方式与【具体实施方式】二不同的是:六水合三氯化铁与硝酸钠的质量之和与乙二醇的体积的比为Ig:(9?10)ml。其它与【具体实施方式】二相同。
[0031]【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一至三之一不同的是步骤二中Fe304iMCM-41的制备方法如下:称取Fe3O4纳米粒子、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、正硅酸乙酯(TEOS)和质量浓度为25%的氨水；将Fe3O4纳米粒子加入到无水乙醇中超声分散，得到Fe3O4分散液；将十六烷基三甲基溴化铵加入到蒸馏水中，搅拌溶解均匀，得到模板剂溶液；将Fe3O4分散液加入到模板剂溶液中，混合均匀后，加入称取的正硅酸乙酯，再混合均匀后，加入称取的质量浓度为25%的氨水，在室温下搅拌6?10h，分离出固相物，用无水乙醇和丙酮洗涤干净，再进行用磁铁收集，将收集的产物于50?60°C条件下真空干燥10?12h，得到复合Fe3O4纳米粒子，将该复合Fe 304纳米粒子分散在酸化乙醇中，在80?85°C下索氏提取10?12h，干燥后，得到Fe304@MCM-41。其它与【具体实施方式】一至三之一相同。
[0032]【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】四不同的是Fe3O4纳米粒子与十六烷基三甲基溴化铵的质量比为1:(1?1.2) ;Fe304纳米粒子的质量与正硅酸乙酯的体积的比为Ig: (5?8)ml ;正硅酸乙酯与质量浓度为25%的氨水的体积比为1: (5?6);其它与具实施方式方式四相同。
[0033]【具体实施方式】六:本实施方式与【具体实施方式】四或五不同的是酸化乙醇是将2ml质量百分浓度为35?37%的盐酸加入到50ml无水乙醇中，混合均匀后得到的。其它与具实施方式方式四或五相同。
[0034]【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一至六之一不同的是步骤三中氧化石墨的制备方法如下:
[0035]a、按鳞片石墨与硝酸钠的质量比为1: (5?6)将鳞片石墨与硝酸钠加入到圆底四口烧瓶中，将烧瓶置于冰水浴中，倒入浓硫酸，搅拌均匀，然后加入高锰酸钾，继续搅拌2?3小时，完成低温反应；其中鳞片石墨的质量与质量百分浓度为98%的浓硫酸的体积比为Ig: (200?230)ml ;鳞片石墨与高锰酸钾的质量比为1: (30?35)；
[0036]b、将烧瓶转移至35 °C的恒温水浴锅中，反应30?40min，完成中温反应；
[0037]C、烧瓶重新转移到冰水浴中，向烧瓶中滴加蒸馏水，然后移至98°C的恒温水浴锅中，反应20?30min，完成尚温反应；其中鱗片石墨的质量与蒸饱水的体积的比为Ig:(400?460)ml ;反应完毕后，将烧瓶中的混合液自然降温至室温；
[0038]d、将烧瓶中的混合液中边搅拌边加入过氧化氢，继续搅拌至溶液由棕褐色变成亮黄色，然后将稀盐酸加入烧瓶中并离心洗涤至液相中无硫酸根存在，然后用蒸馏水离心洗涤至液相的PH值呈中性，再将固相物分散到水中，得到氧化石墨分散液；其中鳞片石墨的质量与过氧化氢的体积的比为Ig:(400?500)ml ;其它与具实施方式方式一至六之一相同。
[0039]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一至七之一不同的是步骤四中Fe304iMCM-41的质量与无水乙醇的体积的比为Ig: (150?200)ml ;其它与【具体实施方式】一至七之一相同。
[0040]【具体实施方式】九:本实施方式与【具体实施方式】一至八之一不同的是步骤四中Fe304iMCM-41的质量与3-氯丙基三乙氧基硅烷(CPS)的体积的比为Ig: (3?4)ml ;其它与【具体实施方式】一至八之一相同。
[0041]【具体实施方式】十:利用【具体实施方式】一制备的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体固定脂肪酶的方法，按以下步骤进行:
[0042]—、称取固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体CPS/G0-Fe304@MCM-41、pH为7.5的0.05M的磷酸盐(PBS)缓冲液、脂肪酶，其中CPS/G0-Fe304@MCM-41的质量与pH为7.5的0.05M的磷酸盐(PBS)缓冲液的体积的比为Ig: (30?50)ml ；CPS/G0-Fe304iMCM-41与脂肪酶的质量比为10:(0.36?I);
[0043]二、将pH为7.5的0.05M的磷酸盐(PBS)缓冲液分成两份，向一份中加入CPS/G0-Fe304@MCM-41，搅拌I?12h，得到载体溶液；向另一份中加入脂肪酶振荡直至完全溶解，得到酶溶液；将酶溶液加入到载体溶液中，放在恒温振荡器中在25?50°C、150rpm的条件下恒温振荡2?12h，然后用磁分离进行收集，将收集到的固相物用PBS缓冲液洗涤干净，冷冻干燥，得到磁性氧化石墨复合物固定化脂肪酶。
[0044]用以下的试验验证本发明的有益效果:
[0045]试验1:本试验的固定脂肪酶的磁性氧化石墨复合物载体的制备方法按以下步骤进行:
[0046]一、制备Fe3O4纳米粒子:将2.2g六水合三氯化铁(FeCl 3.6H20)与5.4g硝酸钠溶解在70ml乙二醇中，在室温下搅拌得到黄色溶液，然后将溶液转移到反应釜中，升温至200°C并保持20h，然后降至常温，将得到的黑色沉淀物分别用无水乙醇和丙酮洗涤干净，最后用磁铁收集，将收集的黑色产物在60°C条件下真空干燥，得到Fe3O4纳米粒子；
[0047]二、制备Fe304@MCM_41:称取0.2gFe304纳米粒子、0.2g十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、Iml正硅酸乙酯(TEOS)和5ml质量浓度为25%的氨水；将Fe3O4纳米粒子加入到70ml无水乙醇中超声分散30min，得到Fe3O4分散液；将十六烷基三甲基溴化铵加入到70ml蒸馏水中，搅拌溶解均匀，得到模板剂溶液；将Fe3O4分散液加入到模板剂溶液中，混合均匀后，加入称取的正硅酸乙酯，再混合均匀后，加入称取的质量浓度为25%的氨水，在室温下搅拌8h，分离出固相物，用无水乙醇和丙酮洗涤干净，再进行用磁铁收集，将收集的产物于60°C条件下真空干燥12h，得到复合Fe3O4纳米粒子，将该复合Fe 304纳米粒子分散在酸化乙醇中，在80 °C下索氏提取12h，干燥后，得到Fe304@MCM-41 ;其中酸化乙醇是将2ml质量百分浓度为36%的盐酸加入到50ml无水乙醇中，混合均匀后得到的。
[0048]三、采用hummers法制备氧化石墨:
[0049]将0.5g鳞片石墨与2.5g硝酸钠加入到500ml的圆底四口烧瓶中，将烧瓶置于冰水浴中，倒入115ml浓硫酸，搅拌均匀，然后缓慢加入15g高锰酸钾(用30min将高锰酸钾均速加完)，继续搅拌2小时，完成低温反应；将烧瓶转移至35°C的恒温水浴锅中，反应30min，完成中温反应；烧瓶重新转移到冰水浴中，向烧瓶中滴加230ml蒸馏水，然后移至98°C的恒温水浴锅中，反应20min，完成高温反应；反应完毕后，将烧瓶中的混合液自然降温至室温后，边搅拌边加入250ml过氧化氢，烧瓶内壁会出现大量气泡，继续搅拌至溶液由棕褐色变成亮黄色，然后将稀盐酸加入烧瓶中并离心洗涤至液相中无硫酸根存在(氯化钡溶液检测)，然后用蒸馏水离心洗涤至液相的PH值呈中性，再将固相物分散到水中，得到氧化石墨分散液；其中氧化石墨分散液中氧化石墨的浓度为0.5mg/mL ;
[0050]四、比例称取0.3g步骤二制备的Fe304@MCM-41、量取80mL步骤三制备的氧化石墨分散液，先把Fe304@MCM-41分散到60ml无水乙醇中，超声30min，再加入氧化石墨分散液，混合液搅拌lh，然后滴加lmL3-氯丙基三乙氧基硅烷(CPS)，升温至120°C，搅拌回流10h，最后用无水乙醇洗涤干净，冷冻