一种融合蛋白及其制备方法与流程

文档序号:37118789发布日期:2024-02-22 21:20阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种重组融合蛋白,含有牛病毒性腹泻病毒e2抗原和传染性牛鼻气管炎病毒gd抗原和牛的抗体fc蛋白片段,所述抗体fc蛋白片段为牛的igg的重链恒定区片段,其氨基酸序列如seq id no.1所示;

2.根据权利要求1所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述牛病毒性腹泻病毒e2抗原的氨基酸序列如seq id no.5所示;

3.根据权利要求1所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述传染性牛鼻气管炎病毒gd抗原的氨基酸序列如seq id no.6所示;

4.根据权利要求1所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述e2抗原与gd抗原单独分别与牛的抗体fc蛋白片段通过富含甘氨酸和丝氨酸的linker连接;或所述e2抗原与gd抗原融合后与牛的抗体fc蛋白片段通过富含甘氨酸和丝氨酸的linker连接。

5.根据权利要求1所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述重组融合蛋白氨基酸序列如seq id no.7-seq id no.15中任一项所示。

6.一种根据权利要求1-5中任一项所述重组融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述重组融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述重组融合蛋白的编码基因序列如seq id no.22-seq id no.30中任一项所示。

8.一种cho细胞株,为中国仓鼠卵巢细胞slpcb03,保藏编号为cctccno:c2022315。

9.一种如权利要求1-5中任一项所述重组融合蛋白或如权利要求8所述的cho细胞株在制备预防牛病毒性腹泻和传染性牛鼻气管炎的疫苗中的应用。

10.一种如权利要求1-5中任一项所述重组融合蛋白或如权利要求8所述的cho细胞株在制备预防和/或治疗牛病毒性腹泻和传染性牛鼻气管炎的药物中的应用。


技术总结
本发明公开了一种融合蛋白及其制备方法;所述重组融合蛋白含有牛病毒性腹泻病毒E2抗原和传染性牛鼻气管炎病毒gD抗原和牛的抗体Fc蛋白片段,所述抗体Fc蛋白片段为牛的IgG的重链恒定区片段,或为牛的IgG的重链恒定区片段的突变体。本发明构建了融合蛋白突变体,该突变体相对于野生型的融合蛋白,免疫持续期显著提高。构建并筛选得到亚单位融合蛋白的CHO细胞株,该细胞株表达重组亚单位融合蛋白产量高达0.5‑1.3g/L、易于纯化,细胞培养上清中的目的蛋白纯度都能达到85%以上,只需一步亲和层析就能使目的蛋白纯度达到90%以上,远远满足亚单位疫苗和诊断试剂的需求,易于大规模生产。

技术研发人员:宗宇雨,翟伟锋,殷波,徐晶晶,张震
受保护的技术使用者:申联生物医药(上海)股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/2/21
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