性，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子或硫原子)可以被氧代，包括但不限于“8-12元并杂环基”、“8-10元并杂环基”、“7-11元并杂环基”等，具体实例包括但不仅限于：吡咯烷基并环丙基、环戊基并氮杂环丙基、吡咯烷基并环丁基、吡咯烷基并吡咯烷基、吡咯烷基并哌啶基、吡咯烷基并哌嗪基、吡咯烷基并吗啉基、哌啶基并吗啉基、苯并吡咯烷基等。
如本文中所使用，术语“5-12元螺杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用一个环原子所形成的、含有5-12个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的环状结构，包括“5-12元饱和螺杂环基”和“5-12元不饱和螺杂环基”。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子或硫原子)可以被氧代。“5-12元螺杂环基”包括例如“5-7元螺杂环基”、“6-10元螺杂环基”、“5-8元螺杂环基”、“6-9元螺杂环基”、“5-10元含氮螺环基”、“5-10元含氧螺杂环基”、“7-10元含氮螺杂环基”、“7-9元含氮螺杂环基”、“8-9元含氧螺杂环基”、“7-9元含氮饱和螺杂环基”、“8-9元含氮饱和螺杂环基”等。具体实例包括但不仅限于：
如本文中所使用，术语“5-12元桥杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻的环原子所形成的、含有5-12个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的环状结构，包括“5-12元饱和桥杂环基”和“5-12元不饱和桥杂环基”。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子或硫原子)可以被氧代。“5-12元桥杂环基”包括例如“6-9元桥杂环基”、“6-10元桥杂环基”、“7-10元桥杂环基”、“7-9元桥杂环基”、“7-9元含氮桥杂环基”、“7-8元含氮桥杂环基”、“5-9元含氮桥杂环基”、“7-9元含氮饱和桥杂环基”等。具体实例包括但不仅限于：
术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。
如果取代基被描述为“任选地被取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的任选的取代基替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的任选的取代基替代。
如果取代基被描述为“独立地选自”一组，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。
如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2个、3个、4个、5个或10个。
除非指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。
本发明还包括本发明化合物的所有药学上可接受的同位素化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括但不限于氢的同位素(例如2h、3h)；碳的同位素(例如11c、13c及14c)；氯的同位素(例如36cl)；氟的同位素(例如18f)；碘的同位素(例如123i及125i)；氮的同位素(例如13n及15n)；氧的同位素(例如15o、17o及18o)；磷的同位素(例如32p)；及硫的同位素(例如35s)。
术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本申请的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。
除非另外指明，否则本发明的化合物意欲可以立体异构体(其包括顺式及反式异构体、光学异构体(例如r及s对映异构体)、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、构象异构体、阻转异构体及其混合物)的形式存在。本发明的化合物可表现一种以上类型的异构现象，且由其混合物(例如外消旋混合物及非对映异构体对)组成。
本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。
还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在，或适当时，以其药学上可接受的衍生物形式存在。在本发明中，药学上可接受的衍生物包括但不限于：药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、代谢物或前药，在将它们向需要其的个体给药后，能够直接或间接提供本发明的化合物或其代谢物或残余物。因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。
本发明的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。例如六氟磷酸盐、葡甲胺盐等。适合的盐的综述参见stahl及wermuth的“handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse”(wiley-vch,2002)。
如本文中所使用，术语“酯”意指衍生自本申请中各个通式或具体化合物的酯，其包括生理上可水解的酯(可在生理条件下水解以释放游离酸或醇形式的本发明的化合物)。本发明的化合物本身也可以是酯。
本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
在本发明的范围内还包括本发明的化合物的代谢物，即在对个体施用本发明的化合物时，个体体内形成的物质。这样的产物可由例如被施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱脂化或酶解等产生。因此，本发明包括本发明的化合物的代谢物，还包括通过使本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的时间的方法所制得的化合物。
本发明在其范围内进一步包括本发明的化合物的前药，其为自身可具有较小药理学活性或无药理学活性的本发明的化合物的某些衍生物，当被给药至身体中或其上时，可通过例如水解裂解转化成具有期望活性的本发明的化合物。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。关于前药的使用的其他信息可参见“pro-drugsasnoveldeliverysystems”，第14卷，acssymposiumseries(t.higuchi及v.stella)及“bioreversiblecarriersindrugdesign,”pergamonpress,1987(e.b.roche编辑，americanpharmaceuticalassociation)。本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前-部分(pro-moiety)(例如“designofprodrugs”，h.bundgaard(elsevier,1985)中所述)”的某些部分替代本发明的化合物中存在的适当官能团来制备。
本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在protectivegroupsinorganicchemistry,ed.j.f.w.mcomie,plenumpress,1973；和t.w.greene&p.g.m.wuts,protectivegroupsinorganicsynthesis,johnwiley&sons,1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。使用本领域已知的方法，在适当的后续阶段可以移除保护基。
本文中，用波浪线“～～”表示化合物结构式中的键，意在表示，该结构包含顺式和反式异构体，或任意比例的顺式和反式异构体的混合物。
药物组合物
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，以及一种或多种药学上可接受的载体。
本发明中，“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
在本发明的药物组合物中，可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当所述药物组合物通过静脉内给药时，水是示例性载体。还可以使用生理盐水和葡萄糖及甘油水溶液作为液体载体，特别是用于注射液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽糖、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。所述组合物还可以视需要包含少量的湿润剂、乳化剂或ph缓冲剂。口服制剂可以包含标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。适合的药学上可接受的载体的实例如在remington’spharmaceuticalsciences(1990)中所述。
本发明的药物组合物可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射(如静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内注射，包括滴注)或经皮给药；或者通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。
对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的药物组合物。所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、可注射溶液剂、酏剂、糖浆剂等。
本发明的化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.01mg至约1000mg，适合地是0.1-500mg，优选0.5-300mg，更优选1-150mg。
根据本发明的一个实施方案，所述药物组合物还可包含一种或多种其它治疗剂，例如抗生素、抗炎性试剂或其它抗肿瘤剂。
本发明的另一目的在于提供一种制备本发明的药物组合物的方法，所述方法包括将本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，与一种或多种药学上可接受的载体组合。
治疗方法和制药用途
本发明的另一目的在于提供本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，其用于预防或治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病的用途。
本发明的另一目的在于提供选自下列的物质在制备用于预防或治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病的药物中的用途：本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
本发明的另一目的在于提供一种预防或治疗与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病的方法，其包括给有此需要的个体预防或治疗有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，以及任选的一种或多种其他治疗剂。所述其他治疗剂包括但不限于抗生素、抗炎性试剂或上文所述的任一种其它抗肿瘤剂。
根据本发明的一个实施方案，所述与吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)介导的免疫抑制相关的疾病包括但不限于肿瘤疾病(例如癌症)，以及由上述疾病引发的相关症状或疾病。
如本文中所使用，术语“肿瘤”是指细胞增殖性疾病状态，包括但不限于：白血病、淋巴瘤等。
如本文中所使用，术语“有效量”是指能够有效实现预期目的的量。例如，预防疾病有效量是指，能够有效预防、阻止或延迟疾病的发生的量。测定这样的有效量在本领域技术人员的能力范围之内。治疗有效量是指，被给药后会在一定程度上缓解所治疗病症的一或多种症状的量。可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案可以根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。
如本文中所使用，术语“治疗”意指逆转、减轻、抑制病症或病况或者所述病症或病况的一或多种症状的进展。
如本文中所使用，术语“预防”意指预防症状、预防症状的潜在的代谢诱因、抑制所述疾病或病症，例如阻止疾病或病症的发生。
如本文中所使用，术语“个体”包括人或非人动物。示例性的人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
药盒和抑制ido活性的方法
本发明的另一目的在于提供一种药盒，其包含本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
在某些实施方案中，所述药盒用于抑制细胞中的吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性。
本发明还提供了一种抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性的方法，包括将有效量的本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物施予所述细胞。
本发明还提供了本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，其用于抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性。
本发明还提供了选自下列的物质在制备用于抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶(ido)活性的药盒中的用途：本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
在某些实施方案中，所述细胞为肿瘤细胞，例如淋巴瘤细胞等。
在某些优选的实施方案中，所述细胞为来自个体的原代细胞或其培养物，或已建立的细胞系。在某些优选的实施方案中，所述个体包括人或非人动物。示例性的人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
有益效果
本发明的化合物，所述化合物的立体异构体、互变异构体或其混合物，所述化合物药学可接受的盐、酯、共晶、多晶型物或溶剂合物，或者所述化合物的代谢物或前药，具有良好的ido酶抑制活性，并且具有良好的选择性，对herg无明显抑制作用，对cyp1a2、cyp2d6以及cyp3a4酶无明显抑制作用。
具体实施方式
实施例
为了使本发明的目的和技术方案更加清楚，以下结合具体实施例进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。并且，下列实施例中未提及的具体实验方法，均按照常规实验方法进行。
本文中的缩写具有以下含义：
化合物的结构通过1hnmr或ms来确证。1hnmr的测定仪器为jeoleclipse400核磁仪，测定溶剂为cd3od、cdcl3或dmso-d6，内标为tms。化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。
ms的测定仪器为agilent(esi)质谱仪，其生产商为agilent，型号为agilent6120b。
制备高效液相色谱使用岛津lc-8a制备液相色谱仪(ymc，ods,250×20mm色谱柱)。
薄层色谱(tlc)使用merck产的铝板(20×20cm)或烟台产gf254(0.4～0.5nm)硅胶板。
反应的监测采用薄层色谱法(tlc)或液相色谱-质谱(lcms)进行。使用的展开剂体系包括：二氯甲烷和甲醇体系、正己烷和乙酸乙酯体系、石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节或者加入三乙胺等进行调节。
微波反应使用biotageinitiator+(400w,rt～300℃)微波反应器。
柱层析一般使用青岛海洋200～300目硅胶为载体。洗脱剂体系包括：二氯甲烷和甲醇体系、正己烷和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节或者加入少量的三乙胺进行调节。
在无特殊说明的情况下，反应的温度为室温(20℃～30℃)
本发明所使用的试剂购自acrosorganics,aldrichchemicalcompany,特伯化学等公司。
实施例1：
n-(3-溴-4-氟苯基)-4–((1-(n'-氰基甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物1)
第一步
将化合物231a(1.0g，2.70mmol)溶解于乙腈(10ml)中，冰水浴下滴加231b(0.51g，2.97mmol)、三乙胺(0.82g，8.1mmol)，加毕室温下反应3h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物231c(0.93g，69.4％)。
第二步
将化合物231c(0.93g，1.88mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，加入氯化氢/二氧六环溶液(5ml)，室温下搅拌反应2h。减压浓缩得化合物231d粗品，直接用于下一步反应。
第三步
将化合物231d(90mg，0.207mmol)、231e(54mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.067g，0.518mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，室温反应2h。反应液冷至室温后，加入1ml氨水溶液，升温至70℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物1(6mg，收率：7.4％)。
ms(esi,m/z):438.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.95(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.0,2.6hz,1h),7.09(s,1h),6.90(d,j＝6.3hz,1h),6.76(m,1h),4.29(s,1h),4.22(t,j＝8.1hz,2h),3.86(dd,j＝9.3,4.6hz,2h).
实施例2：
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基氨基甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)硫基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物2)
第一步
将化合物231a(1.0g，2.70mmol，采用专利申请“cn106565696a”公开的方法制备而得)溶解于乙腈(10ml)中，冰水浴下滴加238a(0.51g，2.97mmol)、三乙胺(0.82g，8.1mmol)，加毕室温下反应3h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物238b(0.93g，69.4％)。
第二步
将化合物238b(0.3g，1.88mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，加入氯化氢/二氧六环溶液(5ml)，室温下搅拌反应2h。减压浓缩得化合物238c粗品235mg，直接用于下一步反应。
第三步
将化合物238c(100mg，0.22mmol)、231e(58mg，0.24mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.072g，0.56mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，室温反应2h。反应液冷却至室温后，加入1ml氨水溶液，升温至70℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物2(5mg，收率：5.1％)。
ms(esi,m/z):455.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.81(s,1h),8.98(s,1h),7.18(m,3h),7.13(dd,j＝5.9,2.7hz,1h),6.77(m,1h),4.47(m,2h),4.40(m,1h),3.90(dd,j＝9.6,4.3hz,2h).
实施例3：
4-((1-(1-氨基-2-硝基乙烯基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物3)
第一步
将化合物231c(0.93g，1.88mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，加入氯化氢/二氧六环溶液(5ml)，室温下搅拌反应2h。减压浓缩后所得粗品，溶于四氢呋喃/水(10ml/10ml)中、冰水浴下加入一水合氢氧化锂(0.16g，3.76mmol)，加毕室温下搅拌反应2h。后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物240a(0.56g，56.0％)。
第二步
将化合物240a(59mg，0.159mmol)、240b(48.2mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.11g，0.81mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至50℃反应2h。反应液冷却至室温后，加入1ml氨水溶液，升温至50℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物3(1mg，收率：2.1％)。
ms(esi,m/z):457.2[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.96(s,1h),8.40(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.98(d,j＝6.2hz,1h),6.76(dd,j＝7.2,4.5hz,1h),6.13(s,1h),4.40(s,2h),4.31(t,j＝8.5hz,3h),3.94(s,3h).
实施例4：
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(1-吗啉代-2-硝基乙烯基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物4)
将化合物240a(59mg，0.159mmol)、化合物240b(48.2mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.11g，0.81mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至50℃反应2h。反应液冷却至室温后，加入1ml吗啉，升温至50℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物4(1mg，收率：1.9％)。
ms(esi,m/z):527.3[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95(s,1h),8.39(s,3h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.99(d,j＝6.3hz,1h),6.76(dd,j＝7.2,4.5hz,1h),6.19(s,1h),4.44(m,2h),4.37(s,1h),4.07(m,2h),3.66(d,j＝4.6hz,5h),3.50(d,j＝8.2hz,5h),3.26(d,j＝4.2hz,5h).
实施例5：
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物5)
第一步
将化合物242a(0.50g，1.34mmol)、化合物242b(0.40g，2.00mmol)、四氢呋喃(6ml)依次加入到25ml反应瓶中，室温下搅拌均匀后，加入2nnaoh(4ml，8.00mmol)，于室温下反应6h。后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物242c(0.33g，收率：66.53％)。
第二步
将化合物242c(0.33g，0.66mmol)、二氯甲烷(6ml)、三氟乙酸(1ml)依次加入到25ml单口瓶中，加毕，于室温下反应1h。减压浓缩得化合物242d粗品0.50g，直接用于下一步。
第三步
将化合物242d(0.30g，0.61mmol)、二氰胺钠(1.08g，12.12mmol)、叔丁醇(20ml)加入到50ml反应瓶中，85℃下回流过夜，后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物5(26mg，两步收率：9.67％)。
ms(esi,m/z):466.1[m+h+].
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.45(s,1h),8.91(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.16–7.08(m,3h),6.81–6.73(m,1h),6.21(d,j＝7.2hz,1h),3.92(d,j＝13.5hz,2h),3.62–3.50(m,1h),3.04(t,j＝11.5hz,2h),1.92(d,j＝10.0hz,2h),1.40(dd,j＝20.4,9.9hz,2h).
实施例6
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基-n-甲基胺基甲脒基)氮杂环丁-3-基)胺基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物6)
第一步
将化合物243a(1.0g，2.70mmol)溶解于乙腈(10ml)中，冰水浴下滴加243b(0.51g，2.97mmol)、三乙胺(0.82g，8.1mmol)，加毕室温下反应3h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物243c(0.93g，69.4％)。
第二步
将化合物243c(0.93g，1.88mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，加入氯化氢/二氧六环溶液(5ml)，室温下搅拌反应2h。减压浓缩得到的粗品，溶于四氢呋喃/水(10ml/10ml)中、冰水浴下加入一水合氢氧化锂(0.16g，3.76mmol)，加毕室温下搅拌反应2h。后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物243d(0.56g，56.0％)。
第三步
将化合物243d(200mg，0.27mmol)、243e(48.2mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.11g，0.81mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至50℃反应2h。反应液冷却至室温后，加入1ml甲胺水溶液，升温至50℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物6(45.0mg，收率：18.4％)。
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1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.95(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.13(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.98–6.90(m,2h),6.79–6.71(m,1h),4.51–4.43(m,2h),4.35–4.26(m,1h),4.14–4.02(m,2h),2.66–2.57(m,3h).
实施例7
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(1-(甲胺基)-2-硝基乙烯基)氮杂环丁-3-基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物7)
将化合物231d(100mg，0.25mmol)、240b(54.3mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml甲胺乙醇溶液，升温至55℃反应2h，反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物7(23.0mg，收率：19.5％)。
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1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),9.78(s,1h),8.97(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.13(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.94(d,j＝6.8hz,1h),6.79–6.70(m,1h),6.17(s,1h),4.61–4.52(m,2h),4.43–4.36(m,1h),4.19–4.10(m,2h),2.96(d,j＝5.4hz,3h).
实施例8
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(1-(二甲胺基)-2-硝基乙烯基)氮杂环丁-3-基)胺基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物8)
将化合物231d(100mg，0.25mmol)、240b(54.3mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml二甲胺水溶液，升温至55℃反应2h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物8(6.0mg，收率：4.9％)。
ms(esi,m/z):485.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.98(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.13(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.93(d,j＝6.4hz,1h),6.79–6.70(m,1h),6.22–6.16(m,1h),4.48–4.39(m,3h),4.09–4.01(m,2h),2.90(s,6h).
实施例9
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n'-(甲基磺酰基)脒基)氮杂环丁-3-基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物9)
将化合物231a(100mg，0.25mmol)、247b(65.0mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml氨水溶液，升温至55℃反应2h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物9(34.0mg，收率：27.6％)。
ms(esi,m/z):491.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.46(s,1h),8.96(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.98(s,2h),6.91(d,j＝6.5hz,1h),6.81–6.75(m,1h),4.34–4.26(m,1h),4.28–4.21(m,2h),3.93–3.81(m,2h),2.79(s,3h).
实施例10
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n'-(甲基磺酰基)甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物10)
将化合物242d(200mg，0.50mmol)、化合物247b(100mg，0.50mmol)、dipea(1.00ml，6.00mmol)、acn(5.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入氨水(1.50ml)，70℃反应1.5h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物10(10mg，收率：3.86％)。
ms(esi,m/z):519.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.58(s,1h),8.91(s,1h),7.24–7.13(m,3h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.77(m,1h),6.25(d,j＝7.4hz,1h),3.96(d,j＝13.6hz,2h),3.66–3.51(m,1h),3.04(t,j＝11.3hz,2h),2.81(s,3h),1.94(d,j＝10.0hz,2h),1.42(dd,j＝20.4,9.8hz,2h).
实施例11
4-((1-(1-氨基-2-硝基乙烯基)哌啶-4-基)氨基)-n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物11)
将化合物242d(100mg，0.25mmol)、化合物240b(42mg，0.25mmol)、dipea(0.42ml，2.51mmol)、dmf(3.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入氨水(1.00ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物11(35mg，收率：28.7％)。
ms(esi,m/z):485.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.43(s,1h),10.41–9.18(m,1h),8.92(s,1h),8.74–7.48(m,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.80–6.75(m,1h),6.73(s,1h),6.24(d,j＝7.3hz,1h),3.78(d,j＝13.9hz,2h),3.67–3.57(m,1h),3.14(t,j＝11.4hz,2h),1.97(d,j＝11.7hz,2h),1.47(dd,j＝20.5,9.8hz,2h).
实施例12
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基-n-甲基氨基甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-n'-羟基1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物12)
将化合物242d(50mg，0.13mmol)、化合物243e(20mg，0.14mmol)、dipea(0.21ml，1.26mmol)、dmf(2.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应1.5h，加入33％甲胺乙醇溶液(1.00ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物12(8mg，收率：13.25％)。
ms(esi,m/z):480.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.91(s,1h),7.31–7.24(m,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.82–6.75(m,1h),6.22(d,j＝7.3hz,1h),3.85(d,j＝13.5hz,2h),3.62–3.49(m,1h),3.07(t,j＝11.3hz,2h),2.84(d,j＝4.5hz,3h),1.97(d,j＝10.3hz,2h),1.54–1.39(m,2h).
实施例13
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n-甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物13)
将化合物231a(100mg，0.25mmol)、247b(65.0mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml甲胺水溶液，升温至55℃反应2h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物13(41mg，收率：28.9％)。
ms(esi,m/z):505.3[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.95(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),6.88(d,j＝6.0hz,1h),6.82–6.74(m,2h),4.40(t,j＝8.3hz,2h),4.28(d,j＝6.0hz,1h),4.02(dd,j＝9.1,4.7hz,2h),2.81(d,j＝5.9hz,3h),2.69(t,j＝5.5hz,3h).
实施例14
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n，n-二甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物14)
将化合物231a(100mg，0.25mmol)、247b(65.0mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml二甲胺水溶液，升温至55℃反应2h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物14(21mg，收率：18.2％)。
ms(esi,m/z):519.3[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.96(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.86(d,j＝6.2hz,1h),6.77(ddd,j＝8.9,4.1,2.8hz,1h),4.43–4.35(m,2h),4.27(d,j＝6.2hz,1h),4.00(dd,j＝9.4,4.9hz,2h),2.93(d,j＝4.2hz,6h),2.79(d,j＝7.9hz,3h).
实施例15
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n-甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物15)
将化合物242d(200mg，0.50mmol)、化合物247b(150mg，0.75mmol)、dipea(0.83ml，5.00mmol)、acn(5.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入33％甲胺乙醇溶液(1.50ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得化合物15(48mg，收率：18.05％)。
ms(esi,m/z):533.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.91(s,1h),7.22–7.14(m,2h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.83–6.74(m,1h),6.22(d,j＝7.3hz,1h),3.81(d,j＝13.4hz,2h),3.64–3.50(m,1h),3.07(t,j＝11.4hz,2h),2.85–2.81(m,6h),1.97(d,j＝10.3hz,2h),1.49(dd,j＝20.2,10.0hz,2h).
实施例16
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n-甲基-n'-硝基甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物16)
将化合物242d(200mg，0.50mmol)、化合物240b(125mg，0.75mmol)、dipea(0.83ml，5.00mmol)、dmf(5.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入33％甲胺乙醇溶液(1.50ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物16(37mg，收率：14.86％)。
ms(esi,m/z):499.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),9.25–8.75(m,2h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.82–6.74(m,1h),6.36(s,1h),6.24(d,j＝7.2hz,1h),3.64–3.52(m,1h),3.48(d,j＝13.4hz,2h),3.08(t,j＝11.0hz,2h),2.91(d,j＝3.7hz,3h),2.02(d,j＝10.0hz,2h),1.62–1.49(m,2h).
实施例17
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(1-(二甲基氨基)-2-硝基-乙烯基)哌啶-4-基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物17)
将化合物242d(100mg，0.25mmol)、化合物240b(42mg，0.28mmol)、dipea(0.40ml，2.50mmol)、dmf(3.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入33％二甲胺水溶液(2.00ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物17(33mg，收率：25.78％)。
ms(esi,m/z):513.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.92(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.82–6.74(m,1h),6.25–6.19(m,2h),3.63–3.52(m,1h),3.43(d,j＝12.2hz,2h),3.15(t,j＝11.2hz,2h),2.89(s,6h),2.02(d,j＝9.9hz,2h),1.58(d,j＝10.2hz,2h).
实施例18
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(1-吗啉基-2-硝基乙烯基)哌啶-4-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物18)
将化合物242d(150mg，0.38mmol)、化合物240b(94mg，0.57mmol)、dipea(0.63ml，3.75mmol)、dmf(5.00ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入吗啉(2.00ml)，70℃反应1.5h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物18(47mg，收率：22.38％)。
ms(esi,m/z):555.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.92(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.83–6.72(m,1h),6.29–6.14(m,2h),3.68(s,4h),3.62–3.54(s,1h),3.45(s,2h),3.32–3.11(m,6h),2.03(d,j＝10.5hz,2h),1.60(s,2h).
实施例19
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n-甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)硫代)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物19)
第一步
将化合物231a(638mg，1.7mmol)、238a(390mg，2.06mmol)、thf(8ml)加入50ml反应瓶中，再加入2mol/l的氢氧化钠溶液(5ml)，室温反应1h。向反应体系中加入30ml水和20ml乙酸乙酯，后处理所得粗品用柱层析法分离纯化得化合物257c(780mg，收率：94％)。
第二步
将化合物257c(780mg，1.6mmol)、ea(10ml)和4mol/l的盐酸二氧六环溶液(10ml)加入100ml反应瓶中，室温反应2h。将反应液减压浓缩得化合物257d(700mg，粗品)。
第三步
将化合物257d(100mg，0.24mmol)、247b(56mg，0.28mmol)、n,n-二异丙基乙胺(90mg，0.7mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应1h。加入甲胺水溶液(1ml)，于55℃反应1h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物19(46mg，收率：37％)。
ms(esi,m/z):524[m+h]+。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.82(s,1h),8.99(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12–7.14(m,1h),6.88(s,1h),6.76–6.78(m,1h),4.62–4.64(m,2h),4.43–4.35(m,1h),4.05–4.08(m,2h),2.82(d,j＝4.4hz,3h),2.70(d,j＝4.6hz,3h).
实施例20
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n'-(甲基磺酰基)甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)硫基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物20)
将化合物257d(100mg，0.24mmol)、247b(56mg，0.28mmol)、n,n-二异丙基乙胺(90mg，0.7mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。继续加入氨水(1ml)，于至55℃反应2h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物20(29mg，收率：24％)。
ms(esi,m/z):510[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.81(s,1h),8.99(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.12–7.14(m,1h),7.05(s,2h),6.76–6.78(m,1h),4.51–4.34(m,3h),3.88-3.10(m,,2h),2.80(s,3h).
实施例21
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n，n-二甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)哌啶-4-基)氨基)-n'-羟基-1,2-5-噁二唑-3-甲脒(化合物21)
将化合物242d(100mg，0.25mmol)、化合物247b(75mg，0.38mmol)、dipea(0.42ml，2.50mmol)、acn(3ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应过夜，加入33％二甲胺乙醇溶液(1ml)，70℃反应2h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物21(2mg，收率：1.47％)。
ms(esi,m/z):547.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.99(s,1h),8.18(s,1h),7.22(t,j＝8.8hz,1h),7.07(dd,j＝6.0,2.6hz,1h),6.84–6.77(m,1h),6.52(d,j＝7.0hz,1h),3.93(d,j＝13.2hz,2h),3.01–2.91(m,3h),2.57(s,6h),2.34(s,3h),1.93(d,j＝10.2hz,2h),1.44–1.29(m,2h).
实施例22
4-((1-(1-氨基-2-硝基乙烯基)氮杂环丁烷-3-基)硫基)-n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物22)
将化合物257d(100mg，0.24mmol)、240b(50mg，0.31mmol)、n,n-二异丙基乙胺(90mg，0.7mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应1h。加入氨水(1ml)，于55℃反应1h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物22(10mg，收率：9％)。
ms(esi,m/z):476[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.81(s,1h),8.99(s,2h),8.11–7.62(m,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12-7.14(m,1h),6.82–6.75(m,1h),6.13(s,1h),4.51–4.53(m,3h),4.01–4.03(m,2h).
实施例23
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(1-(甲氨基)-2-硝基-乙烯基)氮杂环丁烷-3-基)硫基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物23)
将化合物257d(100mg，0.24mmol)、240b(50mg，0.31mmol)、n,n-二异丙基乙胺(90mg，0.7mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应1h。加入甲胺水溶液(1ml)，于55℃反应1h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物23(16mg，收率：14％)。
ms(esi,m/z):490[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.83(s,1h),9.77(s,1h),9.00(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12–7.14(m,1h),6.81–6.74(m,1h),6.18(s,1h),4.79(t,j＝8.7hz,2h),4.46–4.48(m,1h),4.26–4.28(m,2h),2.97(d,j＝5.4hz,3h).
实施例24
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n，n-二甲基-n'-(甲基磺酰基)甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)硫基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物24)
将化合物257d(100mg，0.24mmol)、247b(56mg，0.28mmol)、n,n-二异丙基乙胺(90mg，0.7mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应1h。加入二甲胺水溶液(1ml)，于55℃反应1h。后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物24(10mg，收率：9％)。
ms(esi,m/z):538[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.84(s,1h),8.99(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12–7.14(m,1h),6.81–6.74(m,1h),4.61–4.63(m,2h),4.37–4.39(m,1h),4.07–4.09(m,2h),2.93(s,6h),2.81(s,3h).
实施例25
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(((甲基磺酰基)脒基)(吗啉基)甲基)-氮杂环丁基-3-基)胺基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物25)
第一步
将化合物247b(50mg，0.25mmol)、吗啉(28.7mg，0.33mmol)、n,n-二异丙基乙胺(97.0mg，0.75mmol)、乙醇(4ml)加入微波反应管中，升温至85℃反应6h。反应液冷至室温，减压浓缩溶剂至干，得化合物263a(87mg，粗品)。
第二步
将化合物263a(87mg，粗品)、240a(90.0mg，0.24mmol)、n,n-二异丙基乙胺(93.0mg，0.72mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至60℃反应8h。反应液冷至室温，倾倒入冰水中，后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物25(5.0mg，两步总收率：2.2％)。
ms(esi,m/z):561.1[m+h]+。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.96(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.86(d,j＝6.2hz,1h),6.81–6.70(m,1h),4.40(t,j＝8.4hz,2h),4.34–4.24(m,1h),4.08–3.97(m,2h),3.69–3.58(m,4h),3.42–3.37(m,4h),2.83(s,3h).
实施例26
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基-n-甲基甲脒基)-氮杂环丁-3-基)-巯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物26)
将化合物257d(100mg，0.26mmol)、243e(49.6mg，0.34mmol)、n,n-二异丙基乙胺(100.8mg，0.78mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml甲胺甲醇溶液，升温至55℃反应1h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物26(63.0mg，收率：52.1％)。
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1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.82(s,1h),9.00(s,1h),7.22–7.12(m,2h),7.09–7.01(m,1h),6.82–6.73(m,1h),4.69(t,j＝8.6hz,2h),4.52–4.35(m,1h),4.12(dd,j＝9.2,4.6hz,2h),2.65(d,j＝4.4hz,3h).
实施例27
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基-n,n-二甲基脒)-氮杂环丁-3-基)巯基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物27)
将化合物257d(100mg，0.26mmol)、243e(49.6mg，0.34mmol)、n,n-二异丙基乙胺(100.8mg，0.78mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(4ml)加入50ml反应瓶中，升温至55℃反应2h。反应液冷至室温，加入1ml二甲胺水溶液，升温至55℃反应1h。反应液倾倒入冰水中，后处理所得粗品用高效液相色谱法分离纯化得到化合物27(34.0mg，收率：27.2％)。
ms(esi,m/z):483.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.82(s,1h),9.00(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.14(dd,j＝6.0,2.7hz,1h),6.82–6.73(m,1h),4.79–4.64(m,2h),4.48–4.28(m,1h),4.16(dd,j＝9.7,4.9hz,2h),2.93(s,6h).
实施例28
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-(((r)-1-(n'-(甲基磺酰基)甲脒基)吡咯烷-3-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物28)
第一步
将化合物231a(2g，5.40mmol)、274b(2g，10.70mmol)、thf(15ml)加入到100ml反应瓶中，再加入2n氢氧化钠溶液(16ml)，室温反应1h。后处理所得粗品经柱层析色谱法分离纯化得化合物274c(1.50g，收率：57.46％)。
第二步
将化合物274c(1.5g，3.10mmol)、ea(15ml)和4mol/l盐酸二氧六环溶液(15ml)加入到100ml反应瓶中，室温反应过夜。直接将反应液减压浓缩至干，加入10ml无水乙醚室温打浆，抽滤并干燥得到274d(1.20g，收率：92.31％)。
第三步
将化合物274d(100mg，0.24mmol)、化合物247b(53mg，0.26mmol)、dipea(0.40ml，2.38mmol)、dmf(3ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至70℃反应3h，加入氨水(1ml)，70℃下反应3h。后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得到化合物28(30mg，收率：24.79％)。
ms(esi,m/z):505.0[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.93(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.12(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),6.95(s,2h),6.81–6.75(m,1h),6.45(s,1h),4.09(s,1h),3.63(dd,j＝11.5,5.9hz,1h),3.49–3.38(m,2h),3.36(d,j＝4.0hz,0h),3.33–3.30(m,1h),2.81(s,3h),2.17(s,1h),2.01(s,1h).
实施例29
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-(((r)-1-(-n'-氰基甲脒基)吡咯烷-3-基)氨基)-n'-羟基1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物29)
将化合物274d(200mg，0.48mmol)、化合物243e(78mg，0.53mmol)、dipea(0.80ml，4.76mmol)、dmf(5ml)依次加入到25ml反应瓶中，升温至50℃反应1h，加入氨水(2ml)，70℃下反应3h。后处理所得粗品经薄层色谱法分离纯化得到化合物29(8mg，收率：3.70％)。
ms(esi,m/z):452.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.93(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.11(dd,j＝6.1,2.7hz,1h),7.01(s,2h),6.81–6.74(m,1h),6.43(d,j＝4.5hz,1h),4.05(s,1h),3.59(dd,j＝11.5,5.8hz,1h),3.39(t,j＝7.6hz,2h),3.35(s,0h),3.33–3.29(m,1h),2.15(s,1h),1.99(s,1h).
实施例30
n-(3-溴-4-氟苯基)-4-((1-(n'-氰基甲脒基)吡咯烷-3-基)氨基)-n'-羟基1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物30)
第一步
将化合物231a(2g，5.38mmol)、276b(2g，10.7mmol)、thf(15ml)加入100ml反应瓶中，再加入2mol/l的氢氧化钠溶液(16ml)，室温反应1h。向反应体系中加入30ml水和20ml乙酸乙酯，后处理所得粗品经柱层析色谱法分离纯化得化合物276c(1.5g，收率：57％)。
第二步
将化合物276c(1.5g，3.01mmol)、ea(10ml)和4mol/l的盐酸二氧六环溶液(10ml)加入100ml反应瓶中，室温反应2h。将反应液减压浓缩得化合物276d(1.2g，粗品)。
第三步
将化合物276d(200mg，0.48mmol)、243e(84mg，0.58mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.4ml，2.4mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至50℃反应1h。继续加入氨水(2ml)，于50℃反应1h。后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得到化合物30(50mg，收率：23％)。
ms(esi,m/z):452.1[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.93(s,1h),7.18(t,j＝8.8hz,1h),7.10–7.12(m,1h),7.01(s,2h),6.76–6.78(m,1h),6.43(s,1h),4.07(s,1h),3.57–3.59(m,1h),3.38-3.40(m,2h),3.34–3.28(m,1h),2.14–3.16(m,1h),2.00–2.02(m,1h).
实施例31
n-(3-溴-4-氟苯基)-n'-羟基-4-((1-(n'-(甲基磺酰基)甲脒基)吡咯烷-3-基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物31)
将化合物276d(200mg，0.48mmol)、247b(84mg，0.58mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.4ml，2.4mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，升温至50℃反应1h，加入氨水(2ml)，于至50℃反应1h。后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得到化合物31(40mg，收率：16％)。
ms(esi,m/z):507[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.93(s,1h),7.19(t,j＝8.8hz,1h),7.10–7.12(m,1h),6.94(s,2h),6.81–6.75(m,1h),6.44(s,1h),4.09(s,1h),3.57–3.59(m,1h),3.47–3.39(m,2h),3.33–3.30(m,1h),2.81(s,3h),2.08–2.10(m,2h).
实施例32：
n-(3-氯-4-氟苯基)-4–((1-(n'-氰基甲脒基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-n'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物32)
第一步
将化合物231a(0.4g，1.22mmol)溶解于乙腈(10ml)中，冰水浴下滴加296a(0.341g，1.83mmol)、三乙胺(0.82g，8.1mmol)，加毕室温下反应3h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经硅胶柱层析法分离纯化得化合物296b(0.579g，69.4％)。
第二步
将化合物296b(0.579g，1.88mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，加入氯化氢/二氧六环溶液(5ml)，室温下搅拌反应2h。减压浓缩得化合物296c粗品，直接用于下一步反应。
第三步
将化合物296c(0.35mg，0.831mmol)、240b(0.206mg，1.25mmol)、n,n-二异丙基乙胺(0.268g，2.08mmol)、n,n-二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶中，室温反应2h。反应液冷至室温后，加入1ml二甲胺水溶液，升温至70℃反应2h。反应液倒入冰水中，后处理所得粗品经高效液相色谱法分离纯化得化合物32(6mg，收率：8.4％)。
ms(esi,m/z):484.2[m+h+]。
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),9.22(s,1h),8.94(s,1h),7.22(t,j＝9.1hz,1h),6.99(dd,j＝6.5,2.7hz,1h),6.73(ddd,j＝8.9,4.0,2.8hz,1h),6.46(d,j＝7.6hz,1h),6.35(s,1h),3.80(dd,j＝15.6,7.9hz,1h),3.71(dt,j＝15.4,7.9hz,1h),2.89(d,j＝3.5hz,6h),2.83(ddd,j＝9.5,7.3,2.7hz,2h),2.16–2.03(m,2h).
化合物33-55参考上述实施例相应合成方法制备
生物学试验
实验例1.ido酶抑制活性测试
采用ntrc的nfkgreenscreentmhido试剂盒测试本发明化合物对ido酶的抑制活性。
实验方法：
酶反应：将待测化合物用dmso梯度稀释后，再用0.05mm磷酸盐缓冲液(ph＝6.5)稀释50倍(dmso终浓度为2％)，以每孔5μl的量加入384孔板中，再加入10μlido酶溶液后在室温下避光反应30min，然后在每个反应孔中加入5μl0.4mm的l-色氨酸，在室温下避光反应60min。不加酶的试验孔为阴性对照组。
显色和检测：每个反应孔中加入5μlnfkgreen，在加盖密闭条件下于37℃反应4h。酶标仪检测荧光值：ex./em.＝400±25nm/510±20nm。
数据处理：化合物抑制率(％)＝(1-savg/cavg)×100％；savg为待测化合物荧光读数平均值，cavg为阴性对照组荧光读数平均值，ic50由graphpadprism软件计算。
结果：
表1.本发明化合物对ido酶活性抑制ic50
由表1可以看出，本发明的化合物对ido酶活性具有明显的抑制作用。
实验例2.hela细胞内ido抑制活性测试
采用nfkgreen法测试本发明化合物对细胞内ido活性的抑制。
试剂：nfkgreen荧光染料(ntrc)；l-色氨酸(sigma-aldrich)；recombinanthumanifn-gammaprotein(r&dsystems)
实验方法：
细胞体外单层培养：将hela细胞加入培养液中(含10％胎牛血清的dmem)，于37℃、含5％co2的培养箱中培养。一周2-3次用胰酶-edta进行消化处理传代。当细胞呈指数生长期时，收取细胞，计数，铺板。调整细胞浓度(hela细胞10000个/孔)，以70μl/孔的量接种细胞至96孔板相应孔中。在96孔板盖上做好标记放至培养箱中培养24h。设置不加细胞的试验孔作为阴性对照组。
化合物配制：用dmso溶解待测化合物制成母液，吸取适量母液至培养液中混匀，将药品溶液配制为相应的孵育浓度。每孔加入10μl配制好的化合物溶液，继续孵育细胞1h。
ido刺激以及底物添加：在96孔板相应孔中加入10μl500ng/mlifn-γ(recombinanthumanifn-gammaprotein)(溶解于培养液中)，加入10μl无菌的0.5mm的l-色氨酸溶液(溶解于20mmhepes)，孵育48h。
检测：孵育完成后，将25μl上清转入384孔板中，每孔加入5μlnfkgreen，加盖在37℃孵育4h。酶标仪检测荧光值：ex./em.＝400±25nm/510±20nm。
数据处理：化合物抑制率(％)＝(1-savg/cavg)×100％；savg为待测化合物荧光读数平均值，cavg阴性对照组荧光读数平均值，ic50由graphpadprism软件计算。
结果：
表2.本发明化合物对hela细胞内ido酶活性抑制ic50
由表2可以看出，本发明化合物对hela细胞内ido酶具有明显的抑制作用。
实施例3：herg抑制实验
采用predictortmhergfluorescencepolarizationassaykit(生产厂家：thermofisher)，按照试剂盒说明测试本发明化合物对herg钾离子通道的抑制作用，测试浓度为1μm和10μm，试验结果见表3。
实施例4：cyp酶抑制试验
cyp450是药物代谢中最重要的酶系统，参与代谢的酶与药物相互作用，其中最主要的为cyp1a2、cyp2d6和cyp3a4。在对cyp450酶的抑制测试中，采用p450-glotmcyp1a2screeningsystem、
表3.本发明化合物对cyp/herg的抑制作用ic50(μm)
表4.本发明化合物对cyp3a4的抑制作用
表3结果表明本发明的化合物9、24、36和37对cyp1a2，cyp2d6酶无明显抑制作用；对herg也无明显的抑制作用，导致心脏qt间期延长的可能性小。表4结果表明本发明的化合物9对cyp3a4酶几乎没有抑制活性；化合物24对cyp3a4酶的抑制率小于50％。
除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。