一种具有增肥效果的秸秆腐解菌剂及其应用_2

文档序号:8454017阅读:来源:国知局
所述±壤可 为枯杆还田的±壤或未枯杆还田的±壤;
[0026] C、提高农作物产量的方法,包括向±壤中施入所述菌剂,提高农作物的产量;所述 ±壤可为枯杆还田的±壤或未枯杆还田的±壤;所述农作物可为玉米和/或水稻。
[0027] 本申请中,所述增加±壤肥力可体现在±壤氮素的增加。
[002引在本发明的实施例中,所述农作物枯杆可为玉米枯杆或油菜枯杆,所述提高农作 物产量可为提高玉米产量或提高水稻产量。
[0029] 实验证明,本发明提供的枯杆腐熟菌剂能快速腐解玉米枯杆和油菜枯杆,菌剂施 用20天就有显著的效果;施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂20天后玉米枯杆的总分解率 为62. 1 %,为未施用菌剂玉米枯杆对照的总分解率的1. 91倍;施用本发明的提供的枯杆腐 熟菌剂20天后油菜枯杆的总分解率为58. 1%,为未施用菌剂油菜枯杆对照的总分解率的 2. 17倍。本发明提供的枯杆腐熟菌剂还能够增加±壤中氮素含量,施用30天就有显著的增 肥效果:在玉米枯杆还田的±壤中,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂30天后±壤中的氮 素含量为2. 3g/kg±壤,未施用菌剂30天后±壤中的氮素含量为1. 5g/kg±壤,W未施用 菌剂的±壤氮素含量为对照,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂30天后±壤氮素含量的 增加率为53. 3% ;在油菜枯杆还田的±壤中,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂30天后± 壤中的氮素含量为2. 2g/kg±壤,未施用菌剂30天后±壤中的氮素含量为1. 5g/kg±壤, W未施用菌剂的上壤氮素含量为对照,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂30天后±壤氮 素含量的增加率为46. 7%。本发明提供的枯杆腐熟菌剂还可提高农作物产量,对玉米和水 稻均有显著的增产效果,在玉米枯杆还田的±壤中,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂的 玉米产量为692千克/亩,未施用菌剂的玉米产量为553千克/亩,作物增产率为25. 1 % ; 在油菜枯杆还田的±壤中,施用本发明的提供的枯杆腐熟菌剂的水稻产量为673千克/亩, 未施用菌剂的水稻产量为567千克/亩,作物增产率为18. 7%。
【具体实施方式】
[0030] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐 明本发明,而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为 常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
[003U 下述实施例中所用的黑曲霉ZM-8(AspergillusnigerZM-8)CCTCCN0;M209125 于2009年6月10日保藏于中国典型培养物保藏中屯、(简称CCTCC,地址为;中国武汉武汉 大学)。在下文中简称黑曲霉ZM-8。
[003引 下述实施例中所用的拟康氏木霉(Trichodermapseudokoningii)CGMCC NO. 3. 6608于2003年4月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(简 称CGMCC),自该保藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、获得该 菌株。
[003引 下述实施例中所用的鲜绿青霉(Penicilliumvisidicatum)CGMCCNO. 3. 5933于 2002年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(简称CGMCC), 自该保藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、获得该菌株。
[0034] 下述实施例中所用的解木聚糖梭菌(Clostridiumx5danol}ft;ixum)DSM No. 6555(即解木聚糖梭菌(Clostridiumx5danol}rticum)DSMNo. 6555T)为DSMZ产品, 记载该菌株的相关文献为化amkhaMl,GarciaJL,L油atM.Met油olismofcinnamic acidsbysomeClostridialesandemendationofthedescriptionsofClostridium aerotolerans,ClostridiumcelerecrescensandClostridiumxylanolyticum.IntJ SystEvolMicrobiol. 2001Nov;51(Pt6):2105-11。
[0035] 下述实施例中所用的枯草芽胞杆菌炬acillussubtilis)ACCCNo. 03189于1978 年6月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中屯、(简称ACCC,地址;北京 市海淀区中关村南大街12号,中国农业科学院农业资源与农业区划研究所,邮编100081), 自该保藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中屯、获得该菌株。
[0036] 下述实施例中所用的圆褐固氮菌-1为圆褐固氮菌(AzotobacterC虹oococcum) CGMCCNO. 1. 2391,于1999年8月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中屯、(简称CGMCC),自该保藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 屯、获得该菌株。在本申请中简称圆褐固氮菌-1。
[0037] 下述实施例中所用的圆褐固氮菌-2为圆褐固氮菌(AzotobacterC虹oococcum) CGMCCNO. 1.0142于1957年4月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 屯、(简称CGMCC),自该保藏日起公众可从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、 获得该菌株。在本申请中简称圆褐固氮菌-2。
[003引下述实施例中所用的培养基如下:
[0039] 1号培养基(查氏培养基);溶质及其浓度为;NaN〇3 3g/L,K2HP〇4lg/L,KCl0. 5g/ L,M拆〇4 ? 7&0 0. 5g/L,FeS〇4 0.Olg/L,庶糖 20g/L,琼脂 15g/L;溶剂为水;pH7. 0 + 0. 1。 121°C高压灭菌15min。
[0040] 2号培养基(PDA培养基);去皮的马铃馨200g切成小块,加入IL蒸馈水煮沸30 分钟,过滤,向滤液中加入葡萄糖和琼脂各15g,用蒸馈水定容至比,PH7.0 + 0.l,12rC高 压灭菌ISmin。
[0041] 3号培养基(Mandels改良营养盐液);溶质及其浓度为;(畑4)2SO42g/L, M拆O4? 7&0 0. 5g/L,KH2PO40.Ig/L,玉米枯杆粉 2g/L;溶剂为水;pH7. 0 + 0. 1。121°C高压 灭菌ISmin。
[0042] 4号培养基(PCS改良培养基);溶质及其浓度为;蛋白腺5g/l,酵母粉Ig/l,玉 米枯杆粉 5g/L,化C1 5g/L,K2HP〇4lg/L,M拆〇4.7&0 0. 35g/L,CaC〇3 3g/L;溶剂为水; pH7. 2 + 0. 1。12TC高压灭菌 15min。
[0043] 5号培养基;溶质及其浓度为;甘露醇20g/l,酵母浸膏0. 5g/l,KH2PO40. 2g/l, K2HPO40.8g/L,M拆O4? 7&0 0. 2g/L,CaS〇4? 2&0 0.Ig/L,FeCls0. 002g/L,Na2Mo〇4? 2&0 0. 0004/L;溶剂为水;pH7. 2 + 0. 1。12TC高压灭菌 15min。
[0044] 6号培养基:向5号培养基中加琼脂至其含量为15g/L得到的培养基。
[0045] 下述实施例中所述的吸附载体由凹凸椿粘±粉和食用菌渣按照2 ;3的质量比(干 重)混合而成。其中,凹凸椿粘±粉的粒径为0.10-0. 15mm,为安徽省明光市国星凹±有限 公司产品;食用菌渣为用农作物枯杆、木屑等作为代料栽培原料制成培养基,待食用菌收获 后培养基的剩余物,食用菌渣粒径大小为2. 00-3. 00mm。
[0046] 实施例1、菌剂的制备
[0047] 1、活化
[0048] 1. 1、将黑曲霉ZM-8接种在1号培养基上,置于30°C培养箱培养3天,得到活化的 黑曲霉ZM-8(AspergillusnigerZM-8)CCTCCN0;M209125。
[0049] 1. 2、将拟康氏木霉(Trichodermapseudokoningii)CGMCCNO. 3. 6608 和鲜绿 青霉(Penicilliumvisidicatum)CGMCCNO. 3. 5933 分别接种在 2
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