一种银耳菌株TYH-SD1、InDel标记及引物和鉴定方法与流程

本发明涉及食用菌，具体涉及一种银耳菌株tyh-sd1、indel标记及引物和鉴定方法。

背景技术：

1、银耳(tremella fuciformis berk)在分类学上隶属于担子菌门(basidiomycota)、银耳纲(tremellomycetes)、银耳目(tremellales)、银耳科(tremellaceae)、银耳属(tremella)，是中温、好气性真菌，为我国久负盛名的食药用菌，产量占全球90％以上。银耳富含碳水化合物、17种人体必需氨基酸、维生素及多种生物活性物质，可提高机体免疫力，具有抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂等功效，拥有广阔的开发前景。

2、但随着人们生活水平的提供，对现有的银耳品种要求也越来越高，开发新的银耳品种也是极有意义的。

技术实现思路

1、为了解决现有技术存在的上述不足，本发明的第一个目的是提供一种银耳菌株，命名为银耳(tremella fuciformis)tyh-sd1(下称福银黄耳tyh-sd1)，于2023年04月07日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 2023494，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

2、本发明第二个目的是提供一种用于鉴定上述福银黄耳tyh-sd1品种的indel标记，该indel标记位于73bp-82bp，核苷酸序列为tgttcgtcgt；或

3、位于203bp-212bp，核苷酸序列为cgaacacgac；或

4、位于125bp-133bp，核苷酸序列为agccttgtt；或

5、位于141bp-142bp，核苷酸序列为cc；或

6、位于196bp-198bp，核苷酸序列为ttc；或

7、位于255bp-256bp，核苷酸序列为cc。

8、本发明第三个目的是提供用于扩增上述福银黄耳tyh-sd1品种indel标记的引物对，具体如下：

9、引物对1：

10、31-f：5’-aacgggcattgtgggtgcaagtat-3’；

11、31-r：5’-gagatgatgtctagggggagatcgag-3’；

12、引物对2：

13、32-f：5’-ttcgtcctgtaatttggacatttctactcgttcg-3’；

14、32-r：5’-ggagaggcgactgatgcagctttttcggtag-3’；

15、引物对3：

16、33-f：5’-aatgagctcgcgtacgacagccga-3’；

17、33-r：5’-tcatttcaagacctcccggcggg-3’。

18、本发明第四个目的是提供一种采用上述引物对鉴定福银黄耳tyh-sd1品种的方法，包括以下步骤：

19、(1)提取待测样品的基因组dna；

20、(2)以基因组dna为模板，利用上述引物对对基因组dna进行pcr扩增，得到pcr扩增产物；

21、(3)将pcr扩增产物回收、测序、比对，若位于73bp-82bp，核苷酸序列为tgttcgtcgt；或

22、位于203bp-212bp，核苷酸序列为cgaacacgac；或

23、位于125bp-133bp，核苷酸序列为agccttgtt；或

24、位于141bp-142bp，核苷酸序列为cc；或

25、位于196bp-198bp，核苷酸序列为ttc；或

26、位于255bp-256bp，核苷酸序列为cc，则说明待测样品为福银黄耳tyh-sd1。

27、在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进：

28、进一步，pcr扩增体系为：上下游引物各1μl，dna模板1μl，2×easytaq pcrsupermix 12.5μl，ddh2o 9.5μl。

29、进一步，pcr扩增程序为：94℃预变性5min，94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1min，33个循环，72℃延伸5min，4℃保存。

30、本发明具有以下有益效果：

31、本发明提供的福银黄耳tyh-sd1是以“古田银耳tr21”和“绣银1号”两个不同品种为亲本菌株，通过孢子弹射获得担孢子，芽殖形成酵母状孢子，将酵母状孢子杂交配对，根据杂交株具有双核菌丝和锁状联合的特征筛选获得“福银黄耳”。福银黄耳tyh-sd1子实体呈淡黄色，半透明，朵型圆整、紧密度小、呈菊花型，耳片细碎、边缘呈不规则锯齿状，耳片柔软且富有弹性，钙含量高，有更高的生物学效率，有很好的应用前景。

32、本发明提供的用于鉴定福银黄耳tyh-sd1品种的indel标记、引物和鉴定方法，能够很好的将福银黄耳tyh-sd1与其他银耳品种尤其是与亲本区分开来。

技术特征：

1.一种银耳(tremella fuciformis)菌株，命名为tyh-sd1，于2023年04月07日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 2023494，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

2.一种用于鉴定权利要求1所述的tyh-sd1的indel标记，其特征在于，所述indel标记位于73bp-82bp，核苷酸序列为tgttcgtcgt；或

3.用于扩增权利要求2所述tyh-sd1的indel标记的引物对，其特征在于，引物对序列如下：

4.采用权利要求3所述的引物对鉴定tyh-sd1的方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，pcr扩增体系为：上下游引物各1μl，dna模板1μl，2×easytaq pcr supermix 12.5μl，ddh2o 9.5μl。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，pcr扩增程序为：94℃预变性5min，94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1min，33个循环，72℃延伸5min，4℃保存。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，若位于73bp-82bp，核苷酸序列为tgttcgtcgt；或

技术总结
本发明公开了一种银耳菌株TYH‑SD1、InDel标记及引物和鉴定方法，TYH‑SD1于2023年04月07日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2023494，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。TYH‑SD1子实体呈淡黄色，半透明，朵型圆整、紧密度小、呈菊花型，耳片细碎、边缘呈不规则锯齿状，耳片柔软且富有弹性，钙含量高，有更高的生物学效率，有很好的应用前景。本发明提供的用于鉴定TYH‑SD1品种的InDel标记、引物和鉴定方法，能够很好的将福银黄耳TYH‑SD1与其他银耳品种区分开来。

技术研发人员：张琪辉,孙淑静,谢家成,张凌姗,林铃,王丽芬,张海洋
受保护的技术使用者：古田县食用菌研发中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15