一种用于检测鸭源性成分的LAMP-Taqman引物和探针组合、试剂盒及应用的制作方法

文档序号:35682817发布日期:2023-10-08 22:35阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于检测鸭源性成分的lamp-taqman引物和探针组合,其特征在于,包括:

2.如权利要求1所述的用于检测鸭源性成分的lamp-taqman引物和探针组合,其特征在于,所述环引物探针lbp的5′端标记有荧光基团,3′端标记有荧光淬灭基团。

3.如权利要求2所述的用于检测鸭源性成分的lamp-taqman引物和探针组合,其特征在于,所述环引物探针lbp为:5′-fam-ggaggattctcagt ggataacc-3′bhq。

4.权利要求1-3任一项所述的用于检测鸭源性成分的lamp-taqman引物和探针组合在非诊断性检测鸭源性成分中的应用。

5.一种用于检测鸭源性成分的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1-3任一项所述的用于检测鸭源性成分的lamp-taqman引物和探针组合。

6.如权利要求5所述的用于检测鸭源性成分的试剂盒,其特征在于,还包括缓冲液、dna聚合酶、硫酸镁溶液、dtnps和去离子水。

7.利用权利要求5所述的试剂盒检测鸭源性成分的方法,其特征在于,具体操作为:提取鸭源性成分的核酸为模板,用所述试剂盒进行lamp扩增,并在扩增过程中进行实时荧光检测。

8.如权利要求7所述的检测鸭源性成分的方法,其特征在于:所述lamp扩增的体系包括以下试剂及用量:1×thermopol buffer,bst dna polymerase large fragment 8u,taqdna polymerase 5u,mgso4 1.4mm,dntps1.4mm,内引物fip 2.0μm,内引物bip 2.0μm,外引物f3 0.5μm,外引物b30.5μm,环引物lf 1.5μm,环引物探针lbp 1.5μm,ddh2o补足24μl。

9.如权利要求7所述的检测鸭源性成分的方法,其特征在于:所述lamp扩增的反应温度为60℃-63℃,反应时间为26min-50min。

10.如权利要求9所述的检测鸭源性成分的方法,其特征在于:所述lamp扩增的反应温度为60℃,反应时间为30min。


技术总结
本发明涉及肉及肉制品安全检测技术领域,具体公开一种用于检测鸭源性成分的LAMP‑Taqman引物和探针组合、试剂盒及应用。所述检测鸭源性成分的引物和探针中,内引物FIP的序列如SEQ ID NO:1,内引物BIP的序列如SEQ ID NO:2,外引物F3的序列如SEQ ID NO:3,外引物B3的序列如SEQ ID NO:4,环引物LF的序列如SEQ ID NO:5,环引物探针的序列如SEQ ID NO:6。利用本发明的引物和探针,可实现对鸭源性成分的准确检测,且可避免非特异性扩增导致的假阳性结果的出现,特异性强、灵敏度高、最低检出质量浓度为0.001%,最快仅需26min即可完成检测。

技术研发人员:时国强,董振国,柳梦思,高娜婷
受保护的技术使用者:河北三狮生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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