本发明涉及一种肝素钠的加工工艺，具体涉及一种提高精品肝素钠产量的加工工艺。
背景技术：
肝素钠(heparinsodium)能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。其作用机制比较复杂，主要通过与抗凝血酶ⅲ(at-ⅲ)结合，而增强后者对活化的ⅱ、ⅸ、x、ⅺ和ⅻ凝血因子的抑制作用，其后果涉及阻止血小板凝集和破坏、妨碍凝血激活酶的形成、阻止凝血酶原变为凝血酶，抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而发挥抗凝作用。
目前，制备肝素钠时，采用的原料为猪小肠粘膜，由于屠宰场没有进行有效处理，小肠外面含有大量的油脂，从小肠上刮取的粘膜中含有部分的油脂，油脂会包裹树脂，在树脂的表面形成一层油膜，使得树脂的交换能力大大降低，会降低肝素钠的产率，进而降低了肝素钠的提纯率；此外，肠衣中也含有部分肝素钠，以往直接将肠衣经过简单腌制后就当制作香肠的原料使用，这样往往造成肠衣无法有效利用，降低了猪小肠获得肝素钠的收率。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是目前利用小肠粘膜制备精品肝素钠，生产效率低，目的在于提供一种提高精品肝素钠产量的加工工艺，解决目前利用小肠粘膜制备精品肝素钠，生产效率低的问题。
本发明通过下述技术方案实现：
一种提高精品肝素钠产量的加工工艺，包括以下步骤：
s1、将带有肠衣、油脂的肠粘膜在搅拌机中加水搅碎，制得浆液，过滤后获得肠粘膜浆液、滤渣；
s2、在肠粘膜浆液中加水搅拌20-30分钟后静置，降至浆液液面的油脂凝固，除去肠粘膜浆液液面的油脂后，缓慢升温至24-30℃，过滤获得肠粘膜清液，继续降温至2-8℃进行冷藏；
s3、采用油脂清洗剂对步骤s2中的滤渣进行反复清洗后加水粉碎，获得肠衣浆液，调节肠衣浆液的ph至7-8，在肠衣浆液中加入盐度为4-5度的盐水，搅拌均匀后静置20-40分钟，加入树脂进行搅拌吸附，采用氯化钠水溶液对树脂进行洗脱，收集洗脱液；
s4、将步骤s2中冷藏后的肠粘膜浆液与步骤s3中的洗脱液混合，获得混合浆液，在混合浆液中加入氯化钠溶液搅拌，静置后在混合溶液中加入树脂进行吸附；
s5、采用氯化钠盐溶液对步骤s4中的树脂反复洗脱3-5次，获得洗脱液；
s6、在步骤s5中的洗脱液内加入浓度为85-90％的乙醇，混合液静置析出沉淀，过滤收集沉淀，制得肝素钠粗品；
s7、将步骤s6中的肝素钠粗品加水溶解，获得肝素钠溶液，将肝素钠溶液的ph调节至8-9，缓慢升温至80-84℃，保温30-60分钟后继续升温至90-92℃，保温30-40分钟后降温至25-30℃，静置3-4小时后过滤获得肝素钠滤液；
s8、对肝素钠滤液进行提纯，获得精品肝素钠。
本发明增加了肠衣作为肝素钠制备的原料，提高了小肠的利用率，增加了从小肠中提取的粗品肝素钠，进而提高了精品肝素钠的产率；本发明对肠衣及肠粘膜进行除油处理，能够有效提高树脂的吸附效率，进而提高了精品肝素钠的产率。本发明对粗品肝素钠进行升温降温处理，能够提高肝素钠的热稳定性。
步骤s8中肝素钠滤液的提纯方法包括以下步骤：肝素钠滤液中加入氯化钠溶液，调节ph值为8-9，加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解液离心，得肝素钠预处理液；肝素钠预处理液中加入乙醇，获取沉淀物；将沉淀物采用氯化钠溶液进行溶解，降温至28-32℃后加入双氧水，氧化后高速离心弃去不溶杂质，然后加至强碱型阴离子交换树脂柱中吸附、洗涤、洗脱，收集肝素钠洗脱液，在洗脱液中加入乙醇进行沉淀，沉淀物干燥后获得精品肝素钠。
本发明通过盐解、酶解、离心、树脂吸附、乙醇沉淀等步骤对粗品肝素钠进行提纯处理，能够有效提高精品肝素钠的纯度及产量。
步骤s4中肠粘膜浆液与洗脱液的重量比为3：1-2。本发明控制了肠粘膜浆液与肠衣洗脱液的配比，肠衣中含有的肝素钠量少，本发明在提高肝素钠产量的同时，避免大量杂质影响粗品肝素钠的提纯。
所述油脂清洗剂包括以下重量份数的组分：2-5份丙二醇甲醚、8-12份琥珀酸二辛酯磺酸钠、10-15份偏硅酸钠、20-25份石油烷基芳基磺酸盐、5-15份柠檬酸、3-8份乙二胺四乙酸、2-9份多聚氧化乙烯壬酚醚。本发明设计了一种新的油脂清洗剂，能够有效地去除油脂，还不会破肝素钠。
所述油脂清洗剂包括以下重量份数的组分：5份丙二醇甲醚、10份琥珀酸二辛酯磺酸钠、12份偏硅酸钠、23份石油烷基芳基磺酸盐、10份柠檬酸、5份乙二胺四乙酸、6份多聚氧化乙烯壬酚醚。本发明优选了各组分的最佳配比。
步骤s1中带有肠衣、油脂的肠粘膜与水的重量比为1：4-8。水量多，杂质、油脂等物质才容易漂浮在水面上，避免油脂包裹在肠衣、粘膜浆液中。
步骤s2中肠粘膜清液的冷藏温度为5℃。本发明对肠粘膜清液进行冷藏，对肠粘膜进行保鲜，避免肠粘膜变质。
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
1、本发明一种提高精品肝素钠产量的加工工艺增加了肠衣作为肝素钠制备的原料，提高了小肠的利用率，增加了从小肠中提取的粗品肝素钠，进而提高了精品肝素钠的产率；
2、本发明一种提高精品肝素钠产量的加工工艺对肠衣及肠粘膜进行除油处理，能够有效提高树脂的吸附效率，进而提高了精品肝素钠的产率；
3、本发明一种提高精品肝素钠产量的加工工艺对粗品肝素钠进行升温降温处理，能够提高肝素钠的热稳定性。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。
实施例1
本发明一种提高精品肝素钠产量的加工工艺，包括以下步骤：
s1、将带有肠衣、油脂的肠粘膜在搅拌机中加水搅碎，制得浆液，过滤后获得肠粘膜浆液、滤渣；
s2、在肠粘膜浆液中加水搅拌20-30分钟后静置，降至浆液液面的油脂凝固，除去肠粘膜浆液液面的油脂后，缓慢升温至24-30℃，过滤获得肠粘膜清液，继续降温至5℃进行冷藏；
s3、采用油脂清洗剂对步骤s2中的滤渣进行反复清洗后加水粉碎，获得肠衣浆液，调节肠衣浆液的ph至7-8，在肠衣浆液中加入盐度为4-5度的盐水，搅拌均匀后静置20-40分钟，加入树脂进行搅拌吸附，采用氯化钠水溶液对树脂进行洗脱，收集洗脱液；
s4、将步骤s2中冷藏后的肠粘膜浆液与步骤s3中的洗脱液混合，获得混合浆液，在混合浆液中加入氯化钠溶液搅拌，静置后在混合溶液中加入树脂进行吸附；
s5、采用氯化钠盐溶液对步骤s4中的树脂反复洗脱3-5次，获得洗脱液；
s6、在步骤s5中的洗脱液内加入浓度为85-90％的乙醇，混合液静置析出沉淀，过滤收集沉淀，制得肝素钠粗品；
s7、将步骤s6中的肝素钠粗品加水溶解，获得肝素钠溶液，将肝素钠溶液的ph调节至8-9，缓慢升温至80-84℃，保温30-60分钟后继续升温至90-92℃，保温30-40分钟后降温至25-30℃，静置3-4小时后过滤获得肝素钠滤液；
s8、对肝素钠滤液进行提纯，获得精品肝素钠。
步骤s8中肝素钠滤液的提纯方法包括以下步骤：肝素钠滤液中加入氯化钠溶液，调节ph值为8-9，加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解液离心，得肝素钠预处理液；肝素钠预处理液中加入乙醇，获取沉淀物；将沉淀物采用氯化钠溶液进行溶解，降温至28-32℃后加入双氧水，氧化后高速离心弃去不溶杂质，然后加至强碱型阴离子交换树脂柱中吸附、洗涤、洗脱，收集肝素钠洗脱液，在洗脱液中加入乙醇进行沉淀，沉淀物干燥后获得精品肝素钠。
步骤s4中肠粘膜浆液与洗脱液的重量比为3：1-2。本发明控制了肠粘膜浆液与肠衣洗脱液的配比，肠衣中含有的肝素钠量少，本发明在提高肝素钠产量的同时，避免大量杂质影响粗品肝素钠的提纯。
步骤s2中肠粘膜清液的冷藏温度为5℃。本发明对肠粘膜清液进行冷藏，对肠粘膜进行保鲜，避免肠粘膜变质。
本发明增加了肠衣作为肝素钠制备的原料，提高了小肠的利用率，增加了从小肠中提取的粗品肝素钠，进而提高了精品肝素钠的产率；本发明对肠衣及肠粘膜进行除油处理，能够有效提高树脂的吸附效率，进而提高了精品肝素钠的产率。本发明对粗品肝素钠进行升温降温处理，能够提高肝素钠的热稳定性。本发明通过盐解、酶解、离心、树脂吸附、乙醇沉淀等步骤对粗品肝素钠进行提纯处理，能够有效提高精品肝素钠的纯度及产量。
实施例2
基于实施例1，所述油脂清洗剂包括以下重量份数的组分：2份丙二醇甲醚、8份琥珀酸二辛酯磺酸钠、10份偏硅酸钠、20份石油烷基芳基磺酸盐、5份柠檬酸、3份乙二胺四乙酸、2份多聚氧化乙烯壬酚醚。本发明设计了一种新的油脂清洗剂，能够有效地去除油脂，还不会破肝素钠。
实施例3
基于实施例1，所述油脂清洗剂包括以下重量份数的组分：5份丙二醇甲醚、12份琥珀酸二辛酯磺酸钠、15份偏硅酸钠、25份石油烷基芳基磺酸盐、15份柠檬酸、8份乙二胺四乙酸、9份多聚氧化乙烯壬酚醚。本发明设计了一种新的油脂清洗剂，能够有效地去除油脂，还不会破肝素钠。
实施例4
基于实施例1，所述油脂清洗剂包括以下重量份数的组分：5份丙二醇甲醚、10份琥珀酸二辛酯磺酸钠、12份偏硅酸钠、23份石油烷基芳基磺酸盐、10份柠檬酸、5份乙二胺四乙酸、6份多聚氧化乙烯壬酚醚。本发明设计了一种新的油脂清洗剂，能够有效地去除油脂，还不会破肝素钠。
实施例5
基于上述实施例，本实施例测定了使用实施例2-4中油脂清洗剂的肝素钠产率及纯度，测试结果如表1。粗品肝素钠产率以猪小肠为原料来计算，精品肝素钠产率以粗品肝素钠作为原料计算。
表1肝素钠产率及纯度检测
实施例4中对油脂的去除效果最好，制备得到的精品肝素钠的产率及纯度最佳。
实施例6
基于上述实施例，本实施例以实施例4所述的油脂清洗剂作为清洗剂，测定了不同肠粘膜与水的加量情况下的清洗效率，测试结果如表2；试验1：带有肠衣、油脂的肠粘膜与水的重量比为1：4；试验2：带有肠衣、油脂的肠粘膜与水的重量比为1：8；对比例1：带有肠衣、油脂的肠粘膜与水的重量比为1：3；对比例2：带有肠衣、油脂的肠粘膜与水的重量比为1：9。油脂清洗剂使用率为每千克小肠使用的油脂清洗剂量，单位为：l/kg。
表2油脂清洗效率检测
本发明中优选了肠粘膜与水的重量比，在1：4-8内是最佳的配比范围，油脂的使用量少，清洗时间能够保证在15分钟以内，加入过多的水也不会造成很大的有益效果，反而会造成水的浪费，本发明在保证油脂较好的去除效率的同时，节约能耗。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。