本发明属药物
技术领域：
，涉及一种噻唑二氢萘类衍生物以及制备方法和其应用，具体为该衍生物能够激活tgr5活性，能够用于治疗或预防与tgr5活性调节有关疾病。
背景技术：
：tgr5是一种g蛋白偶联受体，又称作gpbarl、bg37、m-bar等。它主要在肺、脾、肠以及单核细胞中表达，人类的tgr5氨基酸序列与牛，兔，大鼠，小鼠的相应序列分别有86％、90％、82％和83％的相似度。当tgr5被激活时，它可以导致细胞内的camp水平升高，从而促使肠细胞分泌的glp-1增加，进而产生降糖作用。tgr-5受体参与了血糖稳态、免疫系统、肝胆功能、胃肠道功能等的调节。其中，在胃肠道表达的tgr5，已被人们广泛研究并发现其具有许多特殊功能。在调节能量平衡方面，tgr5通过胆汁酸-tgr5-环磷酸腺苷-2型碘甲状腺原氨酸二碘酶信号通路，定向促进代谢调控。它还能增加肠道glp-1的分泌，进而促进血糖依赖的胰岛素释放，抑制食欲，减缓胃排空等，从而维持血糖稳态。tgr-5受体调节胰岛α和β细胞的功能，从而起到降糖的效果。胰岛β细胞上tgr-5受体的激活可以直接促进胰岛素的分泌，而胰岛α细胞上tgr-5受体的激活，通过epac通路，促进glp-1的分泌，从而间接地促进胰岛素的分泌。因此，tgr-5激动剂在治疗糖尿病、肥胖症等代谢性疾病方面具有潜在的治疗价值。目前，在研的tgr5激动剂多为胆汁酸类似物，为甾体类化合物副作用相对较大；非甾体类tgr5激动剂研究相对薄弱。由此可见，非甾体类tgr5激动剂的开发具有广阔的开发前景及应用价值。技术实现要素：本发明针对现有技术的不足，提供了一种噻唑二氢萘类衍生物，及其制备方法和作为tgr5激动剂中的应用。为了实现上述目的，本发明提供如通式(i)所示的噻唑二氢萘类衍生物：所述的所述的x选自o、c。所述的r1选自1-3个选自羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基。所述的r2选自1-3个选自羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基。优选的，所述r1选自1-3个选自羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷氧基、(c1-c6)烷基。优选的，所述r2选自1-3个选自羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基。本发明通式i化合物优选以下化合物，但这些化合物并不意味着对本发明的任何限制：本发明所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物用作tgr5激动剂。本发明所述的化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物作为药物用于治疗和/或预防与tgr5活性调节有关疾病。本发明所述的与tgr5活性调节有关疾病选自糖尿病、高血糖症、肥胖症、高胆固醇血症、脂质病症、脂肪肝。本发明含有通式i的衍生物可以通过包括化学领域众所周知的方法来合成，尤其按照本发明公开的路线1的方法，具体为：由各种取代的1-四氢萘酮为起始原料，经过vilsmeier-haack-arnold反应制备中间体2，再与噻唑-4-硼酸经过suzuki偶联反应制备中间体3。中间体3经氧化反应将醛氧化成酸，得到中间体4，最终与最后与苯并噁嗪或四氢喹啉通过酰胺反应，得到目标产物。合成路线1如下：合成路线1试剂和条件:(a)dmf,pbr3,chcl3,rt；(b)thiazol-4-ylboronicacid,pd(oac)2,k2co3,etoh,80℃；(c)naocl,naoh,etoh/h2o,80℃；(d)edci,hobt,diea,rt.本发明的积极进步效果在于：本研究团队设计并合成了一系列新的噻唑二氢萘类衍生物。此类衍生物具有很好的活性并且骨架新颖，在非甾体类tgr5激动剂开发中具有较大的研究价值。具体实施方式下面提供的实施例旨在阐述而不是限制本发明的范围。原料一般可以从商业来源获取的或者使用本领域技术人员所熟知的方法来制备，或根据本发明所述的方法制备。未经特殊说明，所用试剂均为分析纯或化学纯。实施例1。(1)1-溴-3,4-二氢萘-2-甲醛的制备将n,n-二甲基甲酰胺2.1ml(30.0mmol)加入10ml氯仿中，冰浴降温至0℃后，缓慢加入三溴化磷2.8ml(27.0mmol)，继续维持0℃搅拌2h后，分批加入1-四氢萘酮1.5g(10.0mmol)，升至室温反应6h。tlc检测反应完成，将反应液缓慢慢倒入冰水中，反应液用碳酸氢钠调节ph为8-9。用二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂，减压蒸除溶剂，残余物经硅胶柱层析纯化得黄色油状物0.91g，收率38.4％。ms(esi)m/z238.1[m+h]+。(2)1-(噻唑-4-基)-3,4-二氢萘-2-甲醛的制备。将1-溴-3,4-二氢萘-2-甲醛1.0g(4.2mmol)、噻唑-4-硼酸0.5g(4.2mmol)、碳酸钾1.2g(8.4mmol)、醋酸钯47mg,(0.21mmol)，溶于乙醇-水混合溶液中，然后氮气保护下升温至80℃。反应6htlc检测反应完成，冷却至室温，蒸除溶剂，向残余物中加入乙酸乙酯，依次用水、饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化，得淡黄色油状物0.61g，收率59.9％。(3)1-(噻唑-4-基)-3,4-二氢萘-2-甲酸的制备将1-(噻唑-4-基)-3,4-二氢萘-2-甲醛500mg(2.07mmol)溶于乙醇中，然后加入次氯酸钠308mg(4.14mmol)和氢氧化钠165mg(4.14mmol)水溶液，升温至回流反应。24h后tlc检测反应完成，降温蒸除溶剂，加入20ml水，然后用2n的hcl调节ph至4-5，然后用乙酸乙酯萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化，得黄色油状物420mg，收率78.8％。ms(esi)m/z258.3[m+h]。(4)目标化合物的合成将1-(噻唑-4-基)-3,4-二氢萘-2-甲酸400mg(1.55mmol)溶于dmf中，再依次加入edci357mg(1.87mmol)和hobt252mg(1.87mmol)。在室温下反应1h后加入苯并吗啉231mg(1.71mmol)和diea719mg(3.11mmol)，升温至70℃反应8h。tlc检测反应完成，将温度降至室温，反应液倒入100ml水中，析出固体，过滤、干燥，粗品经硅胶柱层析纯化得354mg白色固体。收率60.8％。ms(esi)m/z375.4[m+h]+.1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),8.45(s,1h),7.65(m,1h),7.41-7.24(m,5h),7.08-7.02(m,2h),4.38(t,j＝7.1hz,2h),4.09(t,j＝7.3hz,2h),3.14(t,j＝7.1hz,2h),2.94(t,j＝7.2hz,2h).按照实施例1的方法，以各种取代的1-四氢萘酮为起始原料，利用各种取代的苯并吗啉或四氢喹啉为中间体，经vilsmeier-haack-arnold反应、suzuki偶联反应、氧化反应和缩合四步反应制备得到实施例2-8。实施例2。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.14(s,1h),8.44(s,1h),7.30-7.18(m,4h),7.08-7.02(m,2h),6.90-6.88(m,1h),4.36(t,j＝7.2hz,2h),4.05(t,j＝7.2hz,2h),3.12(t,j＝7.1hz,2h),2.95(t,j＝7.0hz,2h).ms(esi)m/z393.1[m+h]+.实施例3。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.13(s,1h),8.45(s,1h),7.38-7.24(m,5h),7.08-7.04(m,2h),4.36(t,j＝7.2hz,2h),4.07(t,j＝7.3hz,2h),3.11(t,j＝7.3hz,2h),2.92(t,j＝7.2hz,2h).ms(esi)m/z409.2[m+h]+.实施例4。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.45(s,1h),7.38(d,j＝7.4hz,1h),7.26-7.20(m,2h),7.10-7.02(m,4h),4.36(t,j＝7.0hz,2h),4.10(t,j＝7.3hz,2h),3.12(t,j＝7.1hz,2h),2.94(t,j＝7.1hz,2h),2.31(s,3h).ms(esi)m/z389.1[m+h]+.实施例5。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.10(s,1h),8.44(s,1h),7.38-7.34(m,2h),7.12-7.06(m,3h),6.85-6.80(m,2h),4.37(t,j＝7.2hz,2h),4.07(t,j＝7.3hz,2h),3.72(s,3h),3.13(t,j＝7.1hz,2h),2.94(t,j＝7.2hz,2h).ms(esi)m/z405.2[m+h]+.实施例6。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.45(s,1h),7.75(d,j＝1.5hz,1h),7.28(s,1h),7.22(s,1h),7.05-7.02(m,2h),4.36(t,j＝7.1hz,2h),4.09(t,j＝7.3hz,2h),3.15(t,j＝7.2hz,2h),2.94(t,j＝7.3hz,2h).ms(esi)m/z461.1[m+h]+.实施例71h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),8.44(s,1h),7.74(d,j＝1.5hz,1h),7.32(d,j＝7.5hz,1h),7.10-7.04(m,3h),6.86(m,1h),4.35(t,j＝7.1hz,2h),4.08(t,j＝7.3hz,2h),3.15(t,j＝7.2hz,2h),2.92(t,j＝7.3hz,2h).ms(esi)m/z411.1[m+h]+.实施例81h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.11(s,1h),8.44(s,1h),7.29(s,1h),7.23(s,1h),6.85-6.67(m,4h),3.19-3.12(m,4h),2.94(t,j＝7.3hz,2h),2.68(t,j＝7.1hz,2h),1.82-1.79(m,2h).ms(esi)m/z441.1[m+h]+.实施例91h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),8.42(s,1h),7.61(d,j＝7.4hz,1h),7.30(s,1h),7.23(s,1h),7.20-7.16(m,2h),3.20-3.12(m,4h),2.95(t,j＝7.3hz,2h),2.74(t,j＝7.1hz,2h),1.81-1.78(m,2h).ms(esi)m/z455.1[m+h]+.tgr5激动活性测试htrf均相时间分辨荧光技术：稳转细胞株的建立，用构建好的质粒ha-hgr5-pcdna3.1在hek293细胞中进行表达。在稳定表达tgr5的细胞株中加入ibmx，按4×103个细胞/孔/5μl细胞密度接种至384孔板，然后加入5μl含不同浓度(0-100μm)的待测化合物，int-777为阳性对照药，混合均匀，室温下避光孵育30min。然后分别加入稀释好的5μlcamp-d2和5μlanti-camp-cryptate，离心混合均匀。室温避光反应1h，最后在酶标仪中进行读数，见表1。表1tgr5激动活性测试结果。实施例ec50(μm)实施例125.6实施例26.9实施例319.2实施例430.2实施例526.9实施例63.4实施例78.5实施例840.6实施例936.2尽管已经通过特定实施方案描述了本发明，但修改和等价变化对于精通此领域的技术人员而言是显见的，且它们都包含在本发明范围。当前第1页12