鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法与流程

文档序号:32302652发布日期:2022-11-23 08:54阅读:来源:国知局

技术特征:
1.鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法,其特征在于:包括以下步骤:step1、用大容量电动移液器分别移取3份35ml鲜活水生动物运输用水样本置于3个50ml离心管中,在4℃、2 500g条件下离心30min,将上清液分别转移到另外3个50ml离心管中备用;step2、在step1中的3个50ml离心管中分别加入3.5g
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0.1g氯化钙和0.79g
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0.01g无水磷酸氢二钠,充分混合,直至试剂完全溶解,然后在4℃、12000g条件下离心120min,离心机降速时不应使用制动力,离心机停止后倾倒并弃除离心管中的上清液,至无上清液流出;step3、在4℃、12000g条件下将step2离心后剩余的样本再次离心5min,离心机降速时不应使用制动力,离心机停止后用移液器从离心管中吸出并弃除剩余的上清液;step4、吸取0.4mlpbs溶液加入到其中的一个离心管中,反复吹吸沉淀,瞬时离心,使所有液体聚集在管底,将混悬液吸出并加入到第二个离心管中;step5、重复吹吸沉淀和瞬时离心的操作后,再次将混悬液吸出并加入到第三个离心管中;step6、续重复吹吸沉淀和瞬时离心的操作,最终形成的混悬液即为该水样的浓缩液,体积约为0.6ml。step7、将浓缩液转移至1.5ml离心管中,于0℃~4℃条件下保存,并于24h内测定该样品水样的病毒效价,根据实际抽取的水样量计算实际水中的病毒效价。2.根据权利要求1所述的鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法,其特征在于,step1中所述鲜活水生动物运输用水样本悬浮物含量过高,可能影响病毒效价测定时,应采用预离心弃除悬浮物后再进行后续操作。3.根据权利要求1所述的鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法,其特征在于,step1中所述鲜活水生动物运输用水样本需要进行前处理,清除水样中的消毒剂。4.根据权利要求1所述的鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法,其特征在于,step1中所述大容量电动移液器需要预先使用紫外线杀菌24小时以上。

技术总结
本发明公开了鲜活水生动物运输用水中病毒的富集方法,涉及环境监测技术领域,本发明包括以下步骤:用大容量电动移液器分别移取3份35mL鲜活水生动物运输用水样本置于3个50mL离心管中,在4℃、2500g条件下离心30min,将上清液分别转移到另外3个50mL离心管中备用;在Step1中的3个50mL离心管中分别加入3.5g


技术研发人员:郑晓聪 刘荭 吴江 朱裕敏 王津津 朱鹏
受保护的技术使用者:深圳市检验检疫科学研究院
技术研发日:2022.10.08
技术公布日:2022/11/22
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