一种表达CD3抗体受体复合物的免疫细胞及其用途的制作方法

文档序号:23589073发布日期:2021-01-08 14:24阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种改造的免疫细胞,其包含cd3抗体受体复合物,所述cd3抗体受体复合物包含第一cd3重组蛋白和第二cd3重组蛋白,其中所述第一cd3重组蛋白包含:

(1)第一胞外域,所述第一胞外域包含源自cd3epsilon结构域的胞外域,

(2)第一跨膜域,

(3)第一胞内结构域;

所述第二cd3重组蛋白包含:

(1)第二胞外域,所述第二胞外域包含源自选自cd3gamma结构域和cd3delta结构域中任意一种的胞外域,

(2)第二跨膜域,

(3)第二胞内结构域;且,

其不表达t细胞受体(tcr)。

2.根据权利要求1所述的改造的免疫细胞,其包括t细胞、b细胞、天然杀伤细胞(nk细胞)、巨噬细胞、nkt细胞、单核细胞、树突状细胞、粒细胞、淋巴细胞、白细胞和/或外周血单个核细胞。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述cd3epsilon结构域的胞外域包含如seqidno:1所示的氨基酸序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第二胞外域包含源自cd3gamma结构域的胞外域。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述cd3gamma结构域的胞外域包含如seqidno:2所示的氨基酸序列。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第二胞外域包含源自cd3delta结构域的胞外域。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述cd3delta结构域的胞外域包含如seqidno:4所示的氨基酸序列。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一跨膜域和所述第二跨膜域相同或不同。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述跨膜域不包含源自cd3的跨膜域。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述跨膜域包含源自选自下组任意一种蛋白的跨膜域:cd8α、cd28、4-1bb、cd4、cd27、cd7、pd-1、trac、trbc、cd3ε、cd5、icos、ox40、nkg2d、2b4、cd244、fcεriγ、btla、cd30、gitr、hvem、dap10、cd2、nkg2c、light、dap12,cd40l、tim1、cd226、dr3、cd45、cd80、cd86、cd9、cd16、cd22、cd33、cd37、cd64、cd134、cd137、cd154和slam。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述跨膜域包含seqidno:7所示的氨基酸序列。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一胞内结构域和所述第二胞内结构域相同或不同。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一胞内结构域和所述第二胞内结构域中的至少一种包含共刺激结构域和/或信号转导结构域。

14.根据权利要求13中所述的改造的免疫细胞,其中所述第一胞内结构域中包含的共刺激结构域和所述第二胞内结构域中包含的共刺激结构域相同或不同。

15.根据权利要求13-14中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述共刺激结构域包含源自选自下组任意一种或多种蛋白的共刺激结构域:cd28、cd137、cd27、cd2、cd7、cd8、ox40、cd226、dr3、slam、cds、icam-1、nkg2d、nkg2c、b7-h3、2b4、fcεriγ、btla、gitr、hvem、dap10、dap12、cd30、cd40、cd40l、tim1、pd-1、lfa-1、light、jaml、cd244、cd100、icos、cd83的配体、cd40和myd88。

16.根据权利要求13-15中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述共刺激结构域包含如seqidno:8所示的氨基酸序列。

17.根据权利要求13-16中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一胞内结构域中包含的信号转导结构域和所述第二胞内结构域中包含的信号转导结构域相同或不同。

18.根据权利要求13-17中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述信号转导结构域包含至少包含一个免疫受体酪氨酸活化基序(itam)。

19.根据权利要求13-18中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述信号转导结构域包含源自选自下组任意一种或多种蛋白的信号转导结构域:cd3zeta、cd3delta、cd3gamma、cd3ε、cd79a、cd79b、fceriγ、fceriβ、fcγriia、牛白血病病毒gp30、epstein-barr病毒(ebv)lmp2a、猿免疫缺陷病毒pbj14nef、卡波西肉瘤疱疹病毒(hskv)、dap10和dap-12。

20.根据权利要求13-19中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述信号转导结构域包含如seqidno:9所示的氨基酸序列。

21.根据权利要求1-20中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述胞外域和跨膜域之间还包含铰链区。

22.根据权利要求21所述的改造的免疫细胞,其中所述铰链区包含源自选自下组任意一种或多种蛋白的铰链区:cd8α、cd28、4-1bb、cd4、cd27、cd7和pd-1。

23.根据权利要求21-22中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述铰链区包含seqidno:6中任一项所示的氨基酸序列。

24.根据权利要求1-23中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一胞内结构域和所述第二胞内结构域中的一种包含至少两个氨基酸的肽段。

25.根据权利要求1-24中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第一cd3重组蛋白包括源自cd3epsilon结构域的胞外域、源自cd28的跨膜区、源自cd28的胞内域和源自cd3zeta的胞内域。

26.根据权利要求25所述的改造的免疫细胞,其中所述第一cd3重组蛋白包括seqidno:10所示的氨基酸序列。

27.根据权利要求1-26中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第二cd3重组蛋白包括源自cd3gamma结构域的胞外域、源自cd28的跨膜区和源自cd3gamma的胞内域。

28.根据权利要求27所述的改造的免疫细胞,其中所述第二cd3重组蛋白包括seqidno:11所示的氨基酸序列。

29.根据权利要求1-26中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第二cd3重组蛋白包括源自cd3gamma结构域的胞外域、源自cd28的跨膜区和所述肽段。

30.根据权利要求29所述的改造的免疫细胞,其中所述第二cd3重组蛋白包括seqidno:12所示的氨基酸序列。

31.根据权利要求1-30中任一项所述的改造的免疫细胞,其还包含第三cd3重组蛋白,所述第三cd3重组蛋白包含:

(1)第三胞外域,所述第三胞外域的至少一部分包含源自选自cd3gamma结构域或cd3delta结构域中任意一种的胞外域,

(2)第三跨膜域,和

(3)第三胞内结构域。

32.根据权利要求31所述的改造的免疫细胞,其中所述第三胞外域与所述第二胞外域相同或不同。

33.根据权利要求31-32中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第三跨膜域与所述第一跨膜域和/或所述第二跨膜域相同或不同。

34.根据权利要求31-33中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述第三胞内结构域与所述第一胞内结构域和/或第二胞内结构域相同或不同。

35.根据权利要求1-34中任一项所述的改造的免疫细胞,其中主要组织相容性复合体(mhc)的表达和/或活性下调。

36.根据权利要求35所述的改造的免疫细胞,其中所述mhc复合体包括b2m。

37.根据权利要求1-36中任一项所述的改造的免疫细胞,其中所述的改造的免疫细胞包含嵌合抗原受体(car)和/或嵌合自身抗体受体(caar)。

38.药物组合物,其包含权利要求1-37中任一项所述的改造的免疫细胞和药学上可接受的佐剂。

39.根据权利要求38中所述的药物组合物,其包括抗体。

40.根据权利要求38-39中任一项所述的药物组合物,其中所述抗体能够识别和/或结合所述cd3抗体受体复合物。

41.根据权利要求38-40中任一项所述的药物组合物,其中所述抗体包括双特异性抗体。

42.根据权利要求38-41中任一项所述的药物组合物,其中所述双特异性抗体源自权利要求1-37中任一项所述的改造的免疫细胞。

43.根据权利要求38-42中任一项所述的药物组合物,其中所述双特异性抗体能够识别和/或结合cd3。

44.根据权利要求38-43中任一项所述的药物组合物,其中所述双特异性抗体能够识别和/或结合靶细胞表面的受体。

45.根据权利要求44所述的药物组合物,其中所述靶细胞为肿瘤细胞。

46.根据权利要求44-45中任一项所述的药物组合物,其中所述靶细胞表面的受体选自下组中的一种:cd19、cd2、cd3、cd4、cd5、cd7、cd8、cd19、cd20、cd22、cd25、cd28、cd30、cd33、cd38、cd40、cd44v6、cd47、cd52、cd56、cd57、cd58、cd79b、cd80、cd86、cd81、cd123、cd133、cd137、cd151、cd171、cd276、cll1、b7h4、bcma、vegfr-2、egfr、gpc3、pmsa、ceacam6、c-met、egfrviii、erbb2/her2、erbb3、her-2、her3、erbb4/her-4、epha2、igf1r、gd2、o-乙酰基gd2、o-乙酰基gd3、ghrhr、ghr、flt1、kdr、flt4、flt3、cea、ca125、ctla-4、gitr、btla、tgfbr1、tgfbr2、tgfbr1、il6r、gp130、lewis、tnfr1、tnfr2、pd1、pd-l1、pd-l2、psca、hvem、mage-a、msln、ny-eso-1、psma、rank、rorl、tnfrsf4、tweak-r、ltpr、lifrp、lrp5、muc1、muc16、tcrα、tcrβ、tlr7、tlr9、ptch1、wt-1、robol、卷曲受体(frizzled)、ox40、notch-1-4、april、cs1、mage3、claudin18.2、叶酸受体α、叶酸受体β、gpc2、cd70、baff-r和trop-2。

47.核酸分子,其编码权利要求1-37中任一项所述的改造的免疫细胞中的cd3抗体受体复合物。

48.载体,其包含权利要求47所述的核酸分子。

49.根据权利要求48所述的载体,其为病毒载体。

50.根据权利要求48-49中任一项所述的载体,其为慢病毒载体。

51.细胞,其包含权利要求47所述的核酸分子和/或权利要求48-50中任一项所述的载体。

52.权利要求1-37中任一项所述的改造的免疫细胞和/或权利要求38-46中任一项所述的药物组合物在制备药物中的用途,所述药物用于治疗肿瘤。

53.根据权利要求52所述的用途,其中所述肿瘤包括实体瘤和非实体瘤。

54.根据权利要求52-53中任一项所述的用途,其中所述肿瘤选自以下组:淋巴瘤、白血病和多发性骨髓瘤。

55.治疗肿瘤的方法,所述方法包括向有需要的受试者施用权利要求1-37中任一项所述的改造的免疫细胞、权利要求38-46中任一项所述的药物组合物。

56.根据权利要求55所述的方法,其中所述肿瘤包括实体瘤和非实体瘤。

57.根据权利要求55-56中任一项所述的方法,其中所述肿瘤选自以下组:淋巴瘤、白血病和多发性骨髓瘤。


技术总结
一种改造的免疫细胞,其不表达T细胞受体(TCR),并包含CD3抗体受体复合物。还涉及包含所述改造的免疫细胞和双特异性抗体的药物组合物,以及所述药物组合物在制备药物中的用途。

技术研发人员:王文博;郭佩佩;冯爱华;林彦妮
受保护的技术使用者:苏州克睿基因生物科技有限公司
技术研发日:2020.07.03
技术公布日:2021.01.08
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