在线监控目标蛋白的产量和质量的方法与流程

文档序号:20200840发布日期:2020-03-27 20:37阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种在线监控目标蛋白的产量和质量的方法,其特征在于,所述方法利用在线监控目标蛋白的产量和质量的系统实现;所述系统包括:控制装置、第一维色谱分离装置以及第二维色谱分离装置;所述方法包括:

a、所述第一维色谱分离装置接收所述控制装置的控制信号,将含有所述目标蛋白的细胞培养发酵液进行proteina亲和色谱分离,获得含有所述目标蛋白的洗脱液,并向所述控制装置返回第一检测信号;所述控制装置根据所述第一检测信号计算所述目标蛋白溶液的产量信息;

b、所述第二维色谱分离装置接收所述控制装置的控制信号,将含有所述目标蛋白的洗脱液进行阳离子交换色谱和/或体积排阻色谱分离,获得目标蛋白溶液,并向所述控制装置返回第二检测信号;所述控制装置根据所述第二检测信号计算所述目标蛋白溶液的质量信息。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述系统还包括:细胞培养取样装置;所述方法还包括:

c、所述细胞培养取样装置接收所述控制装置的控制信号,将包含目标蛋白的细胞培养样品取样并进行离心和/或过滤后,获得所述含有目标蛋白的细胞培养发酵液。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一维色谱分离装置包括:第一进样模组、proteina亲和色谱柱以及第一检测器;

所述第一进样模组包括进样环和收集器,所述进样环通过第一多角阀与细胞培养取样装置和所述收集器连接;

所述第一检测器与所述proteina亲和色谱柱和所述收集器连接;

所述控制装置包括:第一控制模块、第二控制模块、第三控制模块以及第一计算模块;

所述a包括:

a1、所述第一控制模块向所述第一进样模组发送第一控制信号,控制所述进样环将含有所述目标蛋白的细胞培养发酵液输送到所述proteina亲和色谱柱;

a2、所述第二控制模块向所述proteina亲和色谱柱发送第三控制信号,控制所述proteina亲和色谱柱对含有所述目标蛋白的细胞培养发酵液进行蛋白质洗脱,获得含有所述目标蛋白的洗脱液;

a3、所述第三控制模块向所述第一检测器发送第四控制信号,所述第一检测器返回所述第一检测信号;

a4、所述第一计算模块根据所述第一检测信号计算所述目标蛋白溶液的产量。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述第二维色谱分离装置包括:阳离子交换色谱柱、体积排阻色谱柱以及第二检测器;所述proteina亲和色谱柱、阳离子交换色谱柱以及体积排阻色谱柱通过第二多角阀与所述收集器连接;

所述控制装置还包括:串联通路选择模块、第五控制模块以及第二计算模块;

所述b包括:

b1、所述串联通路选择模块控制所述第二多角阀的通路,设置含有所述目标蛋白的洗脱液经过所述阳离子交换色谱柱或者体积排阻色谱柱;

b2、所述阳离子交换色谱柱对含有所述目标蛋白的洗脱液进行阳离子交换色谱分离;或者所述体积排阻色谱柱对含有所述目标蛋白的洗脱液进行体积排阻色谱分离;获得所述目标蛋白溶液;

b3、所述第五控制模块向所述第二检测器的发送第五控制信号,控制所述第二检测器检测经过所述阳离子交换色谱柱或者体积排阻色谱柱的含有所述目标蛋白的洗脱液的紫外吸收信号,并向所述控制装置返回所述第二检测信号;

b4、所述第二计算模块根据所述第二检测信号计算所述目标蛋白溶液产品的电荷异质性或者单体纯度及分子大小异质性。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述第二维色谱分离装置包括:阳离子交换色谱柱和体积排阻色谱柱;所述proteina亲和色谱柱、阳离子交换色谱柱,或者所述proteina亲和色谱柱、所述体积排阻色谱柱通过第三多角阀与所述第一检测器连接;

第二检测器与所述阳离子交换色谱柱或者所述体积排阻色谱柱连接;

所述控制装置还包括:并联通路选择模块、第五控制模块以及第二计算模块;

所述b包括:

b5、所述并联通路选择模块通过控制所述第三多角阀的通路,设置含有所述目标蛋白的洗脱液经过所述阳离子交换色谱柱和体积排阻色谱柱;

b6、所述阳离子交换色谱柱和所述体积排阻色谱柱分别对含有所述目标蛋白的洗脱液进行阳离子交换色谱分离和体积排阻色谱分离,获得所述目标蛋白溶液;

b7、所述第五控制模块向所述第二检测器和第一检测器发送第六控制信号,检测经过所述阳离子交换色谱柱和体积排阻色谱柱的含有所述目标蛋白的洗脱液的紫外吸收信号,并向所述控制装置返回所述第二检测信号;

b8、所述第二计算模块根据所述第二检测信号计算所述目标蛋白溶液的电荷异质性和单体纯度及分子大小异质性。

6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述细胞培养取样装置包括相互连接的细胞培养罐、离心器和/或过滤器;所述控制装置还包括:第四控制模块;

所述c包括:

c1、所述第四控制模块控制所述细胞培养罐培养包含所述目标蛋白的细胞培养样品,并输送到所述离心器和/或过滤器;

c2、所述第四控制模块控制所述离心器和/或过滤器对包含所述目标蛋白的细胞培养样品进行离心和/或过滤后,获得含有所述目标蛋白的细胞培养发酵液。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述系统还包括:第一泵模组和/或废液回收器,所述第一泵模组与第一进样模组和所述第二维色谱分离装置连接,所述废液回收器与所述第二维色谱分离装置连接;

所述方法还包括:

所述第一泵模组在所述第一维色谱分离装置和第二维色谱分离装置进行色谱分离时提供流动相、等度或梯度洗脱的动力;和/或

所述第二维色谱分离装置将其进行色谱分离后产生的废液输送到所述废液回收器。

8.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述proteina亲和色谱柱、阳离子交换色谱柱以及体积排阻色谱柱设置于一个多柱位柱温箱;

所述第一检测器和第二检测器均为紫外线检测器;

所述系统还包括第一泵模组,所述第一泵模组包括左泵和右泵;所述左泵连接所述proteina亲和色谱柱,所述右泵连接所述阳离子交换色谱柱和/或体积排阻色谱柱;

所述多角阀为六角阀。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞培养样品为包含目标蛋白的细胞培养样品。

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