本发明涉及药物化学技术，具体涉及一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与应用。
技术背景
恶性肿瘤，是目前严重威胁人类生命健康的疾病之一。全球该病的发生率和死亡率都在不断递增。其中，中国已成为重灾区，恶性肿瘤负担已不容忽视。此外，癌症还给全球带来了巨大的经济损失，是世界顶尖的“经济杀手”。因此，癌症的预防和治疗已经成为医药领域研究的重点。
目前，化学药物治疗法是肿瘤治疗的主要手段之一。化疗药物具有细胞毒作用，能够抑制肿瘤细胞的增长与繁殖从而杀死肿瘤细胞。然而，传统的化疗药物选择性差，极易对正常机体产生较大的损伤，使得治疗效果难以达到预期；同时，肿瘤细胞对化疗药物易产生耐药性，从而降低药物的活性，因此急需开发新型的抗肿瘤药物。天然药物成分广泛存在于自然界中，因其独特的结构而成为化疗药的主要来源之一。目前，已有部分具有优异抗肿瘤活性的天然药物被开发并上市。
雷公藤红素(Celastrol，CEL)是从中药雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook F.)根皮中分离得到的具有多种生物活性的五环三萜类化合物。研究表明，雷公藤红素的抗肿瘤活性已成为近年来研究的热点。大量体内外活性研究表明，雷公藤红素可以有效抑制多种肿瘤的生长，是一种广谱的抗肿瘤活性化合物。据报道，雷公藤红素可以调节多种靶点，可通过不同的作用机制发挥其抗肿瘤作用[R.Kannaiyan,M.K.Shanmugam,G.Sethi.Cancer Letters,2011,303,9-20]。然而，雷公藤红素存在靶向选择性较差、活性不够强等缺陷，难以直接应用于临床。因此，对雷公藤红素进行结构优化具有重要的研究价值。
肉桂酸(CA)是广泛存在于植物中的一种苯丙烯酸类化合物，具有多种药理活性，例如抗氧化、抗肿瘤、抗菌、等。研究发现，CA对多种癌症细胞具有抗增殖活性[Curr.Med.Chem.2011,18(11):1672-1703]。另外，在天然产物的结构修饰中，CA也广泛用于提高母体化合物的抗癌活性[Eur.J.Med.Chem.2017,133:319-328；Eur.J.Med.Chem.2016,107:192-203；Chem.Cent.J.2016,10:11.]。
综合上述内容，尽管雷公藤红素具有较明确的抗肿瘤活性，但其活性仍有待提高。因此，采用骈合原理，以肉桂酸及其衍生物作为结构单元，对雷公藤红素进行结构修饰，旨在寻找活性更强的雷公藤红素肉桂酸酯类衍生物。
技术实现要素：
发明目的：本发明提供了一种雷公藤红素衍生物及其制备方法，还提供了雷公藤红素衍生物的抗肿瘤制药用途。
技术方案：本发明的所述的一种如通式I所示的雷公藤红肉桂酸酯类衍生物：
其中R1-R3选自H、烷基、含杂原子的烷基、卤素或硝基；
X选自含2至5个碳原子的饱和或不饱和直链脂肪烃片段。
进一步的，通式I所示化合物优选自下列化合物I-1到I-48：
本发明通式I所示化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据下式制备得到中间体化合物II：
(2)制备雷公藤红素肉桂酸酯类衍生物I：
雷公藤红素与步骤(1)制备所得中间体化合物II或其无机酸盐在缚酸剂下成酯，得到目标物雷公藤红素肉桂酸酯类衍生物I：
步骤(1)和步骤(2)的反应体系所采用的溶剂选自DMF、丙酮、乙腈、甲苯、苯、二甲苯、1,4-二氧六环、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或乙醚中的一种或多种。
步骤(2)中，所述缚酸剂选自碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸氢钠、三乙胺或吡啶中的一种或多种。
步骤(2)中，反应温度为0℃～60℃。
步骤(2)中，与中间体化合物II成盐的无机酸选自盐酸、氢溴酸或氢碘酸。
进一步的，所述化合物I-1到I-48的制备过程中涉及的步骤(1)中间体化合物II-1～II-48的制备方法可以采用如下步骤：
II-1～II-15：将相应的溴代醇(0.5-1.5mM,0.5-1.5eq)溶于6mL的DCM中，依次分别加入肉桂酸衍生物(0.5-2.5mM，1.0-1.5eq)，EDCI(0.5-3.0mM，1.0-2.0eq)和DMAP(0.2-1.5mM，0.5-1.0eq)，室温下搅拌7小时，减压浓缩后溶于DCM，依次用5％NaHCO3水溶液和饱和NaCl溶液洗涤有机层，无水硫酸钠干燥后，旋干，经硅胶柱色谱(PE/EA＝16:1-4:1)纯化，真空干燥过夜得固体。
II-16～II-30：将氰乙酸(10.0-15.0mM,0.5-1.5eq)溶于45mL甲苯中，加入NH4OAc(5.0-15.0mmol,0.5-1.0eq)和不同对位取代苯甲醛(5.0-15.0mmol,0.5-1.0eq)，100℃下加热回流12h，过滤，固体干燥。后续步骤同中间体II-1～II-15的制备。
II-31～II-45：将乙醛酸(7.0-15.0mM,0.5-1.0eq)溶于50mL MeOH中，加入K2CO3(10.0-30.0mM，0.5-2.0eq)和不同取代的苯乙腈(7.0-15.0mM,0.5-1.0eq)，60℃加热回流6h，过滤，滤饼经二氯甲烷洗涤后取出，水溶，加1M盐酸溶液酸化至pH＝4，过滤，固体干燥得黄绿色固体。后续步骤同中间体II-1～II-15的制备。
II-46～II-48：将乙醛酸(7.0-15.0mM,0.5-1.0eq)溶于50mL MeOH中，加入K2CO3(10.0-30.0mM，0.5-2.0eq)和不同取代的苯乙腈(7.0-15.0mM,0.5-1.0eq)，60℃加热回流6h，过滤，滤饼经二氯甲烷洗涤后取出，水溶，加1M盐酸溶液酸化至pH＝4，过滤，固体干燥得黄绿色固体。取适量黄绿色固体(0.2-1.0mM,0.5-2.0eq)，依次加入K2CO3(1.0-4.0mM,1.0-4.0eq)，Bu4N+Br-(0.02-0.05mM,0.05-0.1eq)和顺-1,4-二溴-2-丁烯(3.0-6.0mM,2.0-4.0eq)溶于无水丙酮中，搅拌7h，经减压浓缩后加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和NaCl溶液洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，抽滤，蒸干，经硅胶柱色谱(PE/EA＝16:1-6:1)纯化，得白色固体。
步骤(2)中，目标物雷公藤红素(异)阿魏酸酯类衍生物I-1到I-48的制备可以采用如下步骤：
将雷公藤红素(0.05-0.15mM，1.0eq)溶于2-5ml溶剂中，加入缚酸剂(0.20-0.75mM，4.0-5.0eq)，搅拌，加入步骤(1)制备所得中间体化合物II(0.15-0.60mM，3.0-4.0eq)，60-65℃加热回流反应。直至TLC检测显示反应完毕，加入40-60ml CH2Cl2稀释，水洗5-6次。有机相旋干，柱层析(PE/EA＝8:1-2:1)，真空干燥过夜。
进一步的，含有效剂量的本发明化合物与药学上可接受的载体制成的药物组合物也在本发明的保护范围内。本发明化合物可以单独或与一种或一种以上药用载体制成不同剂型，例如片剂、胶囊剂、颗粒剂、液体制剂等，以供临床口服、注射或局部用药。在这些不同制剂中，本发明化合物的含量可以是0.1％-99.9％。本发明化合物的给药量可以是0.001-10000mg/kg/0.3天，根据临床需要可以适度调整。
上述雷公藤红素肉桂酸酯类衍生物I在制备抗肿瘤药物中的用途也在本发明的保护范围内。本发明化合物可以单独或与临床上常用的抗肿瘤药物如抗代谢药物、烷化剂、抗肿瘤抗生素、抗肿瘤植物药、激素类联合应用，另外还可以与放射治疗联合应用。
有益效果：本发明首次公开了一种全新的雷公藤红素衍生物，还公开了其制备方法，所采用的制备方法反应条件温和、所用试剂低毒、原料易得、后处理方便、产率高。根据药理实验表明，本发明雷公藤红素衍生物的肿瘤抗活性优良、稳定性好，可作为抗肿瘤药物应用，为后续的成药研发提供了理论基础。
具体实施方案
为进一步阐明本发明，下面列举一系列实施例。这些实施例是例证性的，不应当理解为对本发明的限制。
实施例1：中间体II-1的制备
将2-溴乙醇(1mM,1eq,70.9μl)溶于6mL的DCM中，依次分别加入肉桂酸(1.2mM,1.2eq,177.6mg)，EDCI(1.5mM,1.5eq,287.6mg)和DMAP(0.5mM,0.5eq,61.1mg)，室温下搅拌7小时，减压浓缩后溶于DCM，依次用5％NaHCO3水溶液和饱和NaCl溶液洗涤有机层，无水硫酸钠干燥后，旋干，经硅胶柱色谱(PE/EA＝16:1)纯化，得白色固体137.2mg，产率54％。
ESI-MS：溴同位素特征峰255.0、257.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例2：I-1的合成
将45.0mg(0.1mM,1.0eq)雷公藤红素溶于2ml DMF，加入42.0mg NaHCO3(0.5mM,5.0eq)，搅拌7h，加入中间体II-1 76.2mg(0.3mM,3.0eq)，60℃加热回流反应。直至TLC检测显示反应完毕，加入50ml CH2Cl2稀释，用水萃取，弃去水层，有机层用饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，溶剂蒸干，经柱色谱(PE/EA＝6:1)纯化得34.3mg，产率55％。
ESI-MS：647.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.11(3H,s),1.22(3H,s),1.26(3H,s),1.43(3H,s),2.21(3H,s),4.08-4.12(1H,m),4.30-4.46(3H,m),6.26(1H,d,J＝7.1Hz),6.44(1H,d,J＝16.0Hz),6.52(1H,s),6.95(1H,d,J＝7.1Hz),7.43(3H,m),7.55(2H,m),7.72(1H,d,J＝16.1Hz).
实施例3：中间体II-2的制备
以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-2 141.5mg，产率52.8％。
ESI-MS：溴同位素特征峰269.0、271.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例4：I-2的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-2(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-2(橙红色固体)32.6mg，产率51％。
ESI-MS：661.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),4.01-4.15(2H,m),4.23-4.34(2H,m),6.35(1H,d,J＝7.1Hz),6.41(1H,d,J＝15.9Hz),6.55(1H,s),6.99(1H,d,J＝7.1Hz),7.41(3H,m),7.49(2H,m),7.67(1H,d,J＝15.9Hz).
实施例5：中间体II-3的制备
以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-2 145.8mg，产率51.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰283.0、285.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例6：I-3的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-3(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-3(橙红色固体)30.0mg，产率46％。
ESI-MS：675.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.10(3H,s),1.20(3H,s),1.30(3H,s),1.43(3H,s),2.21(3H,s),3.89-3.93(1H,m),4.04-4.07(1H,m),4.23-4.27(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.2Hz),6.46(1H,d,J＝16.0Hz),6.54(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.2Hz),7.39(3H,m),7.55(2H,m),7.70(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例7：中间体II-4的制备
以对甲基肉桂酸(1mM,1eq,162.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-4 142.6mg，产率53.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰269.0、271.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例8：I-4的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-4(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-4(橙红色固体)33.8mg，产率53％。
ESI-MS：661.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.11(3H,s),1.22(3H,s),1.26(3H,s),1.44(3H,s),2.22(3H,s),2.41(3H,s),4.08-4.13(3H,m),4.27-4.40(1H,m),6.27(1H,d,J＝7.0Hz),6.39(1H,d,J＝16.1Hz),6.53(1H,s),6.95(1H,d,J＝7.1Hz),7.24(2H,d,J＝7.9Hz),7.46(2H,d,J＝7.7Hz),7.69(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例9：中间体II-5的制备
以对甲基肉桂酸(1mM,1eq,162.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-4 155.1mg，产率55.0％。
ESI-MS：溴同位素特征峰283.0、285.0[M+H]+。
实施例10：I-5的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-5(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-5(橙红色固体)30.6mg，产率47％。
ESI-MS：675.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.28(3H,s),1.45(3H,s),2.18(3H,s),2.39(3H,s),4.01-4.14(2H,m),4.19-4.33(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.1Hz),6.36(1H,d,J＝16.0Hz),6.54(1H,s),6.97(1H,d,J＝7.0Hz),7.19(2H,d,J＝7.8Hz),7.39(2H,d,J＝7.7Hz),7.64(1H,d,J＝15.9Hz).
实施例11：中间体II-6的制备
以对甲基肉桂酸(1mM,1eq,162.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-6 148.6mg，产率50.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰297.0、299.0[M+H]+。
实施例12：I-6的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-6(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-6(橙红色固体)30.0mg，产率45％。
ESI-MS：689.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.10(3H,s),1.20(3H,s),1.26(3H,s),1.43(3H,s),2.20(3H,s),2.37(3H,s),3.87-3.95(1H,m),4.01-4.09(1H,m),4.22-4.26(2H,m),6.38(1H,d,J＝7.1Hz),6.40(1H,d,J＝16.0Hz),6.53(1H,s),7.00(1H,d,J＝6.9Hz),7.19(2H,d,J＝7.9Hz),7.43(2H,d,J＝7.9Hz),7.67(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例13：中间体II-7的制备
以对甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,178.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-7 147.6mg，产率51.8％。
ESI-MS：溴同位素特征峰285.0、287.0[M+H]+。
实施例14：I-7的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-7(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-7(橙红色固体)34.0mg，产率52％。
ESI-MS：677.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.36(3H,s),1.44(3H,s),2.23(3H,s),3.88(3H,s),4.07-4.14(1H,m),4.28-4.43(3H,m),6.30(1H,d,J＝6.5Hz),6.32(1H,d,J＝15.7Hz),6.56(1H,s),7.00(2H,d,J＝8.5Hz),7.01(1H,d,J＝6.4Hz),7.51(2H,d,J＝8.4Hz),7.67(1H,d,J＝15.7Hz).
实施例15：中间体II-8的制备
以对甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,178.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得到白色固体II-8 158.8mg，产率53.3％。
ESI-MS：溴同位素特征峰299.0、301.0[M+H]+。
实施例16：I-8的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-8替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-8(橙红色固体)28.3mg，产率41.0％。
ESI-MS：691.4[M+H]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),3.87(3H,s),4.01-4.15(2H,m),4.27-4.40(2H,m),6.27(1H,d,J＝15.9Hz),6.34(1H,d,J＝6.9Hz),6.54(1H,s),6.91(2H,d,J＝8.3Hz),6.98(1H,d,J＝7.1Hz),7.44(2H,d,J＝8.3Hz),7.61(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例17：中间体II-9的制备
以对甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,178.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，真空干燥过夜得到白色固体164.4mg，产率52.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰313.0，315.0[M+H]+。
实施例18：I-9的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-9替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-9(橙红色固体)33.4mg，产率49％。
ESI-MS：705.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.10(3H,s),1.20(3H,s),1.26(3H,s),1.43(3H,s),2.20(3H,s),3.84(3H,s),3.89-3.95(1H,m),4.01-4.09(1H,m),4.21-4.25(2H,m),6.32(1H,d,J＝16.2Hz),6.34(1H,d,J＝6.9Hz),6.53(1H,s),6.90(2H,d,J＝8.7Hz),7.00(1H,d,J＝7.1Hz),7.49(2H,d,J＝8.7Hz),7.65(1H,d,J＝15.9Hz).
实施例19：中间体II-10的制备
以对氟肉桂酸(1mM,1eq,166.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-10 141.7mg，产率52.1％。
ESI-MS：溴同位素特征峰273.0、275.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例20：I-10的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-10(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-10(橙红色固体)34.7mg，产率54％。
ESI-MS：665.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.26(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),4.09-4.11(1H,m),4.28-4.44(3H,m),6.27(1H,d,J＝15.9Hz),6.35(1H,d,J＝7.2Hz),6.51(1H,s),6.98(1H,d,J＝7.2Hz),7.12(2H,t,J＝8.6Hz),7.54(2H,t,J＝8.6Hz),7.76(1H,d,J＝16.1Hz).
实施例21：中间体II-11的制备
以对氟肉桂酸(1mM,1eq,166.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-11 148.4mg，产率51.9％。
ESI-MS：溴同位素特征峰287.0、289.0[M+H]+。
实施例22：I-11的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-11(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-11(橙红色固体)28.9mg，产率44％。
ESI-MS：679.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.29(3H,s),1.43(3H,s),2.17(3H,s),3.99-4.13(2H,m),4.21-4.26(1H,m),4.31-4.36(1H,m),6.30(1H,d,J＝15.9Hz),6.34(1H,d,J＝6.0Hz),6.54(1H,s),6.98(1H,d,J＝6.1Hz),7.06(2H,t,J＝8.5Hz),7.46(2H,m),7.60(1H,d,J＝16.1Hz).
实施例23：中间体II-12的制备
以对氟肉桂酸(1mM,1eq,166.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-12 152.7mg，产率50.9％。
ESI-MS：溴同位素特征峰301.0、303.0[M+H]+。
实施例24：I-12的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-12(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-12(橙红色固体)34.9mg，产率52％。
ESI-MS：693.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),3.90-3.95(1H,m),4.04-4.10(1H,m),4.23-4.26(2H,m),6.35(1H,d,J＝7.0Hz),6.47(1H,d,J＝15.9Hz),6.54(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.0Hz),7.09(2H,t,J＝8.6Hz),7.54(2H,m),7.67(1H,d,J＝16.1Hz).
实施例25：中间体II-13的制备
以对三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,216.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-13 166.2mg，产率51.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰323.0、325.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例26：I-13的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-13(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-13(橙红色固体)29.8mg，产率43％。
ESI-MS：715.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),4.13-4.17(1H,m),4.29-4.40(3H,m),6.29(1H,d,J＝7.1Hz),6.51(1H,s),6.53(1H,d,J＝15.9Hz),6.97(1H,d,J＝7.1Hz),7.66(4H,m),7.73(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例27：中间体II-14的制备
以对三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,216.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-14 166.1mg，产率49.4％。
ESI-MS：溴同位素特征峰337.0、339.0[M+H]+。
实施例28：I-14的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-14(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-14(橙红色固体)38.8mg，产率47％。
ESI-MS：729.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.17(3H,s),4.03-4.11(2H,m),4.24-4.29(1H,m),4.35-4.40(1H,m),6.35(1H,d,J＝7.1Hz),6.47(1H,d,J＝16.1Hz),6.54(1H,s),6.99(1H,d,J＝7.2Hz),7.58(2H,d,J＝8.6Hz),7.65(2H,d,J＝8.8Hz),7.66(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例29：中间体II-15的制备
以对三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,216.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-15 179.2mg，产率51.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰351.0、353.0[M+H]+。
实施例30：I-15的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-15(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-15(橙红色固体)33.1mg，产率46％。
ESI-MS：743.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.26(3H,s),1.44(3H,s),2.20(3H,s),3.89-3.95(1H,m),4.04-4.08(1H,m),4.24-4.28(2H,m),6.35(1H,d,J＝7.2Hz),6.53(1H,d,J＝16.0Hz),6.54(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.1Hz),7.65(4H,m),7.71(1H,d,J＝16.0Hz).
实施例31：中间体II-16的制备
以α-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体139.8mg，产率50.1％。
ESI-MS：溴同位素特征峰280.0、282.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例32：I-16的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-16(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-16(橙红色固体)30.5mg，产率47％。
ESI-MS：672.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.10(3H,s),1.22(3H,s),1.25(3H,s),1.43(3H,s),2.19(3H,s),4.11-4.15(1H,m),4.32-4.39(1H,m),4.50-4.51(2H,m),6.28(1H,d,J＝7.0Hz),6.52(1H,s),6.94(1H,d,J＝6.9Hz),7.56(2H,m),8.02(3H,m),8.27(1H,s).
实施例33：中间体II-17的制备
以α-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-17 151.5mg，产率51.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰294.0、296.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例34：I-17的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-17(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-17(橙红色固体)30.5mg，产率46％。
ESI-MS：686.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.20(3H,s),4.03-4.16(2H,m),4.34-4.48(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.55(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.1Hz),7.55(3H,m),7.98(2H,d,J＝7.9Hz),8.25(1H,s).
实施例35：中间体II-18的制备
以α-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-18 152.6mg，产率49.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰308.0、310.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例36：I-18的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-18(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-18(橙红色固体)37.3mg，产率55％。
ESI-MS：700.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.30(3H,s),1.45(3H,s),2.21(3H,s),3.90-3.96(1H,m),4.04-4.15(1H,m),4.35-4.39(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.56(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.1Hz),7.55(3H,m),8.02(2H,d,J＝7.8Hz),8.30(1H,s).
实施例37：中间体II-19的制备
以α-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-19 144.2mg，产率49.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰294.0、296.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例38：I-19的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-19(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-19(橙红色固体)31.8mg，产率48％。
ESI-MS：686.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.23(3H,s),1.26(3H,s),1.44(3H,s),2.20(3H,s),2.47(3H,s),4.11-4.17(1H,m),4.32-4.40(1H,m),4.50-4.53(2H,m),6.28(1H,d,J＝7.1Hz),6.53(1H,s),6.95(1H,d,J＝7.1Hz),7.34(2H,d,J＝7.9Hz),7.94(2H,d,J＝7.8Hz),8.23(1H,s).
实施例39：中间体II-20的制备
以α-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-20 159.6mg，产率52.0％。
ESI-MS：溴同位素特征峰308.0、310.0[M+H]+。
实施例40：I-20的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-20(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-20(橙红色固体)34.5mg，产率51％。
ESI-MS：700.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),2.46(3H,s),4.02-4.16(2H,m),4.32-4.38(2H,m),6.35(1H,d,J＝7.1Hz),6.54(1H,s),7.00(1H,d,J＝6.9Hz),7.31(2H,d,J＝8.0Hz),7.89(2H,d,J＝7.9Hz),8.20(1H,s).
实施例41：中间体II-21的制备
以α-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-6 162.4mg，产率50.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰322.0、324.0[M+H]+。
实施例42：I-21的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-21(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-21(橙红色固体)33.9mg，产率49％。
ESI-MS：714.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.21(3H,s),2.45(3H,s),3.88-3.95(1H,m),4.03-4.11(1H,m),4.33-4.37(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.56(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.0Hz),7.32(2H,d,J＝8.0Hz),7.93(2H,d,J＝8.0Hz),8.25(1H,s).
实施例43：中间体II-22的制备
以α-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-22 157.0mg，产率50.8％。
ESI-MS：溴同位素特征峰310.0、312.0[M+H]+。
实施例44：I-22的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-22(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-22(橙红色固体)31.9mg，产率47％。
ESI-MS：702.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.26(3H,s),1.43(3H,s),2.16(3H,s),3.88(3H,s),4.08-4.13(2H,m),4.35-4.48(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.1Hz),6.52(1H,s),6.95(3H,m),7.63(2H,d,J＝9.0Hz),8.17(1H,s).
实施例45：中间体II-23的制备
以α-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得到白色固体II-8 159.2mg，产率49.3％。
ESI-MS：溴同位素特征峰324.0、326.0[M+H]+。
实施例46：I-23的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-23替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-23(橙红色固体)38.1mg，产率55.0％。
ESI-MS：716.4[M+H]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),3.92(3H,s),4.01-4.16(2H,m),4.31-4.45(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.54(1H,s),7.00(1H,d,J＝7.0Hz),7.02(2H,d,J＝8.8Hz),7.99(2H,d,J＝8.8Hz),8.15(1H,s).
实施例47：中间体II-24的制备
以α-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，真空干燥过夜得到白色固体170.9mg，产率50.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰338.0，340.0[M+H]+。
实施例48：I-24的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-24替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-24(橙红色固体)38.2mg，产率54％。
ESI-MS：730.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.21(3H,s),3.91(3H,s),4.03-4.10(2H,m),4.32-4.40(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.56(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.0Hz),7.02(2H,m),8.04(2H,m),8.21(1H,s).
实施例49：中间体II-25的制备
以α-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-25 150.9mg，产率50.8％。
ESI-MS：溴同位素特征峰298.0、300.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例50：I-25的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-25(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-25(橙红色固体)31.4mg，产率47％。
ESI-MS：690.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.11(3H,s),1.23(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.21(3H,s),4.13-4.17(1H,m),4.33-4.40(1H,m),4.49-4.54(2H,m),6.31(1H,d,J＝7.2Hz),6.52(1H,s),6.98(1H,d,J＝7.0Hz),7.24(2H,t,J＝8.4Hz),8.08(2H,dd,J＝8.5Hz),8.24(1H,s).
实施例51：中间体II-26的制备
以α-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-26 155.2mg，产率49.9％。
ESI-MS：溴同位素特征峰312.0、314.0[M+H]+。
实施例52：I-26的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-26(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-26(橙红色固体)33.4mg，产率49％。
ESI-MS：704.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),4.02-4.17(2H,m),4.30-4.50(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.54(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.1Hz),7.21(2H,t,J＝8.6Hz),8.03(2H,d,J＝8.8Hz),8.20(1H,s).
实施例53：中间体II-27的制备
以α-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-27 159.3mg，产率49.0％。
ESI-MS：溴同位素特征峰326.0、328.0[M+H]+。
实施例54：I-27的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-27(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-27(橙红色固体)34.8mg，产率50％。
ESI-MS：718.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.19(3H,s),4.00-4.17(2H,m),4.30-4.50(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.54(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.1Hz),7.21(2H,t,J＝8.7Hz),8.03(2H,d,J＝8.7Hz),8.20(1H,s).
实施例55：中间体II-28的制备
以α-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-28 170.7mg，产率49.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰348.0、350.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例56：I-28的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-28(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-28(橙红色固体)36.6mg，产率51％。
ESI-MS：740.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.11(3H,s),1.24(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.21(3H,s),4.13-4.20(1H,m),4.34-4.42(1H,m),4.53-4.62(2H,m),6.32(1H,d,J＝7.1Hz),6.53(1H,s),6.98(1H,d,J＝7.0Hz),7.80(2H,d,J＝8.3Hz),8.13(2H,d,J＝8.2Hz),8.31(1H,s).
实施例57：中间体II-29的制备
以α-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-29 179.4mg，产率49.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰362.0、364.0[M+H]+。
实施例58：I-29的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-29(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-29(橙红色固体)34.4mg，产率47％。
ESI-MS：754.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.59(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.30(3H,s),1.46(3H,s),2.18(3H,s),4.03-4.15(2H,m),4.34-4.50(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.54(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.0Hz),7.77(2H,d,J＝8.3Hz),8.07(2H,d,J＝8.4Hz),8.27(1H,s).
实施例59：中间体II-30的制备
以α-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-30 180.8mg，产率48.2％。
ESI-MS：溴同位素特征峰376.0、378.0[M+H]+。
实施例60：I-30的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-30(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-30(橙红色固体)38.0mg，产率51％。
ESI-MS：768.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.55(3H,s),1.08(3H,s),1.18(3H,s),1.24(3H,s),1.42(3H,s),2.16(3H,s),3.18-4.12(2H,m),4.27-4.42(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.1Hz),6.52(1H,s),6.91(1H,d,J＝7.1Hz),7.71(2H,d,J＝8.8Hz),8.07(2H,d,J＝8.8Hz),8.40(1H,s).
实施例61：中间体II-31的制备
以β-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体144.0mg，产率51.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰280.0、282.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例62：I-31的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-31(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-31(橙红色固体)35.7mg，产率55％。
ESI-MS：672.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.30(3H,s),1.43(3H,s),2.21(3H,s),4.10-4.17(1H,m),4.31-4.39(1H,m),4.44-4.56(2H,m),6.28(1H,d,J＝7.1Hz),6.51(1H,s),6.88(1H,s),6.97(1H,d,J＝7.1Hz),7.53(3H,m),7.76(2H,m).
实施例63：中间体II-32的制备
以β-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-32 148.3mg，产率50.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰294.0、296.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例64：I-32的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-32(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-32(橙红色固体)35.8mg，产率54％。
ESI-MS：686.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.30(3H,s),1.46(3H,s),2.18(3H,s),4.02-4.18(2H,m),4.32-4.45(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.3Hz),6.54(1H,s),6.86(1H,s),7.00(1H,d,J＝7.1Hz),7.49(3H,m),7.69(2H,d,J＝7.9Hz).
实施例65：中间体II-33的制备
以β-氰基肉桂酸(1mM,1eq,173.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-33 150.7mg，产率49.1％。
ESI-MS：溴同位素特征峰308.0、310.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例66：I-33的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-33(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-33(橙红色固体)35.2mg，产率52％。
ESI-MS：700.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.22(3H,s),3.89-3.97(1H,m),4.05-4.13(2H,m),4.26-4.29(1H,m),6.36(1H,d,J＝6.8Hz),6.55(1H,s),6.92(1H,s),7.04(1H,d,J＝7.0Hz),7.50(3H,m),7.75(2H,m).
实施例67：中间体II-34的制备
以β-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-34 150.9mg，产率51.5％。
ESI-MS：溴同位素特征峰294.0、296.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例68：I-34的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-34(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-34(橙红色固体)35.2mg，产率53％。
ESI-MS：686.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.30(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),2.44(3H,s),4.08-4.15(1H,m),4.31-4.38(1H,m),4.46-4.52(2H,m),6.29(1H,d,J＝7.2Hz),6.51(1H,),6.83(1H,s),6.97(1H,d,J＝7.1Hz),7.31(2H,d,J＝8.0Hz),7.65(2H,d,J＝8.0Hz).
实施例69：中间体II-35的制备
以β-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-35 155.6mg，产率50.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰308.0、310.0[M+H]+。
实施例70：I-35的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-35(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-35(橙红色固体)33.2mg，产率49％。
ESI-MS：700.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.58(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.46(3H,s),2.17(3H,s),2.24(3H,s),4.02-4.17(2H,m),4.28-4.36(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.0Hz),6.54(1H,s),6.81(1H,s),6.99(1H,d,J＝7.1Hz),7.27(2H,d,J＝8.2Hz),7.59(2H,d,J＝8.2Hz).
实施例71：中间体II-36的制备
以β-氰基-4-甲基肉桂酸(1mM,1eq,189.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-36 159.2mg，产率49.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰322.0、324.0[M+H]+。
实施例72：I-36的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-36(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-36(橙红色固体)38.0mg，产率55％。
ESI-MS：714.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),2.42(3H,s),3.88-3.94(1H,m),4.04-4.09(1H,m),4.31-4.35(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.53(1H,s),6.88(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.3Hz),7.28(2H,d,J＝8.0Hz),7.64(2H,d,J＝8.1Hz).
实施例73：中间体II-37的制备
以β-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-37 153.0mg，产率49.5％。
ESI-MS：溴同位素特征峰310.0、312.0[M+H]+。
实施例74：I-37的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-37(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-37(橙红色固体)35.3mg，产率52％。
ESI-MS：702.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.26(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),3.89(3H,s),4.08-4.15(1H,m),4.30-4.38(1H,m),4.45-4.51(2H,m),6.29(1H,d,J＝7.2Hz),6.51(1H,s),6.75(1H,s),6.98(1H,d,J＝7.2Hz),7.01(2H,d,J＝8.9Hz),7.72(2H,d,J＝9.0Hz).
实施例75：中间体II-38的制备
以β-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得到白色固体II-38 166.0mg，产率51.4％。
ESI-MS：溴同位素特征峰324.0、326.0[M+H]+。
实施例76：I-38的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-38替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-38(橙红色固体)35.4mg，产率51.0％。
ESI-MS：716.4[M+H]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.17(3H,s),3.89(3H,s),3.99-4.19(2H,m),4.26-4.45(2H,m),6.35(1H,d,J＝7.1Hz),6.53(1H,s),6.72(1H,s),6.96(2H,d,J＝8.9Hz),6.99(1H,d,J＝7.0Hz),7.64(2H,d,J＝8.9Hz).
实施例77：中间体II-39的制备
以β-氰基-4-甲氧基肉桂酸(1mM,1eq,205.2mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，真空干燥过夜得到白色固体164.1mg，产率48.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰338.0，340.0[M+H]+。
实施例78：I-39的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-39替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-39(橙红色固体)37.5mg，产率53％。
ESI-MS：730.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.22(3H,s),3.89(3H,s),3.89-3.92(1H,m),4.04-4.08(1H,m),4.31-4.33(2H,m),6.36(1H,d,J＝6.8Hz),6.54(1H,s),6.81(1H,s),6.98(2H,d,J＝8.5Hz),7.03(1H,d,J＝7.1Hz),7.71(2H,d,J＝8.3Hz).
实施例79：中间体II-40的制备
以β-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-40 158.3mg，产率53.3％。
ESI-MS：溴同位素特征峰298.0、300.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例80：I-40的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-40(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-40(橙红色固体)36.0mg，产率54％。
ESI-MS：690.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.11(3H,s),1.22(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.22(3H,s),4.11-4.17(1H,m),4.32-4.38(1H,m),4.44-4.54(2H,m),6.32(1H,d,J＝6.8Hz),6.51(1H,s),6.82(1H,s),7.00(1H,d,J＝6.6Hz),7.22(2H,t,J＝8.4Hz),7.77(2H,m).
实施例81：中间体II-41的制备
以β-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-26 158.3mg，产率50.9％。
ESI-MS：溴同位素特征峰312.0、314.0[M+H]+。
实施例82：I-41的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-41(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-41(橙红色固体)33.4mg，产率49％。
ESI-MS：704.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.11(3H,s),1.20(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.17(3H,s),4.01-4.16(2H,m),4.30-4.44(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.2Hz),6.52(1H,s),6.78(1H,s),7.00(1H,d,J＝7.1Hz),7.16(2H,t,J＝8.4Hz),7.68(2H,m).
实施例83：中间体II-42的制备
以β-氰基-4-氟肉桂酸(1mM,1eq,191.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-42 158.3mg，产率48.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰326.0、328.0[M+H]+。
实施例84：I-42的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-42(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-42(橙红色固体)33.4mg，产率48％。
ESI-MS：718.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.20(3H,s),1.27(3H,s),1.45(3H,s),2.22(3H,s),3.89-3.95(1H,m),4.04-4.10(1H,m),4.32-4.36(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.2Hz),6.53(1H,s),6.87(1H,s),7.02(1H,d,J＝7.0Hz),7.18(2H,t,J＝8.3Hz),7.76(2H,m).
实施例85：中间体II-43的制备
以β-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，其他条件不变，得白色固体II-43 165.2mg，产率47.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰348.0、350.0[M+H]+。
反应式如下：
实施例86：I-43的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-43(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-43(橙红色固体)33.7mg，产率47％。
ESI-MS：740.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.45(3H,s),2.23(3H,s),4.10-4.18(1H,m),4.35-4.39(1H,m),4.49-4.52(2H,m),6.34(1H,d,J＝7.1Hz),6.55(1H,s),6.95(1H,s),7.03(1H,d,J＝6.9Hz),7.79(2H,d,J＝8.1Hz),7.88(2H,d,J＝8.1Hz).
实施例87：中间体II-44的制备
以β-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以3-溴-1-丙醇(1mM,1eq,90.4μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-44 179.8mg，产率49.0％。
ESI-MS：溴同位素特征峰362.0、364.0[M+H]+。
实施例88：I-44的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-44(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-44(橙红色固体)35.8mg，产率49％。
ESI-MS：754.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.28(3H,s),1.45(3H,s),2.17(3H,s),4.02-4.17(2H,m),4.33-4.47(2H,m),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.52(1H,s),6.92(1H,s),7.01(1H,d,J＝7.1Hz),7.74(2H,d,J＝8.5Hz),7.80(2H,d,J＝8.3Hz).
实施例89：中间体II-45的制备
以β-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(1mM,1eq,241.0mg)替换实施例1中的肉桂酸，以4-溴-1-丁醇(1mM,1eq,91.1μl)替换实施例1中的2-溴乙醇，其他条件不变，得白色固体II-45 178.9mg，产率47.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰376.0、378.0[M+H]+。
实施例90：I-30的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-45(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-45(橙红色固体)37.3mg，产率50％。
ESI-MS：768.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.57(3H,s),1.12(3H,s),1.21(3H,s),1.27(3H,s),1.46(3H,s),2.22(3H,s),3.89-3.97(1H,m),4.05-4.13(1H,m),4.34-4.38(2H,m),6.37(1H,d,J＝7.0Hz),6.54(1H,s),7.01(1H,s),7.04(1H,d,J＝7.0Hz),7.76(2H,d,J＝8.3Hz),7.88(2H,d,J＝8.3Hz).
实施例91：中间体II-46的制备
将β-氰基肉桂酸(0.5mM,1.0eq,86.6mg)，K2CO3(1.0mM,2.0eq,138.0mg)，Bu4N+Br-(0.03mM,0.06eq,9.67mg)和顺-1,4-二溴-2-丁烯(1.5mM,3.0eq,320.9mg)溶于无水丙酮中，搅拌7h，经减压浓缩后加乙酸乙酯溶解，分别用水和饱和NaCl溶液洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，抽滤，蒸干，经硅胶柱色谱(PE/EA＝16:1)纯化，得白色固体II-46 163.8mg，产率53.7％。
ESI-MS：溴同位素特征峰306.0、308.0[M+H]+。
实施例92：I-46的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-46(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-46(橙红色固体)33.1mg，产率49％。
ESI-MS：698.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),4.48(2H,m),4.81(2H,m),5.93(2H,s),6.35(1H,d,J＝7.4Hz),6.53(1H,s),6.95(1H,s),7.01(1H,d,J＝6.8Hz),7.19(3H,m),7.76(2H,m).
实施例93：中间体II-47的制备
以β-氰基-4-甲氧基肉桂酸(0.5mM,1.0eq,102.6mg)替换实施例91中的β-氰基肉桂酸，得白色固体II-47 175.2mg，产率52.3％。
ESI-MS：溴同位素特征峰336.0、338.0[M+H]+。
实施例94：I-47的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-47(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-47(橙红色固体)33.9mg，产率48％。
ESI-MS：728.4[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.27(3H,s),1.44(3H,s),2.21(3H,s),3.89(3H,s),4.47(2H,m),4.79(2H,m),5.92(2H,s),6.36(1H,d,J＝7.1Hz),6.53(1H,s),6.83(1H,s),6.98(2H,d,J＝9.0Hz),7.02(1H,d,J＝7.0Hz),7.72(2H,d,J＝8.9Hz).
实施例95：中间体II-48的制备
以β-氰基-4-三氟甲基肉桂酸(0.5mM,1.0eq,120.5mg)替换实施例91中的β-氰基肉桂酸，得白色固体II-48 185.0mg，产率49.6％。
ESI-MS：溴同位素特征峰374.0、376.0[M+H]+。
实施例96：I-48的合成
参照化合物I-1的制法，以化合物II-48(0.3mM,3.0eq)替换化合物II-1，其他条件不变，制得目标化合物I-48(橙红色固体)40.4mg，产率54％。
ESI-MS：766.3[M+Na]+。
1H-NMR(300MHz,CDCl3,TMS),δppm:0.56(3H,s),1.12(3H,s),1.22(3H,s),1.28(3H,s),1.45(3H,s),2.22(3H,s),4.48(2H,m),4.81(2H,m),5.92(2H,s),6.37(1H,d,J＝7.1Hz),6.54(1H,s),6.90(1H,s),7.04(1H,d,J＝7.1Hz),7.19(2H,t,J＝8.6Hz),7.77(2H,m).
实施例97：化合物的药理实验
采用四甲基氮唑蓝比色法(MTT法)对本发明化合物进行抗肿瘤活性测试，选取雷公藤红素(CEL)作为阳性对照药。
仪器：超净工作台(SW-CJ-1FD，AIRTECH，苏净安泰)、恒温CO2培养箱(3111，Thermo，美国)、倒置生物显微镜(IX71，OLYMPUS，日本)、酶联免疫检测仪(Model680，BIO-RAD，美国)、平板摇床(Kylin-bell lab Instruments)、高压灭菌锅(YXO.SG41.280，上海华线)，离心机(SIGMA)。
试剂：DMEM(GIBCO)、胎牛血清(GIBCO)、胰蛋白酶(SIGMA)，DMSO(SIGMA)。
细胞株：人非小细胞肺癌细胞株A549，人乳腺癌细胞株MCF-7，人肝癌细胞株HepG2，人骨肉瘤细胞HOS(均由江苏凯基生物技术股份有限公司提供)。
方法：将冻存的细胞株复苏，置于恒温37℃CO2培养箱中培养，每天换液一次，待其处于指数生长期状态良好时即可铺板。加入1ml 0.25％胰蛋白酶消化液，消化1-2min，在显微镜下观察细胞状态，当贴壁细胞变圆收缩时即可吸除消化液，加入1-2ml含10％胎牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液，进行细胞计数，按照每孔5×104个细胞数及总孔数计算所需细胞悬液的量，将此细胞悬液接种于96孔板上，100μl/孔，周围用PBS液封，置于恒温37℃CO2培养箱中培养24h。
用DMEM培养基配制受试药物、阳性对照雷公藤红素、空白对照DMSO，使其终浓度为5μM/孔，每个药物3个复孔，培养48小时。将MTT试剂加入到96孔板中，10μl/孔，继续孵育4h。吸除板内培养基，每孔加入100μl DMSO，平板摇床振摇10min使结晶溶解。用酶联免疫检测仪在波长570nm处检测每孔吸光值，并按下列公式计算细胞抑制率。3次初筛结果平均值为其最终抑制率，初筛抑制率大于母体的化合物进行浓度梯度筛选(5倍稀释)，以备计算受试药物IC50值(graphpad软件计算)，3次重复实验结果为所测化合物最终IC50值。
细胞抑制率％＝[(空白对照OD值－给药组OD值)/空白对照组OD值]×100％
首先将所有受试化合物进行初步体外抗增殖活性筛选。采用人非小细胞肺癌癌A549细胞株进行抑制率测试，所得结果如表1所示。
表1.受试化合物对A549细胞株的抑制作用
注：a：受试化合物的浓度为1.5μM，最终抑制率为三次独立平行试验的平均值；b：阳性对照。
由表1可知，在所有受试化合物中，I-31，I-32，I-37，I-38，I-40，I-41对A549细胞株的抑制率大于CEL，因此对该六个目标化合物及连接臂改变的化合物I-46，I-47，I-48进行进一步IC50的测试。
表2.部分受试化合物对A549、MCF-7、HOS、HepG2细胞株的抑制作用
注：a：阳性对照
由表2可知，化合物I-31，I-32，I-37，I-38，I-40，I-41对A549细胞株抑制活性明显强于CEL；化合物I-31，I-32，I-38，I-40，I-41对MCF-7细胞株抑制活性强于CEL；化合物I-31，I-32，I-37，I-41对HOS细胞株抑制活性明显强于CEL；化合物I-31，I-32，I-37，I-38、I-41对HepG2细胞株抑制活性明显强于CEL；化合物I-46，I-47，I-48对四种肿瘤细胞株的抑制能力低于或与CEL相当。其中化合物I-41活性最优，与CEL相比，活性提高约1.6～3.6倍，对四种细胞株的IC50值分别为0.41±0.11μM(A549)、0.64±0.07μM(MCF-7)、0.90±0.05μM(HOS)、0.94±0.23μM(HepG2)，值得进一步的深入研究。