1.一种可溶性单链抗体j5d,其特征在于,所述可溶性单链抗体的氨基酸序列如seq idno.3所示。
2.如权利要求7所述的可溶性单链抗体j5d的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1还包括以下步骤:
4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2还包括提取所述重组原核表达质粒pmal-c5x-j5d,化学法转化origami2感受态细胞,阳性克隆保存备用。
5.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3还包括以下步骤:取含所述重组原核表达质粒pmal-c5x-j5d的origami2大肠杆菌菌液在含氨苄青霉素的lb固体培养基上划线,培养;挑单克隆于含氨苄青霉素的lb液体培养基中,振荡培养;扩大培养,当od600为0.6左右时,取3ml未诱导菌液,离心后弃第一上清,将第一沉淀于-20℃保存;向剩余菌液中加入iptg诱导,振荡培养,取菌液,离心后弃第二上清,将第二沉淀于-20℃保存;剩余诱导后的菌液离心,弃上清,收集菌体,加入lysis buffer重悬,使用超声波细胞粉碎机破碎菌体释放蛋白,分别收集可能含有可溶性蛋白的上清和可能含有不溶性蛋白的沉淀;所述第一沉淀为未诱导菌体、所述第二沉淀为诱导后菌体、所述可能含有可溶性蛋白的上清为诱导菌体破碎后上清、所述可能含有不溶性蛋白的沉淀为诱导菌体破碎后沉淀,将所述未诱导菌体、所述诱导后菌体、所述诱导菌体破碎后上清、所述诱导菌体破碎后沉淀利用sds-page鉴定j5d蛋白是否成功诱导表达,以及是否为可溶性表达。
6.一种重组原核表达质粒pmal-c5x-j5d,其特征在于,所述重组原核表达质粒氨基酸序列如seq id no.4所示。
7.如权利要求6所述的重组原核表达质粒pmal-c5x-j5d的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
8.如权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述步骤1)中所述上游引物含nde i限制性内切酶酶切位点,所述下游引物含hind iii限制性内切酶酶切位点和his标签编码序列。
9.如权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述步骤1)中所述上游引物为5h-fndei,所述5h-f ndei的核苷酸序列如seq id no.5所示,所述下游引物为5k-rhindiii,所述5k-r hindiii的核苷酸序列如seq id no.6所示。
10.如权利要求1所述的可溶性单链抗体j5d在广谱识别不同基因型人源诺如病毒的试剂中的应用。