一种伊曲康唑的手性拆分方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及手性药物制备方法，尤其涉及一种伊曲康唑的手性拆分方法，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002]伊曲康唑是一种三唑类广谱抗真菌药物，其英文名称为Itraconazole，中文化学名顺-4- [4- [4- [4- [ [-2- (2，4- 二氯苯基)-2- (1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3- 二氧戊环-4-基]甲氧基]苯基]哌嗪-1-基]苯基]-2-[(2’ S)-l-甲基丙基]-1,2，4-三唑-3-酮。伊曲康唑有3个手性碳原子，共有8种光学异构体，抗真菌临床使用的是其结构中二氧环戊烷上4个顺式异构体的混合物，对应为2 S，4 R，2 ’ R-伊曲康唑(A)、2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑(C)、2R，4S, 2’ R-伊曲康唑(B)及2R, 4S, 2’ S-伊曲康唑(D)。研宄发现，伊曲康唑各异构体的生物活性及毒副作用存在较大差异，如CN103263417A公开了伊曲康唑异构体组合能够提高对真菌和内皮细胞的选择性，同时是也是具有治疗真菌及血管新生相关疾病潜力的候选药物，单一构型的光学纯伊曲康唑还能显著降低肝细胞毒性，可避免伊曲康唑引起的副作用。
[0003]光学纯伊曲康唑可以通过手性合成的方法制得，如专利US2013/0102614A1提供了一种手性合成伊曲康唑4个顺式异构体的技术路线，但合成路线长，操作复杂，需要使用的光学纯起始物料市场上没有供应，需要特殊定制，因此价格比较昂贵，同时合成过程中也产生了大量有机废液和废渣，不符合绿色化合的要求。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对现有技术存在的不足，提供伊曲康唑的手性拆分方法，制备纯伊曲康唑光学异构体，简化制备的步骤，降低生产成本，制备过程符合绿色化合的要求。
[0005]为实现上述目的，本发明采用的技术方案是:
[0006]一种伊曲康唑的手性拆分方法，以消旋伊曲康唑为原料，利用超临界流体手性色谱法，通过手性色谱柱，用二氧化碳和强极性有机溶剂组成的流动相进行洗脱，经两次分离纯化，得到四种伊曲康唑光学异构体。该方法工艺操作简单，产品纯度高，可作为药物研发对照品使用，制备过程中，所用试剂可回收利用，生产中几乎不产生污染。
[0007]该方法包括以下步骤:
[0008](I)将消旋伊曲康唑溶解，利用制备型超临界流体色谱仪和手性色谱柱，制备型超临界流体色谱仪为MG III preparative SFC ;手性色谱柱为ChiralPakAS-10 μ, 300 X 50mml.D，用流动相进行洗脱，将消旋伊曲康唑进行一次分离，得到2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物为混合物I以及2R，4S, 2’ S-伊曲康唑和2R，4S, 2’ R-伊曲康唑的混合物为混合物II ；
[0009](2)将一次分离得到的混合物I溶解，利用制备型超临界流体色谱仪和手性色谱柱，制备型超临界流体色谱仪为MG III preparative SFC ;手性色谱柱为ChiralPakAS-1O μ，300X50mm1.D，用流动相进行洗脱，进行二次分离，得到2S，4R, 2’ S-伊曲康唑和2S, 4R，2’ R-伊曲康唑；
[0010](3)将一次分离得到的混合物II溶解，利用制备型超临界流体色谱仪和手性色谱柱，制备型超临界流体色谱仪为Thar 350 preparative SFC ;手性色谱柱为ChiralCel0J-10 μ，300X50mm1.D，用流动相进行洗脱，进行二次分离，得到2R，4S, 2’ R-伊曲康唑和2R, 4S，2’ S-伊曲康唑。
[0011]消旋伊曲康唑、混合物I和混合物II的溶剂为甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶剂。甲醇与二氯甲烷的混合溶剂二者之比为1:1。
[0012]流动相为二氧化碳和强极性有机溶剂的混合物，强极性有机溶剂为甲醇、乙醇、乙月青。
[0013]步骤(I)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为30:70?40:60，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，手性色谱柱温度为30°C?50°C，消旋伊曲康唑溶解浓度为20?30mg/ml。进样量为6ml。
[0014]步骤(2)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为25:75?35:65，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，手性色谱柱温度为30°C?50°C，混合物I溶解浓度为15?25mg/ml。进样量为4ml。
[0015]步骤(3)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为35:65?45:55，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，手性色谱柱温度为30°C?50°C，混合物II溶解浓度为15?25mg/ml。进样量为4ml。
[0016]步骤(I)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为35:65，流动相的流速为200ml/min，手性色谱柱温度为38°C。
[0017]步骤(2)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为30:70，流动相的流速为200ml/min，手性色谱柱温度为38°C，混合物I的溶解浓度为20mg/ml。
[0018]步骤(3)中强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为40:60，流动相的流速为200ml/min ;手性色谱柱温度为38°C，混合物II溶解浓度为20mg/ml。
[0019]强极性有机溶剂为甲醇。
[0020]本发明与现有相比，具有以下优点:
[0021]方法工艺操作简单，所用原料容易获得，在制备过程中使用的有机试剂可通过减压蒸馏回收利用，几乎不产生污染，和手性合成所得到的产品相比，产品光学纯度高，制备的光学纯产品适合作为药物研发中的对照品使用，这对进一步开发伊曲康唑的医药用途具有十分重要的意义。
【附图说明】
[0022]图1消旋伊曲康唑液相手性分析图谱。
[0023]图2 2S, 4R, 2’ R-伊曲康唑液相手性分析图谱。
[0024]图3 2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑液相手性分析图谱。
[0025]图4 2R, 4S, 2’ R-伊曲康唑液相手性分析图谱。
[0026]图5 2R, 4S, 2’ S-伊曲康唑液相手性分析图谱。
【具体实施方式】
[0027]下面结合【具体实施方式】，进一步阐明本发明，应理解这些实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
[0028]一种伊曲康唑的手性拆分方法，包括以下步骤:
[0029](I)将消旋伊曲康唑溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶剂，溶解浓度为20?30mg/ml，制备型超临界流体色谱仪MG III preparative SFC和手性色谱柱ChiralPakAS-10 μ, 300X50mml.D，采用流动相进行洗脱，将消旋的伊曲康唑进行一次分离，收集的各组分于40°C下减压蒸馏至干，得到2S，4R，2’ S-伊曲康唑和2S，4R，2’ R-伊曲康唑的混合物为混合物I以及2R，4S, 2’ S-伊曲康唑和2R，4S, 2’ R-伊曲康唑的混合物为混合物II，流动相二氧化碳和强极性有机溶剂的混合物，强极性有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈，强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为30:70?40:60，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，优选为200ml/min，手性色谱柱温度为30°C?50°C，优选38°C，消旋伊曲康唑溶解浓度为20?30mg/ml，进样量为6ml，检测波长为220nm，洗脱时间为9min ；。
[0030](2)将一次分离得到的混合物I溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶剂，制备型超临界流体色谱仪为MG III preparative SFC ;手性色谱柱为ChiralPakAS-10 μ，300X50mm1.D，采用流动相进行洗脱，进行二次分离，收集的各组分于40°C下减压蒸馏至干，得到2S，4R, 2’S-伊曲康唑和2S，4R, 2’R-伊曲康唑，流动相二氧化碳和强极性有机溶剂的混合物，强极性有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈，强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为25:75?35:65，优选30:70，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，优选为200ml/min，手性色谱柱温度为30°C?50°C，优选38°C，混合物II溶解浓度为15?25mg/ml，优选20mg/ml，进样量为4ml，检测波长为220nm，洗脱时间为3.5min ；
[0031](3)将一次分离得到的混合物II溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶剂，制备型超临界流体色谱仪为Thar 350 preparative SFC ;手性色谱柱为ChiralCel0J-10 μ，300X50mm1.D，用流动相进行洗脱，进行二次分离，收集的各组分于40°C下减压蒸馏至干，得到2R，4S, 2’ R-伊曲康唑和2R，4S, 2’ S-伊曲康唑，流动相为二氧化碳和强极性有机溶剂的混合物，强极性有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈，强极性有机溶剂和二氧化碳的体积比为35:65?45:55，优选40:60，流动相的流速为180ml/min?220ml/min，优选200ml/min,手性色谱柱温度为30°C?50°C，优选38°C，混合物II溶解浓度为15?25mg/ml，优选为20mg/ml，进样量为4ml，检测波长为220nm，洗脱时间为5min。
[0032]消旋伊曲康唑、混合物I和混合物II的溶剂为甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶剂，优选甲醇与二氯甲烷的混合溶剂二者之比为1:1。
[0033]实施例一
[0034]2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑混合物(混合物I )及2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物II )的制备
[0035]将消旋伊曲康唑溶于甲醇与二氯甲烷按体积比1:1组成的混合溶剂中，制备得到样品溶液，浓度为25mg/ml ；
[0036]利用制备型超临界流体色谱仪MG III preparative SFC,将样品注入色谱柱，色谱柱为ChiralPak AS-10 μ，300X50mm,并用甲醇和二氧化碳组成的洗脱剂进行洗脱，进样量为6ml，甲醇和二氧化碳的体积比为35:65，洗脱溶剂流速为200ml/min，色谱柱温度为38°C，检测波长为220nm ;总洗脱时间为9min ；
[0037]收集先出峰的两个色谱峰，将收集液于40°C下减压浓缩至干，得到混合物I约73mg ;收集后出峰的两个色谱峰，将收集液于40°C下减压浓缩至干，得到混合物II约74mg。
[0038]实施例二
[0039]2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物I )及2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物II )的制备
[0040]将消旋伊曲康唑溶于甲醇中，制备得到样品溶液，浓度为20mg/ml ;
[0041]利用制备型超临界流体色谱仪MG III preparative SFC,将样品注入色谱柱，色谱柱为ChiralPak AS-10 μ，300 X 50mm,并用二氧化碳和甲醇组成的洗脱剂进行洗脱，进样量为6ml，甲醇和二氧化碳的体积比为30:70，洗脱溶剂流速为220ml/min，色谱柱温度为50°C，检测波长为220nm ;总洗脱时间为9min ；
[0042]收集先出峰的两