一种包含15种支原体qPCR快速检测试剂盒及其使用方法和应用与流程

文档序号:33899367发布日期:2023-04-21 07:39阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒至少包含15组引物序列,分别为:莱氏无胆支原体引物序列选自seq id no.1~2中至少一项、精氨酸支原体引物序列选自seq id no.3~4中至少一项、发酵支原体引物序列选自seq id no.5~6中至少一项、鸡毒支原体引物序列选自seq id no.7~8中至少一项、生殖支原体引物序列选自seq id no.9~10中至少一项、人型支原体引物序列选自seq id no.11~12中至少一项、猪鼻支原体引物序列选自seq id no.13~14中至少一项、猪肺炎支原体引物序列选自seq id no.15~16中至少一项、口腔支原体引物序列选自seq id no.17~18中至少一项、梨支原体引物序列选自seq id no.19~20中至少一项、肺炎支原体引物序列选自seqid no.21~22中至少一项、唾液支原体引物序列选自seq id no.23~24中至少一项、滑液支原体引物序列选自seq id no.25~26中至少一项、咽支原体引物序列选自seq id no.27~28中至少一项和耳支原体引物序列选自seq id no.29~30中至少一项。

2.根据权利要求1所述的一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒,其特征在于,所述引物序列在扩增体系中的终浓度是:seq id no.1和/或seq id no.2为0.15μm;seq idno.3和/或seq id no.4为0.12μm;seq id no.5和/或seq id no.6为0.14μm;seq id no.7和/或seq id no.8为0.16μm;seq id no.9和/或seq id no.10为0.19μm;seq id no.11和/或seq id no.12为0.2μm;seq id no.13和/或seq id no.14为0.24μm;seq id no.15和/或seq id no.16为0.11μm;seq id no.17和/或seq id no.18为0.09μm;seq id no.19和/或seq id no.20为0.1μm;seq id no.21和/或seq id no.22为0.1μm;seq id no.23和/或seqid no.24为0.06μm;seq id no.25和/或seq id no.26为0.1μm;seq id no.27和/或seq idno.28为0.14μm;seq id no.29和/或seq id no.30为0.21μm。

3.根据权利要求1或2所述的一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括pcr扩增反应试剂、复合扩增引物混合物、阴性对照和阳性对照。

4.根据权利要求3所述的一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中阳性对照为含有15种支原体靶标序列的质粒dna和15个质粒的混合物;阴性对照为超纯水。

5.一种使用权利要求1或2所述的一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒的方法,其特征在于,包括以下步骤:

6.权利要求1或2所述的一种同时扩增15种支原体qpcr快速检测试剂盒在检测细胞基因治疗产品中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述细胞基因治疗产品为细胞库支原体和/或慢病毒载体支原体。


技术总结
本发明提供了一种同时扩增15种支原体qPCR快速检测试剂盒包括PCR扩增反应试剂、复合扩增引物混合物、阳性对照和阴性对照,可在单管反应中复合扩增莱氏无胆支原体、精氨酸支原体、发酵支原体、鸡毒支原体、生殖支原体、人型支原体、猪鼻支原体、猪肺炎支原体、口腔支原体、梨支原体、肺炎支原体、唾液支原体、滑液支原体、咽支原体及耳支原体。本发明利用支原体PCR检测,在体外模拟体内的DNA复制,通过温度的变化来控制DNA的复性和变性,引物作为启动子,在Taq酶,dNTP的作用下可以扩增支原体特定的核酸序列,用于支原体的定性检测和细胞基因治疗产品的检测,如细胞库支原体检测,慢病毒载体支原体检测等。

技术研发人员:李发院,杨林森,段云飞,杜嘉伟,乐亚南,陈琪
受保护的技术使用者:无锡生基医药科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/11
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