一种聚乙二醇单甲醚修饰甘草次酸作为肝靶向给药载体及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体设及一种聚己二醇单甲離修饰甘草次酸作为肝祀向给 药载体及其制备方法。 技术背景
[0002] 目前，肝癌在我们的发病率较高，原发性肝癌发发病率占全球的45%，死亡率在恶 性肿瘤中高达第二位，5年之内的存活率仅有5%。目前来看，治疗癌症的方法有器官移植、 放疗、化疗等方法。对于肝癌，器官移植收到供体的匿乏的严重限制并存在免疫排斥问题； 放疗会直接损伤胆管，一般不用于肝癌的治疗。因此，使用抗肿瘤药物的"化疗法"在肝癌 的治疗中占有重要的地位。目前来看，"化疗法"效果不明显，其主要原因是大多抗肿瘤药物 的水溶性较差，祀向性较低，毒性大，加之肝脏本身对药物的耐受能力有限，药物剂量小时 作用甚微；大剂量用药无疑会严重损伤其它脏器导致器官衰竭。因此发展可控性肝祀向性 的给药载体对肝脏肿瘤的治疗十分必要，已成为新一代药物传递系统的重点研究方向。肝 革己向给药载体（Hepatic targeted化ug delivery System，HTODS)可将药物高效输送至 肝脏并在病变部位高浓度富集，减轻药物对其它脏器的损害，减少用药剂量和给药次数，提 高疗效。
[0003] 目前，载体胶束作为药物载体已经显示了较好的应用前景，其组成材料具有生 物可降解性，毒性小等特点，还可缓释药物，延长药物作用时间；静脉给药后可由肝脏 Kuppfer细胞摄取而被动祀向于肝，使药物达到肝器官的目的。但是普通胶束容易被调理素 识别，被肝脏W外的其他单核巨瞻细胞系统吞瞻，存在选择性差，祀向效率低的问题。
[0004] Negishi等在证实了离体大鼠肝细胞均浆的细胞膜组分中含有多量甘草次酸 (Glycyrrhetinicacid，GA)特异结合为点，在所有脏器组织中，肝脏的GA结合位点活性 最高。GA与该结合位点的结合可成饱和性、高度特异性，且该结合位点具有蛋白质性质。国 内也有学者用投射电镜进行观察，证实了肝细胞表面确实存在大量GA受体。随后国内外一 些学者纷纷报道了W甘草酸/甘草次酸修饰的脂质体或血清蛋白可W在肝脏组织中富集。
[0005] 如毛声俊在肝细胞祀向甘草次酸表面修饰脂质体的制备[中国中药杂志，2003 年 4 月第28 卷第4 期，323-331] W 毛声俊在 2007 年 Pr 巧 aration，characterization and updtake by primary cultured rat hepatocytes of liposomes sufer-modofied with glycyrrhetinic acid .化armazie，[ORIGINAL，ARTICLES, 2007 年，62 卷第 8 期； 614-619]中公开了一种甘草次酸表面修饰脂质体，它是将GA与硬脂醇、班巧酸酢偶联，合 成一新型两亲性导向分子，将其渗入脂质体中，介导该修饰脂质体与肝细胞表面的GA受体 特异结合，W期达到肝细胞主动祀向作用。该甘草次酸表面修饰脂质体简称LP-SM-GA。制 得的甘草次酸修饰的脂质体平均粒径在65~79nm之间，甘草次酸修饰脂质体的摩尔含量 最高位10%。又如，中国专利申请CN101006983A公开了甘草酸修饰壳聚糖/駿化壳聚糖复 合载药纳米粒的制备方法，甘草酸修饰组可进入鼠肝实质细胞的细胞核中，相同时间内巧 光标记的甘草酸盐修饰的纳米粒在肝实质细胞的巧光强度对照组强于对照组，具体是将甘 草酸盐为祀向基团，通过静电相互作用制备成载药纳米粒而并未设及甘草次酸的相关内容 (文献报道肝细胞膜上甘草次酸的结合位点多余甘草酸);中国专利申请CN1743008A公开了 甘草次酸修饰的壳聚糖纳米粒子并表现出明显的祀向性，但是甘草次酸直接修饰壳聚糖的 制备条件较为意义重大；中国专利CN101254308B制备了甘草次酸-氨基聚己二醇/壳聚糖 或壳聚糖衍生物肝祀向复合纳米粒，体外细胞实验显示对肝细胞有很强的结合能力，可提 高给药载体的肝祀向能力，能实现对肝脏的祀向定位。
[0006] 但现有技术反应收率低，反应产物纯度不高，水溶解性低，肝祀向能力不足，反应 成本高，并且反应大多W化晚作为缚酸剂，中和反应中生成的盐酸，但化晚毒性大，易损害 实验人员健康，而且回收困难。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种聚己二醇单甲離修饰甘草次酸作为肝祀向给药载体及 其制备方法，具有收率高、水溶解性高、纯度、肝祀向能力、毒性小、成本低和回收简单的优 点。
[000引为解决W上技术问题，本发明采用W下技术方案： 一种聚己二醇单甲離-甘草次酸作为肝祀向给药载体的制备方法，所述制备方法包括 W下步骤： (1)聚己二醇单甲離-对甲苯横酸醋（mPEG-OTs)的制备； (2) 聚己二醇单甲離-邻苯二甲酯亚胺（mPEG-PI)的制备； (3) 单端氨基聚己二醇单甲離（mPEG-NHs)的制备； (4) 聚己二醇单甲離-甘草次酸（mPEG-180-GA)的制备。
[0009] W下是对上述技术方案的进一步优化： 所述聚己二醇单甲離-甘草次酸作为肝祀向给药载体的制备方法中采用的有机溶剂 为：无水己離，二氯甲烧和N，N-二甲基甲酯胺值MF)。
[0010] 所述聚己二醇单甲離-对甲苯横酸醋（mPEG-OTs)的制备方法包括W下步骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
[0011] 所述反应步骤中：聚己二醇单甲離（m阳G)与对甲苯横酷氯（TsCn)的摩尔比为 1~3 ;3~9。
[001引所述聚己二醇单甲離-邻苯二甲酯亚胺（mPEG-PI)的制备方法包括W下步骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
[001引所述反应步骤中；聚己二醇单甲離-对甲苯横酸醋（m阳G-OTs)与邻苯二甲酯亚胺 钟（PPI)的摩尔比为1~6 ;3~18。
[0014] 所述单端氨基聚己二醇单甲離（mPEG-NHs)的制备方法包括W下步骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
[0015] 所述聚己二醇单甲離-甘草次酸（mPEG-18 0 -GA)的制备方法包括W下步骤： (1) 反应步骤； 其中单端氨基单甲氧基聚己二醇（mPEG-NH2)、180-GA、DCC和N服的摩尔比为；3~ 12 ;1 ~4 ;3 ~12 ;3 ~12 ; (2) 提纯步骤。
[0016]所述 mPEG-OTs 收率为 84. 54% W上，mPEG-PI 收率为 88. 96% W上，mPEG-N肥收率 为 88. 72% W上，mPEG-18 0 -GA 收率为 82. 43% W上。
[0017]所述 mPEG-OTs 的纯度为 95. 74% W上，mPEG-PI 的纯度为 96. 88% W上，mPEG-NHa 的纯度为99. 51% W上，mPEG-18 0 -GA的纯度为99. 65% W上。
[001引当甘草次酸的駿基与单氨基聚己二醇单甲離反应时，得到聚己二醇单甲離-甘草 次酸（mPEG-18 0-GA);
【主权项】
1. 一种聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法，其特征在于：所 述制备方法包括以下步骤： (1)聚乙二醇单甲醚-对甲苯磺酸酯（mPEG-OTs)的制备； (2) 聚乙二醇单甲醚-邻苯二甲酰亚胺（mPEG-PI)的制备； (3) 单端氨基聚乙二醇单甲醚（mPEG-NH2)的制备； (4) 聚乙二醇单甲醚-甘草次酸（mPEG-180-GA)的制备。
2. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法中采用的有 机溶剂为：无水乙醚，二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺（DMF)。
3. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述聚乙二醇单甲醚-对甲苯磺酸酯（mPEG-OTs)的制备方法包括以下步骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
4. 如权利要求3所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述反应步骤中：聚乙二醇单甲醚（mPEG)与对甲苯磺酰氯（TsCl)的摩尔比 为1~3 :3~9〇
5. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述聚乙二醇单甲醚-邻苯二甲酰亚胺（mPEG-PI)的制备方法包括以下步 骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
6. 如权利要求5所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述反应步骤中：聚乙二醇单甲醚-对甲苯磺酸酯（mPEG-OTs)与邻苯二甲酰 亚胺钾（PPI)的摩尔比为1~6:3~18。
7. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述单端氨基聚乙二醇单甲醚OiiPEG-NH2)的制备方法包括以下步骤： (1) 反应步骤； (2) 提纯步骤。
8. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述聚乙二醇单甲醚-甘草次酸（mPEG-18 0 -GA)的制备方法包括以下步骤： (1) 反应步骤； 其中单端氨基单甲氧基聚乙二醇（mPEG-NH2)、180-GA、DCC和NHS的摩尔比为：3~ 12 :1 ~4 :3 ~12 :3 ~12; (2) 提纯步骤。
9. 如权利要求1所述的聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法， 其特征在于：所述mPEG-OTs收率为84. 54%以上，mPEG-PI收率为88. 96%以上，mPEG-NH2收 率为88. 72%以上，mPEG-18 0 -GA收率为82. 43%以上。
10. -种聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法制备的聚乙二醇 单甲醚-甘草次酸，其特征在于：所述mPEG-OTs的纯度为95. 74%以上，mPEG-PI的纯度为 96. 88% 以上，mPEG-NHd^纯度为 99. 51% 以上，mPEG-18 0-GA的纯度为 99. 65% 以上。
【专利摘要】本发明公开了一种聚乙二醇单甲醚-甘草次酸作为肝靶向给药载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：（1）聚乙二醇单甲醚-对甲苯磺酸酯(mPEG-OTs)的制备；（2）聚乙二醇单甲醚-邻苯二甲酰亚胺(mPEG-PI)的制备；（3）单端氨基聚乙二醇单甲醚(mPEG-NH2)的制备；（4）聚乙二醇单甲醚-甘草次酸（mPEG-18β-GA）的制备；该给药载体，具有水溶解性高、肝靶向能力高和纯度高的优点；所述mPEG-OTs的收率为84.54%以上，纯度为95.74%以上，mPEG-PI的收率为88.96%以上，纯度为96.88%以上，mPEG-NH2的收率为88.72%以上，纯度为99.51%以上，mPEG-18β-GA收率为82.43%以上，纯度为99.65%以上。
【IPC分类】A61K47-34, C08G65-48, A61P1-16
【公开号】CN104725631
【申请号】CN201510073481
【发明人】郑增娟, 张维芬, 于英杰, 管宇
【申请人】郑增娟
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年2月12日