苹果叶多酚的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物活性成分提取技术领域，具体涉及苹果叶多酚的提取方法。
【背景技术】
[0002]苹果叶为蔷薇科植物苹果的叶，性味苦寒，凉血解毒。我国是世界上最大的苹果生产国，产量占世界总产量的40%，其中辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、山东等为主要的苹果产地，仅陕西一省的苹果叶年产量就高达400万吨，大量苹果叶掉落腐烂，造成资源的极大浪费。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种苹果叶多酚的提取方法，该方法制得的苹果叶多酚纯度高，收率大。
[0004]本发明提供的技术方案是提供一种苹果叶多酚的提取方法，包括以下步骤:
[0005]I)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
[0006]2)用乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
[0007]3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
[0008]4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。
[0009]上述步骤2)中，苹果叶中含有蛋白质和碳水化合物，采用乙醇为溶媒，不利于蛋白质和碳水化合物的溶解，可减少杂质成分的溶出，对后续纯化有益。乙醇体积浓度为20?30%为佳，乙醇浓度过高会对蛋白质产生凝聚作用，使得蛋白质滞留在颗粒的内部孔道中，反而增加苹果叶多酚的扩散阻力，降低终产品的收率。乙醇浓度过低则杂质含量较大，影响终产品的纯度。
[0010]上述步骤4)中，pH值至4?5。
[0011 ] 上述步骤4)中，乙醇的体积浓度为60?90 %。
[0012]上述步骤4)中，合并液的上样流速为0.5BV/h ;水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV。
[0013]与现有技术相比，本发明制得的苹果叶多酚纯度在98%以上，收率在10%以上，且色泽较浅。
【具体实施方式】
[0014]以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
[0015]实施例1
[0016]I)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
[0017]2)用20?30v%乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
[0018]3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
[0019]4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4?5值，然后上DA201大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为11.1g苹果叶多酚。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.2%。
[0020]实施例2
[0021]I)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
[0022]2)用20?30v%乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
[0023]3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
[0024]4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4?5值，然后上DA201大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.5g苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.0%。
[0025]实施例3
[0026]I)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
[0027]2)用20?30v%乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
[0028]3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
[0029]4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4?5值，然后上DM301大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.Sg苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.4%。
[0030]实施例4
[0031]I)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
[0032]2)用20?30v%乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
[0033]3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
[0034]4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4?5值，然后上DM301大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.5g苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.1%。
【主权项】
1.苹果叶多酚的提取方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉； 2)用乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液； 3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液； 4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。
2.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于:步骤2)中，乙醇的体积浓度为20?30%。
3.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于:步骤4)中，pH值至4?5。
4.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于:步骤4)中，乙醇的体积浓度为60?90%。
5.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于:步骤4)中，合并液的上样流速为0.5BV/h ;水洗流速为2.5?3BV/h，水的洗脱量为5?6BV ;乙醇的洗脱流速为2?2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4?5BV。
【专利摘要】本发明公开了一种苹果叶多酚的提取方法，包括以下步骤：1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；2)用乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。本方法制得的苹果叶多酚纯度高，收率大。
【IPC分类】C07G99-00
【公开号】CN104530142
【申请号】CN201410715237
【发明人】周冠旻
【申请人】桂林市和胤祥新型材料有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年11月28日