. 4g/L，磷酸二氧钾I. 8-2. 3g/L;配制固体培 养基时添加15g/L的琼脂粉。
[0022] 培养液成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35_45g/L，酵母浸膏8-10g/L，葡 萄糖18-22g/L，麦芽浸膏25-30g，硫酸铵0. 5-0. 7g/L，硫酸镁0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾 1.8- 2.38/1，碳酸钙0.7 8/1，硫酸亚铁0.18 8/1，硫酸锰 0.025 8/1;?115.0。
[0023] 湿青霉菌细胞制备过程如下：青霉菌ATCC204052经斜面、摇瓶培养，得到种子 液。5L发酵罐加入培养液；发酵罐加入培养液，121°C高压灭菌30分钟，冷却至24°C，将 青霉菌种子液接种至发酵罐，接种比例为10-11 %，通气比为0. 9-1V/ (V分钟)，24°C培养 35-40小时，用过滤式离心机离心得到湿青霉菌细胞，用作生物催化反应催化剂。
[0024] 生物催化转化：5L底部通气搅拌反应器中加入磷酸盐缓冲液，pH为5. 2,加入底 物3' -氟苯乙酮，使其浓度为90g/L，玉米浆（以干物质计）含量为15g/L，山梨坦单月桂 酸酯18g/L，蔗糖28g/L、麦芽糖33g/L、异丙醇5%V/V(体积浓度），121°C高压灭菌30分钟； 冷却至31°C时，加入湿青霉菌细胞使其浓度为70g/L，通气比为0.IlV/ (V分钟)，进行生物 催化反应，反应时间为69小时；反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应液，蒸出乙酸 乙酯，得到产物（S)-3'-氟苯乙醇，反应转化率98%，产品收率96%，对映体过量率99 %。
[0025] 实施例3 种子培养基成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35-45g/L，酵母提取物10g/L，葡 萄糖20g/L，硫酸铵0. 5-0. 7g/L，硫酸镁0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾I. 8-2. 3g/L;配制固体培 养基时添加15g/L的琼脂粉。
[0026] 培养液成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35_45g/L，酵母浸膏8-10g/L，葡 萄糖18-22g/L，麦芽浸膏25-30g，硫酸铵0. 5-0. 7g/L，硫酸镁0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾 1.8- 2.38/1，碳酸钙0.7 8/1，硫酸亚铁0.18 8/1，硫酸锰 0.025 8/1;?115.0。
[0027] 湿青霉菌细胞制备过程如下：青霉菌ATCC204052经斜面、摇瓶培养，得到种子 液。IOL发酵罐加入培养液；发酵罐加入培养液，121°C高压灭菌30分钟，冷却至23°C，将 青霉菌种子液接种至发酵罐，接种比例为10-11 %，通气比为0. 9-1V/ (V分钟)，23°C培养 35-40小时，用过滤式离心机离心得到湿青霉菌细胞，用作生物催化反应催化剂。
[0028] 生物催化转化：IOL底部通气搅拌反应器中加入磷酸盐缓冲液，pH为5. 2,加入底 物3' -氟苯乙酮，使其浓度为84g/L，玉米浆（以干物质计）含量为13g/L，山梨坦单月桂 酸酯17. 5g/L，蔗糖26g/L、麦芽糖34g/L、异丙醇5. 5%V/V(体积浓度），121°C高压灭菌30 分钟；冷却至30-31°C时，加入湿青霉菌细胞使其浓度为66-70g/L，通气比为0.IlV/ (V分 钟)，进行生物催化反应，反应时间为67小时；反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应 液，蒸出乙酸乙酯，得到产物（S) -3' -氟苯乙醇，反应转化率98. 5 %，产品收率96. 5 %，对 映体过量率99%。
[0029] 实施例4 种子培养基成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35-45g/L，酵母提取物10g/L，葡 萄糖20g/L，硫酸铵0. 5-0. 7g/L，硫酸镁0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾I. 8-2. 3g/L;配制固体培 养基时添加15g/L的琼脂粉。
[0030] 培养液成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35-45g/L，酵母浸膏8-10g/L，葡 萄糖18-22g/L，麦芽浸膏25-30g，硫酸铵0. 5-0. 7g/L，硫酸镁0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾 1.8-2.38/1，碳酸钙0.7 8/1，硫酸亚铁0.18 8/1，硫酸锰 0.025 8/1;?115.0。
[0031] 湿青霉菌细胞制备过程如下：青霉菌ATCC204052经斜面、摇瓶培养，得到种子 液。IOL发酵罐加入培养液；发酵罐加入培养液，121°C高压灭菌30分钟，冷却至24°C，将 青霉菌种子液接种至发酵罐，接种比例为10-11 %，通气比为0. 9-1V/ (V分钟)，24°C培养 35-40小时，用过滤式离心机离心得到湿青霉菌细胞，用作生物催化反应催化剂。
[0032] 生物催化转化：20L底部通气搅拌反应器中加入磷酸盐缓冲液，pH为5.2,加入底 物3' -氟苯乙酮，使其浓度为86g/L，玉米浆（以干物质计）含量为14g/L，山梨坦单月桂 酸酯18g/L，蔗糖27g/L、麦芽糖35g/L、异丙醇6%V/V(体积浓度），121°C高压灭菌30分钟； 冷却至30°C时，加入湿青霉菌细胞使其浓度为69g/L，通气比为0.IlV/ (V分钟），进行生 物催化反应，反应时间为68小时；反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应液，蒸出乙 酸乙酯，得到产物（S)-3'-氟苯乙醇，反应转化率99%，产品收率96. 5%，对映体过量率 99%〇
【主权项】
1. 一种青霉菌细胞生物催化制备（S)_3'_氟苯乙醇的方法，其特征在于反应罐中加入 磷酸盐缓冲液，pH为5. 2,加入底物3' -氟苯乙酮，使底物3' -氟苯乙酮添加量为80-90 g/L，玉米浆含量为12-15g/L，山梨坦单月桂酸酯17-18g/L，蔗糖25-28g/L、麦芽糖33-36g/ U异丙醇5-6%V/V，121°C高压灭菌30分钟；冷却至30-31°C时，加入湿青霉菌细胞使其浓度 为66-70g/L，通气比为0. 1-0.1 lV/ (V分钟），进行生物催化反应，反应时间为66-69小时； 反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应液，蒸出乙酸乙酯，得到产物（S)-3' -氟苯乙 醇，反应转化率98-99%，产品收率96-97%，对映体过量率98. 5-99%。2. 权利要求1所述的方法，其特征在于湿青霉菌细胞制备过程如下：青霉菌ATCC 204052,经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，121°C高压灭菌30 分钟，冷却至23-24°C，将青霉菌种子液接种至发酵罐，接种比例为10-11%，通气比为 0. 9-1V/ (V分钟)，23-24°C培养35-40小时，用过滤式离心机离心得到湿青霉菌细胞，用 作生物催化反应催化剂；发酵罐中培养液成份为：玉米浆（以干物质计）含量为35-45g/ L，酵母浸膏8-10 g/L，葡萄糖18-22 g/L，麦芽浸膏25-30 g，硫酸铵0.5-0. 7g/L，硫酸镁 0. 3-0. 4g/L，磷酸二氧钾 I. 8-2. 3g/L，碳酸钙 0. 7 g/L，硫酸亚铁 0. 18 g/L，硫酸锰 0. 025 g/L;pH 5. 0〇
【专利摘要】一种青霉菌细胞生物催化制备(S)-3’-氟苯乙醇的方法，反应罐中加入磷酸盐缓冲液，用青霉菌细胞进行生物催化反应，产品收率高，对映体过量率高，解决了现有方法生产的困难。
【IPC分类】C12P7/22
【公开号】CN105087668
【申请号】CN201510561085
【发明人】刘均洪, 王彩芸
【申请人】青岛科技大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年9月7日