一种从石蒜属植物提取石蒜碱的方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明属于医药技术领域，具体涉及一种从石蒜属植物提取石蒜碱的方法。
【【背景技术】】
[0002]石蒜鳞茎为石蒜的地下部分，含有多种生物碱，其中石蒜碱含量较高，研宄较为广泛。石蒜碱可用于抗菌、抗病毒，治疗肿瘤及心血管疾病，其对阿米巴痢疾也有很好的疗效。
[0003]目前，石蒜碱的提取技术主要有回流法、煎煮法、索氏提取法等，效率较低且耗时长。新兴的生物碱提取技术有超声辅助提取、微波萃取、临界流体萃取等等，大大缩短了时长，提高了效率。石蒜碱的分离技术常用的主要有有机溶剂萃取法、树脂吸附法等等，相继诞生的新兴的分离技术有色谱法、分子印迹法、膜分离法等。迄今，未见分子筛作为载体的石蒜碱提取分离方法的相关报道。
【
【发明内容】
】
[0004]本发明的目的在于提供一种从石蒜属植物提取石蒜碱的方法，通过提取、萃取和洗脱等步骤提取石蒜碱，显著提高提取液中石蒜碱的含量，进而石蒜碱的收率也得到了明显提高，为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案。
[0005]一种从石蒜属植物提取石蒜碱的方法，包括以下步骤:
[0006]I)取石蒜鳞茎切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鳞茎粉，用硫酸溶液在水浴条件下对石蒜鳞茎粉进行提取，经超声处理、离心、过滤后，得到石蒜粗提取液；
[0007]2)将石蒜粗提取物pH值调节至碱性，使用氯仿萃取，得到萃取液；
[0008]3)将萃取液pH值调节至酸性后上分子筛层析柱；
[0009]4)去除分子筛层析柱中糖类；
[0010]5)用含有氨水的乙醇溶液对分子筛层析柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩后得到石赫喊。
[0011]在本技术方案中，离心时速率范围可在4000-6000rap/min内，使用氯仿萃取次数为2-4次。对分子筛层析柱进行水洗以去除分子筛层析柱中的糖类，如果不去除分子筛层析柱中的糖类，分子筛层析柱中会吸附一定量的糖类，降低分子筛层析柱吸附石蒜碱的量，同时导致在后续步骤中从分子筛层析柱中洗脱出石蒜碱的效果变差，降低石蒜碱的收率，降低提取的石蒜碱的纯度。
[0012]进一步地，所述步骤3)还包括对分子筛层析柱的流出液进行生物碱测试的步骤，流出液生物碱测试呈阳性时停止上萃取液。其中，所述生物碱测试通过碘化铋钾反应进行。
[0013]进一步地，所述步骤4)中去除分子筛层析柱中糖类包括:对分子筛层析柱进行水洗，至洗出液糖类测试为阴性停止水洗。
[0014]进一步地，所述步骤I)中硫酸溶液的体积浓度为0.5-1 %，石蒜鳞茎粉与硫酸溶液的料液比为1:10-20g/mL。
[0015]进一步地，所述步骤I)中用硫酸溶液在水浴条件下提取时间为3-5小时，超声处理时间为30-60分钟。
[0016]进一步地，所述步骤2)中，“将石蒜粗提取物pH值调节至碱性”采用质量浓度为15-25 %的NaOH溶液调节石蒜粗提取物的pH值，调节pH值至8_11。
[0017]进一步地，所述步骤3)中，“将萃取液pH值调节至酸性”采用体积浓度为35-38%的HCl溶液调节萃取液的pH值，调节pH值至2-5。
[0018]进一步地，所述步骤3)中所述分子筛层析柱由分子筛在500?600°C、空气氛围下焙烧3?6小时，再装入层析柱获得。
[0019]进一步地，所述分子筛层析柱中分子筛为ZSM-5型、X型、Y型、Beta型分子筛中的任意一种。
[0020]进一步地，所述步骤5)中含有氨水的乙醇溶液中氨水的浓度为1.5?2.0mol/L，氨水在乙醇溶液中体积百分比为70-90% ;所述“收集洗脱液”在洗脱液生物碱测试呈阳性时开始收集，在洗脱液生物碱测试呈阴性时停止收集。
[0021]本发明一种从石蒜属植物提取石蒜碱的方法操作简单，石蒜碱提取分离效果优异，在能够有效的提高了石蒜碱的收率，石蒜碱纯度高。同时该方法实施安全，实施过程中使用的原材料能够有效回收利用，节约成本，满足工业化生产的要求，适于广泛推广应用。
【【具体实施方式】】
[0022]下面结合实施例对本发明进一步详细说明，但本发明不限于这些实施例。
[0023]实施例1
[0024]取石蒜鳞茎样品切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鳞茎粉，取石蒜鳞茎粉10g加入到IL体积溶度为0.5%硫酸溶液中，在70°C水浴条件下提取3h，超声处理30min，5000rap/min转速条件下离心，过滤后获得石蒜粗提物。石蒜粗提物用质量浓度20%的NaOH溶液调节PH值至10，使用氯仿萃取4次，得到萃取液。将萃取液用体积浓度35%的HCl溶液调节pH值至2。将ZSM-5型分子筛在马弗炉中550°C焙烧5小时，然后装入层析柱中，得到分子筛层析柱。将调节PH值之后的萃取液上分子筛层析柱，对分子筛层析柱流出液进行碘化铋钾反应测试，碘化铋钾反应呈阳性时停止上样。对分子筛层析柱用蒸馏水洗去多糖，至洗出液Molish反应为阴性停止。用含1.5mol/L的氨水的乙醇溶液(氨水在乙醇溶液的体积百分比为70% )对分子筛层析柱进行洗脱，洗脱液碘化铋钾反应呈阳性时开始收集，洗脱液碘化铋钾反应呈阴性停止洗脱，收集洗脱液，浓缩后即得石蒜碱。
[0025]上述方法得到的石蒜碱93mg，经测定，石蒜碱的收率为0.093 % (以石蒜鳞茎干粉质量计算)，纯度为33%。
[0026]实施例2
[0027]取石蒜鳞茎样品切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鳞茎细粉，取石蒜鳞茎细粉10g加入到1.5L体积溶度为0.5%硫酸溶液中，在水浴条件下提取5h，超声处理60min，5000rap/min转速条件下离心，过滤后获得石蒜粗提物。石蒜粗提物用质量浓度20%的NaOH溶液调节pH值至11，使用氯仿多次萃取两次，得到萃取液。将萃取液用体积浓度38%的HCl溶液调节PH值至5。将X型分子筛在马弗炉中500°C焙烧6小时，然后装入层析柱中，得到分子筛层析柱。将调节PH值之后的萃取液上分子筛层析柱，对分子筛层析柱流出液进行碘化铋钾反应测试，碘化铋钾反应呈阳性时停止上样。对分子筛层析柱用蒸馏水洗去多糖，至洗出液Molish反应为阴性停