一种芽孢杆菌及其制备与应用的制作方法

本发明涉及一种芽孢杆菌，具体涉及一种芽孢杆菌及其制备与应用。

背景技术：

1、现有技术利用氟啶胺、百菌清、氰霜唑等化学防治十字花科根肿病或者魔芋软腐病，直接在栽种过程中蘸根或者灌溉防治，存在防治效果不理想、化学药剂农残危害等问题。利用施用百菌清等化学药剂进行根肿病和软腐病防治时，直接在栽种过程中进行种球包衣或者灌根处理，但是化学防治效果也不理想，且化学防治的持效性不足，后期达不到预期的防治效果。

2、芽孢杆菌是一类重要的微生物菌株，以能够产生芽孢而著称。芽孢的形成可以抵御外界的生物和非生物胁迫，同时产生的次生代谢产物为芽孢杆菌的抗逆作用提供保障。因此，芽孢杆菌作为生防菌的一种在农业生产上发挥重要作用。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种芽孢杆菌及其制备与应用，解决了现有化学防治效果不佳和持效性不足问题。

2、为了达到上述目的，本发明提供了一种芽孢杆菌(bacillus subtilis zhl1)，该芽孢杆菌保藏编号为cctcc no：m2023839，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2023年5月29日。

3、本发明提供了一种生防菌粉剂，该生防菌粉剂由所述的芽孢杆菌发酵制得。

4、本发明提供了一种如所述的生防菌粉剂的制备方法，该方法包含：

5、(1)将所述的芽孢杆菌接种到lb液体培养基中，30℃，震荡培养得到培养液；

6、(2)将得到的培养液接种至固体发酵培养基中，37℃连续发酵后，在80℃烘干，粉碎制得所述生防菌粉剂。

7、优选地，所述固体发酵培养基的成分为麸皮、豆粕、玉米粉、谷壳、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙和石灰。

8、更优选地，所述麸皮、豆粕、玉米粉、谷壳、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙和石灰的质量比为600∶60∶100∶200∶10∶6∶3.5∶0.1∶10∶22。

9、更优选地，在步骤(1)中，所述震荡的转速为170r/min；所述lb液体培养基的成分为酵母提取物、蛋白胨、nacl、琼脂粉和超纯水，ph为7.4～7.6；其中所述酵母提取物、蛋白胨、nacl、琼脂粉和超纯水的质量体积比为5g∶10g∶5g∶(15～20)g∶1000ml。

10、更优选地，在步骤(2)中，所述培养液与固体发酵培养基的重量比为1∶100；所述发酵的时间为7～8天。

11、本发明提供了一种如所述的芽孢杆菌或如所述的生防菌粉剂在防治根肿病和/或魔芋软腐病中的应用。

12、本发明提供了一种如所述的生防菌粉剂在植物促生中的应用。

13、优选地，所述植物包含甘蓝、魔芋和白菜。

14、本发明的一种芽孢杆菌及其制备与应用，解决了现有化学防治效果不佳和持效性不足的问题，具有以下优点：

15、本发明生防菌粉剂不仅具有防治根肿病和/或魔芋软腐病的效果，还具有植物促生的效果。其中，在甘蓝生长后期，生防菌粉剂防治甘蓝根肿病的效果显著高于化学防治，生防菌粉剂处理的甘蓝产量略高于对照，以及使用生防菌粉剂处理的甘蓝根系仍然保持健康状态，根系粗壮，根毛丰富；生防菌粉剂除了对魔芋软腐病具有防治效果，还可以促进魔芋球茎和芋鞭生长，说明生防菌粉剂具有抗病促生的双重功能；生防菌粉剂具有促进小白菜生长的作用，与在甘蓝和魔芋上使用后的促生效果一致。

技术特征：

1.一种芽孢杆菌(bacillus subtilis)，其特征在于，该芽孢杆菌保藏编号为cctccno：m2023839，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2023年5月29日。

2.一种生防菌粉剂，其特征在于，该生防菌粉剂由权利要求1所述的芽孢杆菌发酵制得。

3.一种如权利要求2所述的生防菌粉剂的制备方法，其特征在于，该方法包含：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述固体发酵培养基的成分为麸皮、豆粕、玉米粉、谷壳、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙和石灰。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述麸皮、豆粕、玉米粉、谷壳、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、硫酸锰、碳酸钙和石灰的质量比为600∶60∶100∶200∶10∶6∶3.5∶0.1∶10∶22。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述震荡的转速为170r/min；所述lb液体培养基的成分为酵母提取物、蛋白胨、nacl、琼脂粉和超纯水，ph为7.4～7.6；其中所述酵母提取物、蛋白胨、nacl、琼脂粉和超纯水的质量体积比为5g∶10g∶5g∶(15～20)g∶1000ml。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述培养液与固体发酵培养基的重量比为1∶100；所述发酵的时间为7～8天。

8.一种如权利要求1所述的芽孢杆菌或如权利要求2所述的生防菌粉剂在防治根肿病和/或魔芋软腐病中的应用。

9.一种如权利要求2所述的生防菌粉剂在植物促生中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物包含甘蓝、魔芋和白菜。

技术总结
本发明公开了一种芽孢杆菌及其制备与应用，该芽孢杆菌保藏编号为CCTCCNO：M2023839，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2023年5月29日。本发明提供了一种生防菌粉剂，该生防菌粉剂由所述的芽孢杆菌发酵制得。本发明还提供了一种如所述的生防菌粉剂的制备方法。本发明解决了现有化学防治效果不佳和持效性不足的问题，制得的生防菌粉剂不仅具有防治根肿病和魔芋软腐病的效果，还有植物促生的效果。

技术研发人员：姜继红,王登杰,余韩开宗,吴海冰,牛义松,毕司进,刘玲利,刘威,向薇薇
受保护的技术使用者：绵阳市农业科学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/8