一种水酶法高效提取橄榄油的方法
【专利说明】-种水酶法高效提取橄揽油的方法 -、技术领域
[0001] 本发明设及生物、化学和食品领域，特别设及水酶法高效提取橄揽油的方法。 二、【背景技术】
[0002] 油橄揽（OleaeuropaeaL.)属木犀科（Oleaceae)、木犀揽属（Olea)常绿乔木，W "高产、优质、高效益"著称，含油率在20~30%，是世界著名的木本油料树种。原产于小亚 细亚，后流传于地中海周边如西班牙、希腊、意大利、葡萄牙突尼斯等国家。我国大量引进种 植油橄揽始于1964年周恩来总理访问阿尔己尼亚并引进油橄揽10000株进行大规模栽培 试验。自1973年起，在初步引种成功的区域，逐步发展生产栽培，此后油橄揽开始在国内大 规模种植，经过40多年的发展，至2009年，我国油橄揽种植面积达到60万亩，主要分布于 甘肃晚南、四川广元、达州地区、云南西北部金沙江流域等。
[0003] 橄揽油能大大降低屯、血管和肺癌的发病率，其营养价值和经济价值已被大家认 可。橄揽油是通过压棒新鲜的油橄揽鲜果而得到的一种食用油，高品质的橄揽油是用初熟 或成熟的油橄揽鲜果通过物理冷压棒工艺提取的天然果油，不经加热和化学处理，保存了 天然的营养成分，是世界上W自然状态的形式供人类食用的木本植物油之一。橄揽油中富 含丰富的单不饱和脂肪酸，即油酸及亚油酸、亚麻酸，还有维生素A、维生素B、维生素D、维 生素E、维生素K及抗氧化物等，油中不饱和脂肪酸达82%~87%，饮食上具有独特的烹任 特点，其被人体消化吸收率达93. 4%，对人体具有多种保健功效，如增进消化系统功能、预 防屯、血管疾病和促进幼儿骨骼及神经系统发育、健美肌肤等特殊功效。此外，橄揽油在医 药、纺织、日用化学、食品、电子等工业具有广泛用途。
[0004] 橄揽油加工的生产工艺如下： 阳0化]油橄揽鲜果一选料一冲洗一压棒一揽拌油橄揽果浆（30°C低溫下）一挤压（或离 屯、）一过滤一包装
[0006] 现代制取橄揽油的工艺流程如图3 :
[0007] 目前，全世界橄揽油的年产量达250X104t，其中食用橄揽油为100X104t，主要集 中在西班牙、意大利、希腊、突尼斯、±耳其、叙利亚、摩洛哥，运7个国家橄揽油产量占世界 橄揽油总产量的90%。2006年，我国自产的橄揽油约25化左右，国内市场98 %的橄揽油 依靠国外进口。近20年来，橄揽油产品W1. 28 %的速度增长，食用橄揽油的增长速度为 2.8%。据有关资料报导，目前全世界橄揽油的总产量仅占世界食用植物油脂产量的3. 3 %， 所W橄揽油就更显得珍贵，在国际市场呈走俏趋势，豆油、花生油与橄揽油1 :4~8的比价， 长期W来居高不下。随着我国生活水平的提高和居民膳食结构的改变，人们食用油消费习 惯也在向纯天然、健康油品消费转变。所W提高我国橄揽油年产量具有广阔的市场前景。
[0008] 水酶法提取橄揽油工艺是在机械破碎的基础上，采用能降解油橄揽细胞的酶或对 脂蛋白、脂多糖等复合体有降解作用的酶（包括纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶等）作用 于已破碎的油橄揽鲜果原料，使油脂从油橄揽细胞中释放出来，利用非油成分（蛋白和碳 水化合物）对油和水的亲和力差异，同时利用油水比重不同而将油和非油成分分离。水酶 法工艺中，酶除了能降解油料细胞、分解脂蛋白、脂多糖等复合体外，还能破坏油料在磨浆 等过程中形成的包裹在油滴表面的脂蛋白膜，降低乳状液的稳定性，从而提高游离油得率。 本文采用水酶法结合超声波预处理提取橄揽油，旨在优化水酶法提取橄揽油工艺参数，提 高橄揽油得率。 Ξ、
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于提供一种水酶法高效提取橄揽油的方法，本发明的技术方案是 采用如下步骤来实现：
[0010] 第一步：原料的预处理
[0011] 将橄揽鲜果进行粉碎，弃去果核，得到破碎后的果浆；
[0012] 第二步：橄揽果浆的含油率测定 阳01引将0. 1~lOg的橄揽果浆置于100血的锥形瓶，加入10~100血石油酸溶剂进行 索氏提取得到橄揽油，记录橄揽果总油质量η;
[0014] 第Ξ步：憐酸盐缓冲液的配制
[0015] 称取5. 0~60g憐酸氨二钢，加憐酸二氨钢0. 5~lOg，加水定容，配制抑分别为 3. 0~7. 0的憐酸盐缓冲液；
[0016] 第四步：橄揽油的水酶法提取
[0017] 取0. 1~lOg的橄揽果浆置于100血的锥形瓶，加入10~100血缓冲溶液和1~ 20U/mg不同种类酶，在30~80°C下酶解。酶解2~lOh结束后，90°C灭酶lOmin，酶解液 在5000r/min离屯、lOmin，过滤，再用石油酸溶剂反萃取，记录酶解提取油质量m，并计算提 油率。W橄揽果提油率为检测指标，研究不同因素（加酶量、时间、溫度、pH、料液比）对酸 性纤维素酶提取橄揽油的影响。每次试验进行3次，求其平均值；（提油率=酶解提取油质 量m/橄揽果总油质量η) 阳〇1引第五步：酶的筛选
[0019] 在橄揽油的水酶法提取过程中，W橄揽油提取率为指标，对不同酶水解橄揽果细 胞壁效果进行对比，筛选出提取橄揽油效果最好的酶；
[0020] 第六步：响应面试验
[0021] 根据单因素试验得到料液比、酶解溫度、酶解时间是影响油橄揽提油率的主要因 素，因此选取运Ξ个水平作为Box-Behnken设计因素。采用响应面试验设计，考察各因素对 橄揽油提油率的影响及其影响因素的主次关系，并得到最佳酶解条件。同时并对结果进行 验证。 阳0巧表1方差分析
[0023]
[0024] 由表1可知，该模型的F=6. 59,表明该模型是有意义的且达到显著水平（p < 0. 05)，能够用于真实实验数据的预测。在一次项中，A料液比对油橄揽果提油率影响达 到极显著水平（P< 0. 01);在交互项中，A料液比和B酶解溫度的交互项对油橄揽果提油 率的影响达到显著水平（P< 0.05);在二次项中，A料液比对油橄揽果提油率的影响达到 极显著水平（P< 0. 01)，B酶解溫度对油橄揽果提油率的影响达到显著水平（P< 0. 05)。 综上所述，各因素对各因素对油橄揽的影响复杂，受多方面的影响，并非简单的线性关 系。对试验结果进行多元拟合，得到料液比、酶解溫度、酶解时间二次多项回归方程：R= 83. 19-2. 14A-0. 32B+1. 22C+1. 90AB-0. 23AC-0. 14BC-2. 79A2-2. 41B2-1. 45C2。根据回归模型 3个因素前的拟合系数2. 14 > 1. 22 > 0. 32可知，3个考查因素对油橄揽提油率的影响大 小为A料液比>C酶解时间>B酶解溫度。
[0025] 本发明采用选取糖化酶、果胶酶、半纤维素酶、酸性纤维素酶运4种酶进行筛选， 根据橄揽油提油率确定提取橄揽油最好的酸性纤维素酶。在相同酶活力的各种酶降解下， 由图1中可看出酸性纤维素酶对油橄揽鲜果具有更好的酶解作用，使油脂能够充分释放出 来，其次为半纤维素酶，果胶酶的水解效率最差。图2显示了不同酶解因素对橄揽油提油率 的影响，