本发明属于天然产物活性成分萃取领域，具体地说，涉及一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取方法。
背景技术：
蓝莓别名越橘(vacciniumuliginosuml)，为杜鹃花科(ericaceae)越橘属(vacciniumspp)多年生落叶植物或常绿灌木，果实类型为浆果，原产于加拿大东部和美国东北部。果实中含有大量的花青素，具有较高的生物活性。花青素是黄酮类化合物，是广泛存在于植物中的天然水溶性色素，因主要以糖苷的形式存在，所以也称花色苷。花青素是纯天然的抗衰老的营养补充剂，研究证明是当今人类发现最有效的抗氧化剂，它的抗氧化性能比维生素高出五十倍，比维生素高出二百倍。科研结果显示：花青素是现今所发现的最有效的天然水溶性自由基清除剂。随着研究者对花青素更加深入的研究，其功效越来越引人瞩目，花青素的主要的功效有：①延缓衰老、激活巨噬细胞，使血清免疫球蛋白免受自由基的侵害；②提高免疫力、降低心脑血管疾病的发病率；③降低糖尿病及其并发症的发病机率、改善退行型老年痴呆、保护基因的完整性；④降低癌症的发病率、抗发炎、预防视力衰退等诸多功能。
目前蓝莓花青素提取工艺主要为酶辅助溶剂法、超声辅助溶剂法及超临界co2萃取法。但传统方法萃取得到有效物质含量相对较低，并且萃取过程需要进行多次换热过程，存在能耗高、破坏活性物质结构和能量利用率低等问题。蓝莓果实中含有大量的游离的花青素，具有较高的生物活性，而同时果渣中大量的花青素主要结合在果皮纤维素中，难以萃取，其综合利用程度很低。造成了蓝莓资源的浪费，有效提升花青素提取率的的技术方法很欠缺。
技术实现要素：
针对上述现有技术中存在的技术问题，本发明的目的是提供一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取方法，该方法通过在常温下采用超声波-均质联用萃取方式，有效萃取蓝莓果中游离的花青素，同时均质机的快速剪切使纤维素解链，释放果渣中的纤维素，大大提高了蓝莓果实中花青素的提取率，解决了萃取率低、活性物质加工稳定性差等问题。
为了解决以上问题，本发明的技术方案为超声波-均质-超声波循环萃取蓝莓果实花青素的方法，包括如下步骤：
（1）一次萃取：蓝莓果经破碎处理，与萃取液混合后进行一次超声波间歇式萃取，得到蓝莓果一次残渣和花青素一次萃取液；
原料蓝莓果体积1~2t，萃取液为50%~60%乙醇，蓝莓果与萃取液的料液比为1:4~1:8，超声波萃取时间为2~4h，超声功率范围为3000w～5000w，超声萃取温度为20~25℃。
（2）混合搅拌：将步骤（1）中得到的蓝莓果一次残渣放入搅拌罐中，加入提取溶剂，进行搅拌混合；
混合搅拌30～40min，萃取液为50%~60%乙醇。
（3）均质剪切：将步骤（3）混合后的果渣加入均质机中利用剪切力释放果渣纤维素中花青素；
均质机混合时均质压力为40~60mpa，流量1~2t/h，撞针频率为30~60次/min。
（4）二次萃取：进一步对果渣中花青素进行超声波间歇式萃取，得到花青素二次萃取液，合并两次萃取液，离心，得到高浓度花青素萃取液。
超声波萃取时间为2~4h，超声功率范围为3000～5000w，超声萃取温度为20~25℃，离心转速2000~3000r/min。
本发明具有如下优点：
1.通过超声波-均质-超声波循环萃取方式，可有效将果渣中与纤维素结合的花青素萃取，使活性成分充分释放，提高花青素的溶出率，增加了萃取得到的有效物质含量，同时可对溶剂和提取物残渣进行回收，实现资源的有效利用，节能高效环保。
2.间歇式超声萃取有利于减少臭氧的形成，进而有利于提高蓝莓果中花青素的提取率。
3.全部加工过程均在常温下进行，避免破坏热敏性活性物质的结构，适用范围广。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
具体实施方式一：本实施方式所述的一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取方法，具体实施步骤如下：
（1）一次萃取：1.5t蓝莓果经破碎处理，与50%乙醇萃取液混合，蓝莓果与萃取液的料液比为1:8，进行一次超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到蓝莓果一次残渣和花青素一次萃取液；
（2）混合搅拌：将步骤（1）中得到的蓝莓果一次残渣放入搅拌罐中，加入50%乙醇提取溶剂，进行混合搅拌30min；
（3）均质剪切：将步骤（2）混合后的果渣加入均质机中利用剪切力释放果渣纤维素中花青素，均质机混合时均质压力为60mpa，流量1.5t/h，撞针频率为60次/min；
（4）二次萃取：进一步对果渣中花青素进行超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到花青素二次萃取液，合并两次萃取液，使用卧式离心机分离得到蓝莓花青素萃取液，离心转速3000r/min，得到高浓度花青素萃取液，花青素得率为88.96%。
具体实施方式二：本实施方式所述的一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取方法，具体实施步骤如下：
（1）一次萃取：1.5t蓝莓果经破碎处理，与50%乙醇萃取液混合，蓝莓果与萃取液的料液比为1:6，进行一次超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到蓝莓果一次残渣和花青素一次萃取液；
（2）混合搅拌：将步骤（1）中得到的蓝莓果一次残渣放入搅拌罐中，加入50%乙醇提取溶剂，进行混合搅拌30min；
（3）均质剪切：将步骤（2）混合后的果渣加入均质机中利用剪切力释放果渣纤维素中花青素，均质机混合时均质压力为60mpa，流量1.5t/h，撞针频率为60次/min；
（4）二次萃取：进一步对果渣中花青素进行超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到花青素二次萃取液，合并两次萃取液，使用卧式离心机分离得到蓝莓花青素萃取液，离心转速3000r/min，得到高浓度花青素萃取液，花青素得率为89.44%。
具体实施方式三：本实施方式所述的一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取方法，具体实施步骤如下：
（1）一次萃取：1.5t蓝莓果经破碎处理，与50%乙醇萃取液混合，蓝莓果与萃取液的料液比为1:4，进行一次超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到蓝莓果一次残渣和花青素一次萃取液；
（2）混合搅拌：将步骤（1）中得到的蓝莓果一次残渣放入搅拌罐中，加入50%乙醇提取溶剂，进行混合搅拌30min；
（3）均质剪切：将步骤（2）混合后的果渣加入均质机中利用剪切力释放果渣纤维素中花青素，均质机混合时均质压力为60mpa，流量1.5t/h，撞针频率为60次/min；
（4）二次萃取：进一步对果渣中花青素进行超声波间歇式萃取，超声波萃取时间为3h，超声功率范围为5000w，超声萃取温度为25℃，得到花青素二次萃取液，合并两次萃取液，使用卧式离心机分离得到蓝莓花青素萃取液，离心转速3000r/min，得到高浓度花青素萃取液，花青素得率为90.65%。
本发明通过一种蓝莓花青素超声波-均质-超声波循环萃取蓝莓果中花青素，与常规提取方法能够提高花青素的提取效率和产率，采用常温萃取条件，可有效保护花青素黄酮等生物活性物质，使活性成分充分释放，提高花青素的溶出率，增加了萃取得到的有效物质含量，同时可对溶剂和提取物残渣进行回收，实现资源的有效利用，节能高效环保，适合蓝莓花青素的大规模生产。
本发明不局限于上述具体的实施方式，本发明可以有各种更改和变化。凡是依据本发明的技术实质对以上实施方式所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围。