产物在盐水中的粘度。
[0158] 参照图1，其示出了将乳酸钠加入至不同浓度的盐水的结果，并且得到了 3分钟后 不同浓度的盐水对当前市售的壳聚糖产品CELOX?的2g的样品在20g的不同介质的溶 液中所产生的影响。
[0159] 基础介质可为来自体液的盐水，在其中加入不同水平的乳酸钠。乳酸钠代表氢氧 化钠和乳酸之间反应的副产物。
[0160] 结果示于表1和图1中。
[0161] 表 1
[0163] 从图1中清楚地知晓，随着加入的盐水平的增加，介质中CELOX?的粘度下降。 因此，有益的是，在本发明的壳聚糖产物中仅存在低水平的残余盐副产物。
[0164] 低浓度碱件溶液对粘度的影响
[0165] 可对本发明的低内毒素的碱性壳聚糖进行测试以证实利用酸所进行的处理对壳 聚糖聚合物的粘度的影响，被认为是分子量的量度。上述测试包括以下方法步骤：
[0166] a)称量5g的低内毒素的碱性壳聚糖颗粒；
[0167] b)在600mL的烧杯中称量4. 95g的乙酸；
[0168] c)将490. 05g的去离子水加入至烧杯中以得到495g的1 %的乙酸溶液；
[0169] d)将烧杯放置在搅拌台上并开始搅拌（随着溶液的粘度的增加而增加）；
[0170] e)将壳聚糖颗粒加入到乙酸溶液中；
[0171] f)有规律地检查上述溶液直至所有的颗粒溶解，并且如果需要则随着溶液粘度的 增加而增加搅拌水平；
[0172] g)放置该溶液使从将壳聚糖颗粒引入到乙酸溶液开始共计24小时；
[0173] h)将64号转子附接至布氏粘度计；
[0174] i)将转子设定在IOrpm ;
[0175] j)将转子插入在溶液中直至转子上的标记处，并且开启粘度计，并且使其稳定；
[0176] k)以选定的时间间隔记录粘度（cPs)。
[0177] 降低碱性溶液的浓度的影响
[0178] 可在三个实验中测试在本发明的方法中使用较低浓度的碱性溶液的影响，关注 于：（1)盐水渗透至测试样品的渗透百分比；（2)血液凝结的时段；以及（3)体内模型中上 腹部段中的止血百分比。
[0179] 用于（1)渗透至盐水的渗透百分比的通用测试方法如下：将5mL的蒸馏水加入至 测试管中。将一滴红色食品染料加入至水中。将3g的止血粉末样品轻拍在水的顶面上，从 而形成层。1分钟后，测量通过水行进至止血粉末的距离，并记录为渗透百分比。
[0180] 用于（2)血液凝结的时段的通用测试方法如下：将0. 75g的止血粉末样品加入至 测试管中，向其中加入5mL的肝素化的兔血。随后，反转该测试管，并且记录血液完全凝结 成凝结块而消耗的时间。
[0181] 用于（3)体内模型中上腹部段中的止血百分比的通用测试方法如下：在猪模型 (未肝素化）的上腹部动脉中制成3cm至5cm的断口。施用颗粒形式的止血材料，并且施加 1分钟的按压。如果发生再出血，则再进行1分钟的按压。
[0182] 当然，应当理解的是，本发明并不限于上述仅用于示例方式描述的前述实施例。
【主权项】
1. 一种用于生产低内毒素的碱性的壳聚糖、低内毒素的碱性的壳质或它们的衍生物的 方法，所述方法包括以下步骤： (a) 使壳聚糖、壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物与浓度小于0. 25M的碱性溶液接触以 形成混合物；以及 (b) 使所述混合物放置小于12小时的时段。2. 根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法进一步包括对所述混合物进行干燥的 步骤（c)。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述碱性溶液的浓度为约0. 2M或更低。4. 根据权利要求3所述的方法，其中，所述碱性溶液的浓度为约0. 1M。5. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述碱性溶液和壳聚糖、壳质、壳聚 糖衍生物或壳质衍生物以约1份的壳聚糖、壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物相对约10份 的碱性溶液直至约10份的壳聚糖、壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物相对于约1份的碱性 溶液的范围存在。6. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述碱性溶液包括碱金属组分或碱 土金属组分，所述碱金属组分或碱土金属组分选自金属氢氧化物、金属碳酸盐、金属亚硫酸 氢盐、金属过硅酸盐、共辄碱和氢氧化铵中的一种或它们的组合。7. 根据权利要求6所述的方法，其中，所述金属选自钠、钾、钙或镁。8. 根据权利要求6或7所述的方法，其中，所述碱金属组分选自氢氧化钠、氢氧化钾或 碳酸钠。9. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，将所述碱性溶液喷涂至所述壳聚糖、 壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物；或者使所述壳聚糖、壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物 与所述碱性溶液混合。10. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，使所述混合物放置小于10小时的 时段。11. 根据权利要求10所述的方法，其中，使所述混合物放置小于8小时的时段。12. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，将所述混合物放置在干净的容器中 和/或惰性气氛下。13. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述混合物进一步包括防腐剂。14. 根据权利要求13所述的方法，其中，所述防腐剂选自银离子、锌离子、双氯苯双胍 己烷或它们的组合。15. -种能够通过权利要求1至14中任一项所述的方法得到的低内毒素的碱性的壳聚 糖、低内毒素的碱性的壳质、低内毒素的碱性的壳聚糖衍生物或低内毒素的碱性的壳质衍 生物。16. -种碱性的壳聚糖、碱性的壳质、碱性的壳聚糖衍生物或碱性的壳质衍生物，包括 小于50EU/g的内毒素浓度。17. -种生产低内毒素的中性的壳聚糖、低内毒素的中性的壳聚糖盐或低内毒素的中 性的壳聚糖衍生物的方法，所述方法包括：使通过权利要求1至14中任一项所述的方法制 得的碱性的壳聚糖与酸进行接触的步骤。18. 根据权利要求17所述的方法，其中，在权利要求2至14中任一项所述的干燥步骤 (C)之前，进行使所述碱性的壳聚糖与酸接触的步骤。19. 根据权利要求17或18所述的方法，其中，将所述酸喷涂至所述碱性的壳聚糖，或者 使所述碱性的壳聚糖与所述酸进行混合。20. 根据权利要求17至19中任一项所述的方法，其中，所述酸选自以下中的一种或它 们的组合：有机酸、羧酸、脂肪酸、氨基酸、路易斯酸、单质子性酸、双质子酸、多质子酸、核酸 和无机酸。21. 根据权利要求20所述的方法，其中，所述有机酸选自以下中的一种或它们的组合： 乙酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、乙酰水杨酸、葡萄糖酸和乳酸。22. 根据权利要求20所述的方法，其中，所述脂肪酸选自以下中的一种或它们的组合： 肉豆蔻脑酸、棕榈油酸、6-十六碳烯酸、油酸、反油酸、异油酸、亚油酸、反式亚油酸、α-亚 麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳六烯酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕 榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸、二十四烷酸、蜡酸。23. 根据权利要求20所述的方法，其中，所述氨基酸选自以下中的一种或它们的组合： 组氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸。24. 根据权利要求20所述的方法，其中，所述无机酸选自以下中的一种或它们的组合： 盐酸、硫酸和硝酸。25. 根据权利要求17至24中任一项所述的方法，其中，所述酸具有约1Μ的浓度。26. 根据权利要求17至25中任一项所述的方法，其中，所述酸以含所述酸和非溶剂的 酸液形式存在。27. 根据权利要求26所述的方法，其中，所述非溶剂选自乳酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸甲 酯、乙醇、丙酮、乙醇：水为80:20的混合物，或它们的混合物。28. 根据权利要求26或27所述的方法，其中，所述壳聚糖与所述酸液的比为约5:1至 约 1:5〇29. 根据权利要求17至28中任一项所述的方法，其中，所述碱性壳聚糖与所述酸混合 约5分钟。30. 根据权利要求17至29中任一项所述的方法，进一步包括对反应产物进行干燥的步 骤。31. -种能够通过权利要求17至30中任一项所述的方法得到的低内毒素的中性的壳 聚糖、低内毒素的中性的壳聚糖盐或低内毒素的中性的壳聚糖衍生物。32. -种中性的壳聚糖、中性的壳聚糖盐或中性的壳聚糖衍生物，包括小于50EU/g的 内毒素浓度。33. 权利要求33所述的低内毒素的壳聚糖盐在阻滞血流中的应用。34. 权利要求33所述的低内毒素的壳聚糖盐，用作阻滞血流的止血剂的应用。35. 权利要求33所述的低内毒素的壳聚糖盐，在用于浅表性非危及生命的出血或危及 生命的出血的伤口敷料中的应用。36. -种止血伤口敷料，包括权利要求31所述的低内毒素的壳聚糖盐。37. -种阻滞血流的方法，包括以下步骤：可选地，在可能的情况下，对伤口区域进行 清洁；将包括权利要求31所述的低内毒素的壳聚糖盐的止血伤口敷料施用至所述伤口区 域；以及对所述伤口区域施加恒压直至形成凝胶块。38.基本如说明书和附图中所述的低内毒素的碱性的壳聚糖、中性的壳聚糖、壳聚糖 盐、壳聚糖衍生物、工艺或方法。
【专利摘要】本发明涉及一种用于生产低内毒素的碱性的壳聚糖、低内毒素的碱性的壳质、低内毒素的碱性的壳聚糖衍生物或低内毒素的碱性的壳质衍生物的方法，并且还涉及一种用于生产低内毒素的中性的壳聚糖、低内毒素的中性的壳聚糖盐和低内毒素的中性的壳聚糖衍生物的方法，以及上述方法的产品。所述方法包括：使壳聚糖、壳质、壳聚糖衍生物或壳质衍生物与浓度小于0.25M的碱性溶液接触以形成混合物；使所述混合物放置小于12小时的时段；以及可选地，对所述混合物进行干燥。所述低内毒素的碱性的壳聚糖可用于制造其它有用的壳聚糖类产品。
【IPC分类】C08B37/08, A61K31/722, A61L15/28
【公开号】CN105408360
【申请号】CN201480036410
【发明人】C·哈迪, 安德鲁·霍加思, 琼·格莱德曼
【申请人】医疗行业产品有限公司
【公开日】2016年3月16日
【申请日】2014年5月29日
【公告号】CA2913850A1, EP3004179A1, US20160121022, WO2014191753A1