抗CDH6抗体-吡咯并苯并二氮杂环庚三烯衍生物缀合物的制作方法

文档序号:26003721发布日期:2021-07-23 21:21阅读:来源:国知局

技术特征:

1.由下式(x)代表的抗体-药物缀合物:

[式1]

其中m2代表1或2的整数,

ab代表igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,

l代表连接键合至ab的n297的聚糖(n297聚糖)和d的接头,

n297聚糖可以是重构的聚糖,且

d是下式中的任一者:

[式2]

其中星号(*)代表与l的键合。

2.根据权利要求1所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段针对至少任何一种选自以下抗体(1)至(8)的抗体表现出对于与包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列的结合的竞争性抑制活性:

(1)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:23中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:26中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(2)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:39中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(3)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(4)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:35中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(5)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:47中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(6)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成,

(7)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成,和

(8)具有轻链和重链的抗体,所述轻链由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成,且所述重链由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成。

3.根据权利要求1或2所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含选自以下(1)至(4)的cdrl1、cdrl2和cdrl3;以及cdrh1、cdrh2和cdrh3:

(1)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3;以及由seqidno:17中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:18中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:19中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,

(2)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3;以及由seqidno:17中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:30中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:19中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,

(3)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3;以及由seqidno:57中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:58中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:59中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,和

(4)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,以及由seqidno:62中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:63中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:64中显示的氨基酸序列组成的cdrh3。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含选自以下可变区(1)至(4)的任何一个轻链可变区:

(1)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区,

(2)由seqidno:37中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区,

(3)与(1)和(2)的氨基酸序列中的除了cdr序列以外的骨架区的序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列,和

(4)在(1)至(3)的氨基酸序列中的除了cdr序列以外的骨架区的序列中具有一个或几个氨基酸的缺失、取代或添加的氨基酸序列;和

选自以下可变区(5)至(11)的任何一个重链可变区:

(5)由seqidno:41中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(6)由seqidno:45中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(7)由seqidno:49中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(8)由seqidno:55中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(9)由seqidno:60中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(10)与(5)至(9)的氨基酸序列中的除了每个cdr序列以外的骨架区的序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列,和

(11)在(5)至(10)的氨基酸序列中的除了每个cdr序列以外的骨架区的序列中具有一个或几个氨基酸的缺失、取代或添加的氨基酸序列。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含以下(1)至(6)中的任何一个:

(1)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:41中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(2)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:45中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(3)由seqidno:37中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:45中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(4)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:49中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(5)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:55中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,和

(6)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:60中显示的氨基酸序列组成的重链可变区。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有以下(1)至(7)中的任何一个:

(1)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:39中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(2)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(3)由seqidno:35中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(4)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:47中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(5)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(6)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,和

(7)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

7.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:39中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

8.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

9.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:35中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

10.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:47中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

11.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

12.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

13.根据权利要求6所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中

l由-lb-la-lp-nh-b-ch2-o(c=o)-*代表,其中星号*代表与d的n10'-位置的氮原子键合,

b代表1,4-苯基、2,5-吡啶基、3,6-吡啶基、2,5-嘧啶基或2,5-噻吩基,

lp代表选自以下的任何一个:

-ggva-、-gg-(d-)va-、-va-、-ggfg-、-ggpi-、-ggvcit-、-ggvk-和-ggpl-,

la代表选自以下的任何一个:

-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-,

-c(=o)-(ch2ch2)2-c(=o)-,

-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2)2-c(=o)-,

-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2o)2-ch2-c(=o)-,

-c(=o)-ch2ch2-nh-c(=o)-(ch2ch2o)4-ch2ch2-c(=o)-,

-ch2-oc(=o)-和

-oc(=o)-,

lb代表下式:

[式3]

[式4]

[式5]

其中,在以上显示的lb的每个结构式中,每个星号*代表与la的键合,且每条波浪线代表与由ab呈现的聚糖或重构的聚糖的键合。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中

l代表选自以下结构式的任何一个:

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggva-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-gg-(d-)va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-(ch2ch2)2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggpi-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggfg-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggvcit-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggvk-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggpl-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2)2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2o)2-ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-nh-c(=o)-(ch2ch2o)4-ch2ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z2-oc(=o)-ggva-nh-b-ch2-oc(=o)-和

-z3-ch2-oc(=o)-ggva-nh-b-ch2-oc(=o)-

其中z1代表以下结构式:

[式6]

z2代表以下结构式:

[式7]

z3代表以下结构式:

[式8]

其中,在对于z1、z2和z3代表的每个结构式中,每个星号*代表与z1、z2或z3相邻的c(=o)、o或ch2的键合;每条波浪线代表与由ab呈现的聚糖或重构的聚糖的键合,且

b代表1,4-苯基。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中

l代表选自以下的任何一个:

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggva-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-(ch2ch2)2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-ggvcit-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2)2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

-z1-c(=o)-ch2ch2-c(=o)-nh-(ch2ch2o)2-ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-和

-z1-c(=o)-ch2ch2-nh-c(=o)-(ch2ch2o)4-ch2ch2-c(=o)-va-nh-b-ch2-oc(=o)-,

其中b代表1,4-苯基,且z1代表以下结构式:

[式9]

其中,在z1的结构式中,每个星号*代表与z1相邻的c(=o)的键合,且每条波浪线代表与键合至ab的n297的聚糖(n297聚糖)的键合或与重构的聚糖的键合。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体是igg1、igg2或igg4。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述n297聚糖是重构的聚糖。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述n297聚糖是n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2或其混合物或n297-(fuc)sg,其中n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2和n297-(fuc)sg具有由下式代表的结构:

[式10]

[式11]

[式12]

其中波浪线代表与抗体的asn297的键合,

所述n297聚糖中的*-l(peg)-代表*-(ch2ch2-o)n5-ch2ch2-nh-,其中n5代表2至5的整数,在右端的氨基经由酰胺键键合至n297聚糖中的β-man的1-3和1-6支链的每条或任一条中的非还原末端的唾液酸的2-位置的羧酸,且每个星号*代表与单个结构式中的三唑环的1-或3-位置的氮原子的键合。

20.根据权利要求19所述的抗体-药物缀合物,其中n5代表3。

21.由下式(xii)代表的抗体-药物缀合物:

[式13]

其中,在上面显示的每个结构式中,

m2代表1或2的整数,

ab代表igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,

ab的n297聚糖代表n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2及其混合物,和n297-(fuc)sg中的任一个,其中n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2和n297-(fuc)sg具有由下式代表的结构:

[式14]

[式15]

[式16]

其中每条波浪线代表与抗体的asn297(n297)的键合,

所述n297聚糖中的*-l(peg)-代表*-(ch2ch2-o)3-ch2ch2-nh-,其中

在右端的氨基经由酰胺键键合至n297聚糖中的β-man的1-3和1-6支链的每条或任一条中的非还原末端的唾液酸的2-位置的羧酸,且每个星号*代表与对应的结构式中的三唑环的1-或3-位置的氮原子的键合。

22.根据权利要求21所述的抗体-药物缀合物,其中由式(xii)代表的化合物由下式(xii')代表:

[式17]

23.由下式(xiii)代表的抗体-药物缀合物:

[式18]

其中,在上面显示的每个结构式中,

m2代表1或2的整数,

ab代表igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,且

ab的n297聚糖代表n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2及其混合物,和n297-(fuc)sg中的任一个,其中n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2和n297-(fuc)sg具有由下式代表的结构:

[式19]

[式20]

[式21]

其中每条波浪线代表与抗体的asn297(n297)的键合,

所述n297聚糖中的*-l(peg)-代表*-(ch2ch2-o)3-ch2ch2-nh-,其中在右端的氨基经由酰胺键键合至n297聚糖中的β-man的1-3和1-6支链的每条或任一条中的非还原末端的唾液酸的2-位置的羧酸,且每个星号*代表与单个结构式中的三唑环的1-或3-位置的氮原子的键合。

24.根据权利要求23所述的抗体-药物缀合物,其中由式(xiii)代表的化合物由下式(xiii')代表:

[式22]

25.由下式(xiv)代表的抗体-药物缀合物:

[式23]

其中,在上面显示的每个结构式中,

m2代表1或2的整数,

ab代表igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,且

ab的n297聚糖代表n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2及其混合物,和n297-(fuc)sg中的任一个,其中n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2和n297-(fuc)sg具有由下式代表的结构:

[式24]

[式25]

[式26]

其中每条波浪线代表与抗体的asn297(n297)的键合,

所述n297聚糖中的*-l(peg)-代表*-(ch2ch2-o)3-ch2ch2-nh-,其中在右端的氨基经由酰胺键键合至n297聚糖中的β-man的1-3和1-6支链的每条或任一条中的非还原末端的唾液酸的2-位置的羧酸,且每个星号*代表与单个结构式中的三唑环的1-或3-位置的氮原子的键合。

26.根据权利要求25所述的抗体-药物缀合物,其中由式(xiv)代表的化合物由下式(xiv')代表:

[式27]

27.由下式(xv)代表的抗体-药物缀合物:

[式28]

其中,在上面显示的每个结构式中,

m2代表1或2的整数,

ab代表igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,且

ab的n297聚糖代表n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2及其混合物,和n297-(fuc)sg中的任一个,其中n297-(fuc)msg1、n297-(fuc)msg2和n297-(fuc)sg具有由下式代表的结构:

[式29]

[式30]

[式31]

其中每条波浪线代表与抗体的asn297(n297)的键合,

所述n297聚糖中的*-l(peg)-代表*-(ch2ch2-o)3-ch2ch2-nh-,其中在右端的氨基经由酰胺键键合至n297聚糖中的β-man的1-3和1-6支链的每条或任一条中的非还原末端的唾液酸的2-位置的羧酸,且每个星号*代表与单个结构式中的三唑环的1-或3-位置的氮原子的键合。

28.根据权利要求27所述的抗体-药物缀合物,其中由式(xv)代表的化合物由下式(xv')代表:

[式32]

29.根据权利要求21至28中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含选自以下(1)至(4)的cdrl1、cdrl2和cdrl3以及cdrh1、cdrh2和cdrh3:

(1)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,以及由seqidno:17中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:18中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:19中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,

(2)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,以及由seqidno:17中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:30中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:19中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,

(3)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,以及由seqidno:57中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:58中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:59中显示的氨基酸序列组成的cdrh3,和

(4)由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1,由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2,和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,以及由seqidno:62中显示的氨基酸序列组成的cdrh1,由seqidno:63中显示的氨基酸序列组成的cdrh2,和由seqidno:64中显示的氨基酸序列组成的cdrh3。

30.根据权利要求21至29中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含以下(1)至(6)中的任何一个:

(1)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:41中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(2)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:45中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(3)由seqidno:37中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:45中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(4)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:49中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,

(5)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:55中显示的氨基酸序列组成的重链可变区,或

(6)由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:60中显示的氨基酸序列组成的重链可变区。

31.根据权利要求21至30中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含以下(1)至(7)中的任何一个:

(1)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:39中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(2)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(3)由seqidno:35中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(4)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:47中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(5)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,

(6)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链,和

(7)由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

32.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:39中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

33.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

34.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:35中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:43中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

35.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:47中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

36.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

37.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

38.根据权利要求31所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体或其功能片段包含由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体-药物缀合物中每抗体分子缀合的药物分子的平均数目为1至3。

40.根据权利要求1至38中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体-药物缀合物中每抗体分子缀合的药物分子的平均数目为3至5。

41.根据权利要求1至40中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中所述抗体含有重链,所述重链具有选自以下的一种或两种或更多种修饰:n-连接糖基化、o-连接糖基化、n-末端加工、c-末端加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化、向n-末端添加甲硫氨酸残基、脯氨酸残基的酰胺化和从羧基末端缺失一个或两个氨基酸。

42.根据权利要求1至41中任一项所述的抗体-药物缀合物,其中在重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失。

43.用于产生聚糖-重构抗体的方法,所述方法包括以下步骤:

i)产生igg抗体或其功能片段,所述igg抗体特异性结合包含seqidno:4中显示的氨基酸序列的氨基酸序列且具有允许细胞摄取的内化能力,

ii)用水解酶处理步骤i)中获得的抗体以产生(fucα1,6)glcnac-抗体;和

iii)-1在转糖苷酶存在的情况下使(fucα1,6)glcnac-抗体和聚糖供体分子反应,所述聚糖供体分子通过如下获得:将具有叠氮基的peg接头引入至msg(9)或sg(10)中的唾液酸的2-位置的羧酸的羰基,和将还原末端噁唑啉化,或

iii)-2在转糖苷酶存在的情况下使(fucα1,6)glcnac-抗体和聚糖供体分子反应,所述聚糖供体分子通过如下获得:将具有叠氮基的peg接头引入至α-氨基任选地被保护的(msg-)asn或(sg-)asn中的唾液酸的2-位置的羧酸的羰基和asn中的羧酸的羰基,引起水解酶的作用,且然后将还原末端噁唑啉化。

44.用于产生根据权利要求1至42中任一项所述的抗体-药物缀合物的方法,其包括使通过根据权利要求43所述的方法获得的聚糖-重构的抗体和药物接头反应的步骤。

45.根据权利要求1至42中任一项所述的抗体-药物缀合物,其通过根据权利要求44所述的方法产生。

46.抗体或其功能片段,其包含轻链可变区和重链可变区,所述轻链可变区含有由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1、由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3,且所述重链可变区含有由seqidno:57中显示的氨基酸序列组成的cdrh1、由seqidno:58中显示的氨基酸序列组成的cdrh2和由seqidno:59中显示的氨基酸序列组成的cdrh3。

47.抗体或其功能片段,其包含轻链可变区和重链可变区,所述轻链可变区含有由seqidno:12中显示的氨基酸序列组成的cdrl1、由seqidno:13中显示的氨基酸序列组成的cdrl2和由seqidno:14中显示的氨基酸序列组成的cdrl3;且所述重链可变区含有由seqidno:62中显示的氨基酸序列组成的cdrh1、由seqidno:63中显示的氨基酸序列组成的cdrh2和由seqidno:64中显示的氨基酸序列组成的cdrh3。

48.根据权利要求46所述的抗体或其功能片段,其包含由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:55中显示的氨基酸序列组成的重链可变区。

49.根据权利要求47所述的抗体或其功能片段,其包含由seqidno:33中显示的氨基酸序列组成的轻链可变区和由seqidno:60中显示的氨基酸序列组成的重链可变区。

50.根据权利要求46或48所述的抗体或其功能片段,其具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:67中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

51.根据权利要求47或49所述的抗体或其功能片段,其具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:69中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

52.抗体或其功能片段,其具有由seqidno:31中的位置21至233的氨基酸序列组成的轻链和由seqidno:65中的位置20至471的氨基酸序列组成的重链。

53.多核苷酸,其编码根据权利要求46至52中任一项所述的抗体。

54.表达载体,其含有根据权利要求53所述的多核苷酸。

55.用根据权利要求54所述的表达载体转化的宿主细胞。

56.用于产生根据权利要求46至52所述的抗体或其功能片段的方法,其包括以下步骤:培养根据权利要求55所述的宿主细胞,和从获得自培养步骤的培养物收集靶抗体。

57.抗体或其功能片段,其通过根据权利要求56所述的方法获得。

58.药物组合物,其包含根据权利要求1至42和45中任一项所述的抗体-药物缀合物或根据权利要求46至52和57中任一项所述的抗体或其功能片段。

59.根据权利要求58所述的药物组合物,其为抗肿瘤药物。

60.根据权利要求59所述的药物组合物,其中所述肿瘤是表达cdh6的肿瘤。

61.根据权利要求60所述的药物组合物,其中所述肿瘤是肾细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、卵巢癌、卵巢浆液性腺癌、甲状腺癌、胆管癌、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胶质母细胞瘤、间皮瘤、子宫癌、胰腺癌、威尔姆斯氏肿瘤或神经母细胞瘤。

62.用于治疗肿瘤的方法,其包括向个体施用根据权利要求1至42和45中任一项所述的抗体-药物缀合物,根据权利要求46至52和57中任一项所述的抗体或其功能片段或根据权利要求58至61中任一项所述的药物组合物。

63.根据权利要求62所述的治疗方法,其中所述肿瘤是其中具有cdh6表达的肿瘤。

64.根据权利要求62或63所述的治疗方法,其中所述肿瘤是肾细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、卵巢癌、卵巢浆液性腺癌、甲状腺癌、胆管癌、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胶质母细胞瘤、间皮瘤、子宫癌、胰腺癌、威尔姆斯氏肿瘤或神经母细胞瘤。

65.根据权利要求62至64中任一项所述的治疗方法,其包括向个体同时、分开或连续施用根据权利要求1至42和45中任一项所述的抗体-药物缀合物;根据权利要求46至52和57中任一项所述的抗体或其功能片段;或根据权利要求58至61中任一项所述的药物组合物和至少一种抗肿瘤药物。


技术总结
本发明解决了如下的问题:提供可以特异性结合CDH6且具有高内化活性的抗体;包含所述抗体且具有高抗肿瘤活性的抗体‑药物缀合物;使用所述抗体‑药物缀合物制备且对肿瘤具有治疗作用的药物;使用所述抗体、抗体‑药物缀合物或药物治疗肿瘤的方法等。根据本发明,在此提供:具有内化活性的抗CDH6抗体;包含彼此结合的抗CDH6抗体和新型PBD衍生物且具有高抗肿瘤活性的抗CDH6抗体‑药物缀合物;以及药物产品和用于治疗肿瘤的方法,在其中各自使用所述抗CDH6抗体或抗CDH6抗体‑药物缀合物。

技术研发人员:齐藤敦子;原田直弥;米田耕三;早川市郎;目黑正规;土居史尚
受保护的技术使用者:第一三共株式会社
技术研发日:2019.11.13
技术公布日:2021.07.23
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