1.一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:它采用磁珠的细胞分选方案进行细胞分离,制备单细胞悬液后,用抗cd11b粒子标记肿瘤或瘤周组织的阳性细胞,标记后,使用bdimagtm磁性细胞分选仪分离细胞,收集阴性(cd11b-)和阳性(cd11b+)部分进行分析。
2.根据权利要求1所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:它包含骨髓来源的巨噬细胞的获得、动物模型的建立、免疫印迹实验、免疫荧光染色、免疫组织化学与实时定量pcr分析。
3.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:骨髓来源的巨噬细胞的获取;
4.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:建立动物模型;其中,动物为tbk1fl/fl小鼠与lysm-cre小鼠,通过tbk1fl/fl小鼠与lysm-cre小鼠杂交,获得tbk1fl/fllysm-cre(以下命名为tbk1-mko)和tbk1fl/fl野生型(wt)小鼠;通过pcr基因型鉴定确定基因型,选择6-8周龄小鼠用于研究,饲养条件为受控条件(光照/黑暗循环12h,相对湿度60%±10%,温度22±1℃)。
5.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:gbm的动物模型;
6.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:免疫印迹;
7.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:免疫荧光染色;荷瘤小鼠于第3周麻醉,经4%多聚甲醛灌注,切除肿瘤组织,并在4%多聚甲醛中后固定,使用震荡切片机切割为25μm的切片。用马血清封闭30min后,0.3%triton x-100pbs在室温下打孔30min后,加入一抗,在4℃下孵育过夜,切片用荧光二抗孵育1h,并用hoechst33342在37℃的避光容器中进行核染色15min。使用荧光共聚焦显微镜获得图像。
8.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:免疫组织化学;
9.根据权利要求2所述一种调节巨噬细胞极化的方法,其特征在于:实时定量pcr;提取细胞总rna后,利用逆转录系统合成cdna,用sybr green在m3005p仪器上进行测定,所有样品在95℃反应体系中处理10min,然后在95℃、60℃、72℃分别扩增10s、20s、20s,循环40次,通过δct方法将靶基因的ct水平归一化为gapdh的水平,计算相对基因表达水平,使用δδct方法将数据进一步归一化到实验对照样本(2-δδct)。