一种动物抗血清提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种动物抗血清提取方法，属于抗血清提取技术领域。
【背景技术】
[0002] 在生物科技快速发展的今天，动物血清的用途愈来愈广泛。有些免疫血清、特制 血清价值非常高，所以如何多快好省提取羊抗血清便是当今生物科技领域非常重要的课题 之一。现有技术中已有很多抗血清的提取方法，大多采用静脉取血，虽然可以有效提取抗 血清，但是仍然存在一些问题，如单位体重采血量、全血中血清量以及单位体重血清量均较 低，造成血液和血清的浪费。
【发明内容】
[0003] 发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供了一种动物抗血清提取 方法。
[0004] 技术方案：为实现上述目的，本发明提供了一种动物抗血清提取方法，包括以下步 骤：
[0005] (1)取经过抗原免疫的动物，通过动脉插管取血；
[0006] (2)用玻璃瓶收集血液，到一定体积停止收集；
[0007] (3)将收集的血液及时放入水浴中，血清析出后及时取出；
[0008] (4)及时吸取析出的血清，并静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0009] 作为优选，所述步骤（1)中动脉插管为双侧颈动脉插管。
[0010] 作为另一种优选，所述步骤（2)中玻璃瓶为250ml的玻璃瓶。
[0011] 作为另一种优选，所述步骤（2)中的一定体积为40-60ml。
[0012] 作为另一种优选，所述步骤（3)中水浴温度与采血动物体温相同。
[0013] 作为另一种优选，所述步骤（3)中放入水浴的时间为1-2小时。
[0014] 作为另一种优选，所述步骤（4)中静置的条件为室温静置。
[0015] 作为另一种优选，所述动物为羊。
[0016] 作为另一种优选，所述抗血清为羊抗人载脂蛋白Al抗血清、羊抗人载脂蛋白B抗 血清或者羊抗人C反应蛋白抗血清
[0017] 本发明抗血清提取方法，首先采用动脉取血，动脉压比静脉压高，血液从动脉中流 出的速度快，采集的血液量多；其次，每瓶的血液量要少于常规技术，从而能够使血清析出 充分，血块越小，其中残余的血清会越少；最后，将采集的血液及时放入与采血动物相同体 温的水浴中，既有利于血清及时析出，也不会因温度的变化影响血清的效价等质量。
[0018] 有益效果：相对于现有技术，本发明动物抗血清提取方法，成本低，过程简单，不仅 能稳定提取抗血清，最重要的是能够显著提高单位体重采血量、全血中血清量以及单位体 重血清量，充分利用动物和血液。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例对本发明作更进一步的说明。
[0020] 实施例1
[0021 ] 羊抗人载脂蛋白Al抗血清提取方法：
[0022] (1)取经过人载脂蛋白Al抗原免疫的羊，通过双侧颈动脉插管取血；
[0023] (2)用250ml玻璃瓶收集血液，每瓶的血液量为40ml ;
[0024] (3)将收集的血液及时放入与采血动物相同体温的水浴中1小时，血清析出后及 时取出；
[0025] (4)及时吸取析出的血清，并室温静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0026] 实施例2
[0027] 羊抗人载脂蛋白Al抗血清提取方法：
[0028] (1)取经过人载脂蛋白Al抗原免疫的羊，通过双侧颈动脉插管取血；
[0029] (2)用250ml玻璃瓶收集血液，每瓶的血液量为60ml ;
[0030] (3)将收集的血液及时放入与采血动物相同体温的水浴中2小时，血清析出后及 时取出；
[0031] (4)及时吸取析出的血清，并室温静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0032] 实施例3
[0033] 羊抗人载脂蛋白Al抗血清提取方法：
[0034] (1)取经过人载脂蛋白Al抗原免疫的羊，通过双侧颈动脉插管取血；
[0035] (2)用250ml玻璃瓶收集血液，每瓶的血液量为50ml ;
[0036](3)将收集的血液及时放入与采血动物相同体温的水浴中1. 5小时，血清析出后 及时取出；
[0037](4)及时吸取析出的血清，并室温静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0038] 实施例4
[0039] 羊抗人载脂蛋白B抗血清提取方法：
[0040](1)取经过人载脂蛋白B抗原免疫的羊，通过双侧颈动脉插管取血；
[0041](2)用250ml玻璃瓶收集血液，每瓶的血液量为50ml ;
[0042](3)将收集的血液及时放入与采血动物相同体温的水浴中1. 5小时，血清析出后 及时取出；
[0043](4)及时吸取析出的血清，并室温静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0044] 实施例5
[0045] 羊抗人C反应蛋白抗血清提取方法：
[0046](1)取经过C反应蛋白抗原免疫的羊，通过双侦_动脉插管取血；
[0047](2)用250ml玻璃瓶收集血液，每瓶的血液量为50ml ;
[0048](3)将收集的血液及时放入与采血动物相同体温的水浴中1. 5小时，血清析出后 及时取出；
[0049](4)及时吸取析出的血清，并室温静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。
[0050] 实施例6(羊抗人载脂蛋白Al抗血清常规提取方法）
[0051] 羊抗人载脂蛋白Al抗血清提取方法：
[0052] (1)取经过人载脂蛋白Al抗原免疫的羊，双侧颈静脉插管放血；
[0053] (2)用500ml玻璃瓶收集血液，玻璃瓶尽量装满；
[0054] (3)将收集的血液放37°C培养箱1小时后，再放置室温待血清析出；
[0055] (4)待血清大量析出后，用吸管将血清吸至离心瓶中，离心去除下层沉淀的红细 胞，收集上层血清。
[0056] 实施例7(羊抗人载脂蛋白B抗血清常规提取方法）
[0057] 提取方法同实施例6,不同的是抗血清为羊抗人载脂蛋白B抗血清。
[0058] 实施例8(羊抗人C反应蛋白抗血清常规提取方法）
[0059] 提取方法同实施例6,不同的是抗血清为羊抗人C反应蛋白抗血清。
[0060] 实验例各提取方法效果监测
[0061] -、羊抗人载脂蛋白Al抗血清提取效果的检测
[0062] 取同一批次绵羊，按照相同的常规方法进行免疫，免疫完成后分为两组，一组10 只，按照实施例6 (常规方法）方法提取抗血清；另一组15只，按照实施例3 (本发明方法） 方法提取抗血清，采用双扩免疫法检测所得抗血清效价，各绵羊所得血清的指标结果见表 1 (常规方法）和表2 (本发明方法）。
[0063] 表1实施例6 (常规方法）所得抗血清各指标结果
[0067] 由上表1和表2结果可得，用本发明方法生产羊抗人载脂蛋白Al抗血清，单位体 重采血量可提高2. 93%，全血中血清量可提高6. 11%，单位体重血清量可提高9. 13%，血 清效价基本不影响。
[0068] 二、羊抗人载脂蛋白B抗血清提取效果的检测
[0069] 取同一批次绵羊，按照相同的常规方法进行免疫，免疫完成后分为两组，一组10 只，按照实施例7 (常规方法）方法提取抗血清；另一组15只，按照实施例4 (本发明方法） 方法提取抗血清，采用双扩免疫法检测所得抗血清效价，各绵羊所得血清的指标结果见表 3 (常规方法）和表4 (本发明方法）。
[0070] 表3实施例7(常规方法）所得抗血清各指标结果
[0071]
[0075] 由上表3和表4结果可得，用本发明方法生产羊抗人载脂蛋白B抗血清，单位体重 采血量可提高3. 83%，全血中血清量可提高5. 93%，单位体重血清量可提高9. 62%，血清 效价基本不影响。
[0076] 三、羊抗人C反应蛋白抗血清提取效果的检测
[0077] 取同一批次山羊，按照相同的常规方法进行免疫，免疫完成后分为两组，一组10 只，按照实施例8 (常规方法）方法提取抗血清；另一组15只，按照实施例5 (本发明方法） 方法提取抗血清，采用双扩免疫法检测所得抗血清效价，各绵羊所得血清的指标结果见表 5 (常规方法）和表6 (本发明方法）。
[0083] 由上表5和表6结果可得，用本发明方法生产羊抗人C反应蛋白抗血清，单位体重 采血量可提高3. 09%，全血中血清量可提高7. 22%，单位体重血清量可提高10. 48%，血清 效价基本不影响。
【主权项】
1. 一种动物抗血清提取方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 取经过抗原免疫的动物，通过动脉插管取血； (2) 用玻璃瓶收集血液，到一定体积停止收集； (3) 将收集的血液及时放入水浴中，血清析出后及时取出； (4) 及时吸取析出的血清，并静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。2. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（1)中动脉插管为 双侧颈动脉插管。3. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（2)中玻璃瓶为 250ml的玻璃瓶。4. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（2)中的一定体积 为 40-60ml。5. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（3)中水浴温度与 采血动物体温相同。6. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（3)中放入水浴的 时间为1-2小时。7. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述步骤（4)中静置的条件 为室温静置。8. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述动物为羊。9. 根据权利要求1所述的羊抗血清提取方法，其特征在于，所述抗血清为羊抗人载脂 蛋白Al抗血清、羊抗人载脂蛋白B抗血清或者羊抗人C反应蛋白抗血清。
【专利摘要】本发明提供了一种动物抗血清提取方法，包括以下步骤：(1)取经过抗原免疫的动物，通过动脉插管取血；(2)用玻璃瓶收集血液，到一定体积停止收集；(3)将收集的血液及时放入水浴中，血清析出后及时取出；(4)及时吸取析出的血清，并静置，反复多次吸取瓶中析出的血清。相对于现有技术，本发明动物抗血清提取方法，成本低，过程简单，不仅能稳定提取抗血清，最重要的是能够显著提高单位体重采血量、全血中血清量以及单位体重血清量，充分利用动物和血液。
【IPC分类】C07K16/18, C07K16/06
【公开号】CN105001329
【申请号】CN201510474305
【发明人】袁金城, 徐志伟, 张传明
【申请人】海奥斯生物科技镇江有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年8月5日